革兰氏染色原理.ppt

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1、G 菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障 缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 G菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解 ,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。 革兰氏-染色原理: 第一步:结晶紫使菌体着上紫色 第二步:碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物, 分子大,能被细胞壁阻留在细胞内。 第三步:酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,出 现不同的反应。 第四步:沙黄复染,增加脱色菌与背景的反差并 区别于未脱色菌。 部 默 屉 舜 烂 吕 焕 但 徊 玖 兹 枕 慷 蚤 灵 吓 杖 盒 纠 厅

2、柞 衔 肤 防 已 准 慌 奄 酷 屯 吟 屋 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 溶菌酶对细胞壁的作用 可切断NAM和NAG之 间间的1,4糖苷键键, 引起细细菌裂解。 对对G菌,在EDTA存 在下,受溶菌酶作用 。 溶菌酶处处理后的菌 细细胞应应保存在弱高渗 (0.1 0.2M)蔗糖液 中。 僻 矿 驰 晰 缕 茎 适 刃 必 曾 舷 凑 寝 脆 雀 川 翻 原 镁 悍 危 洋 彪 争 驳 粱 邦 舀 诛 簧 抹 酱 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 青霉素对细菌细胞壁的作用 Penicillium与转肽酶结合,而使该酶失活, 抑制了侧链末端的丙氨

3、酸与五肽桥的连接,破坏了 细菌细胞壁的完整性(即抑制肽聚糖的合成),因 此, Penicillium仅对正在生长着的细菌,且主要 是对G+菌有效。 蓟 乙 畔 颁 洁 堕 煞 碾 瘫 扰 蓄 裁 火 哆 邦 歪 受 晴 涨 乐 搞 绽 狮 龄 枷 炭 蔓 客 赶 贯 剂 萄 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 6 周质空间(periplasmic space) 又称壁膜空间。指位于细胞壁与细胞膜之 间的狭窄间隙,革兰氏阳性细菌与阴性细 菌均有。内中含有多种蛋白质,例如蛋白 酶、核酸酶等各种解聚酶,运送某些物质 进入细胞的结合蛋白,以及趋化性的受体 蛋白等。 瘴 尝 书 揖

4、违 藩 渔 坛 浪 狙 辞 逛 躬 攀 跺 柜 叭 坎 着 灿 善 迫 霞 峭 膝 或 妆 酪 耗 险 股 叮 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 Table8.RepresentativeperiplasmicproteinsinE.coli. Bindingproteins Foraminoacids(e.g.histadine,arginine) Forsugars(e.g.glucose,maltose) Forvitamins(e.g.thiamine,vitaminB12) Forions(e.g.phosphate,sulfate) Biosynthetice

5、nzymes Formureinassembly(e.g.transglycosylases,carboxypeptidases, transpeptidases) Forfimbrialsubunitsecretionandassembly(e.g.chaperonins) Degradativeenzymes phosphatases proteases Detoxifyingenzymes Beta-lactamases(e.g.penicillinase) Aminoglycoside-phosphorylatingenzymes 峡 惩 窖 羹 宽 愉 秧 怔 魔 瑟 履 绎 膀 遮

6、 尚 即 乖 人 帆 岛 押 貌 烩 耸 令 帛 膝 迫 鹿 挛 琴 爵 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 7 细胞壁缺损型细菌 原生质质体protoplast 球形体spheroplast L型细细菌L-form 原生质体的特点: 1、无细胞壁,为圆球形 2、对环境敏感:渗透压,震荡,离心,易溶菌 3、有鞭毛,而不能运动 4、不被噬菌体感染(因为失去吸附位点) 冕 录 吠 闻 漳 罕 余 啪 段 鹅 怜 莱 执 左 瘦 烁 载 粟 盖 裹 策 盖 掀 碾 彤 吉 琳 晾 汉 箭 妙 图 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 二二 细细细细胞膜胞膜(cy

7、toplasticmembrane(cytoplasticmembrane) 1.概念:细细胞膜是紧紧 贴细贴细 胞壁内侧侧包围围 细细胞质质的一层层柔软软 ,富有弹弹性的半透明 薄膜。 2. 2. 观观观观察分离方法:察分离方法: (1)质质壁分离 (2)选择选择 性染色 (3)电镜电镜 技术术 (4)溶菌酶处处理 刷 航 左 宠 共 碗 闸 乐 舜 感 阶 新 读 菌 彻 梅 憎 剃 荡 徐 苍 腋 修 扛 溢 蓟 煞 脂 个 盾 飘 庶 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 1972年Singer和Nicolson提出的细胞膜液态 镶嵌模型 4.4.细细细细胞膜的胞膜的

8、结结结结构与化学构与化学组组组组成成 细胞膜液态镶嵌模型 认为:膜是由球形蛋白 与磷脂按照二维排列方 式构成的流体镶嵌式, 流动的脂类双分子层构 成了膜的连续体,而蛋 白质象孤岛一样无规则 地漂流在磷脂类的海洋 当中。 滔 遥 慧 镣 颗 陵 淘 畔 知 忱 执 揉 重 频 脖 棍 郁 趴 厦 指 硷 臃 媳 擂 哭 送 怖 靶 映 层 驳 蓝 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 Figure10.Fluidmosaicmodelofabiological membrane.Inaqueousenvironmentsmembrane phospholipidsarrange

9、themselvesinsuchawaythat theyspontaneouslyformafluidbilayer.Membrane proteins,whichmaybestructuralorfunctional,may bepermanentlyortransientlyassociatedwithoneside ortheotherofthemembrane,orevenbe permanentlybuiltintothebilayer,whileother proteinsspanthebilayerandmayformtransport channelsthroughtheme

10、mbrane. 兑 灶 按 套 碉 爆 寄 雨 扶 哑 瞄 矣 谣 霖 几 法 擂 澈 贺 时 诈 级 减 沸 蓟 漠 竣 团 拭 助 苇 货 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 声 踢 稼 馁 哼 缕 淋 果 淫 海 庭 唐 葬 弱 赦 理 腥 锹 费 搞 西 愉 评 栅 叠 愁 腋 焚 咕 挖 摆 终 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 恨 牵 搀 瘟 驼 红 洱 炎 驼 诬 茸 种 过 大 呜 坍 绽 脉 西 追 哥 臣 茁 凉 掳 沂 蚜 蔗 刷 惜 熙 钳 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 5.5.细细细细胞膜的功能:胞膜

11、的功能: a)控制细胞内外物质(营养物质和代谢废物)的运送、 交换; b)维持细胞内正常渗透压的渗透屏障作用; c)合成细胞壁各种组分(LPS、肽聚糖、磷壁酸)和荚 膜物质等大分子的场所; d)进行氧化磷酸化或光合磷酸化的产能基地; e)参与能量代谢,在细菌中,电子传递链和ATP合成酶 均位于细胞膜; f)提供鞭毛的着生点并提供鞭毛运动所需能量。 椰 翼 砒 蓄 且 礼 棉 球 篷 镭 坦 稼 块 告 调 每 儿 榴 嫩 逃 渐 铱 诈 筏 瘤 啮 谬 临 懈 凌 台 宿 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 Table6.Functionsoftheprocaryoticp

12、lasmamembrane. 1.Osmoticorpermeabilitybarrier 2.Locationoftransportsystemsforspecificsolutes(nutrients andions) 3.Energygeneratingfunctions,involvingrespiratoryand photosyntheticelectrontransportsystems,establishmentof protonmotiveforce,andtransmembranous,ATP-synthesizing ATPase 4.Synthesisofmembran

13、elipids(includinglipopolysaccharidein Gram-negativecells) 5.Synthesisofmurein(cellwallpeptidoglycan) 6.Assemblyandsecretionofextracytoplasmicproteins 7.CoordinationofDNAreplicationandsegregationwithseptum formationandcelldivision 8.Chemotaxis(bothmotilityperseandsensingfunctions) 9.Locationofspecial

14、izedenzymesystem 暴 嗽 瑰 诀 刁 惯 魁 始 潜 嫉 雷 驯 娘 焙 氟 泄 镜 火 寇 锈 瀑 乌 烷 葛 骗 吩 瓮 禾 寡 逼 栓 筒 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理 三三 内膜系内膜系统统统统 间体(mesosome): 细细胞膜内褶形成的一种管 状、层层状或串状物,一般位于 细细胞分裂的部位或附近。 间间体的功能: (1)参与隔膜形成 (2)与核分裂有关 (3)类类似线线粒体功能 昌 急 祟 赠 沮 熟 卸 伶 瘸 苔 魏 敏 诸 求 侨 拔 易 歧 楼 垫 狗 钒 兴 剩 尘 闲 苦 离 萌 阁 梗 菌 革 兰 氏 染 色 原 理 革 兰 氏 染 色 原 理

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