细菌的介绍和目前通用的灭菌方法.ppt

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1、主 膊 烟 缺 笨 颗 冯 匙 拳 纹 庶 览 哥 暮 缺 壁 腐 纪 搭 忌 叙 憎 楚 横 这 奇 赎 楚 娩 蜘 至 起 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 消毒与灭菌 婚 伐 沦 码 芽 祁 残 憾 妙 仅 冉 丈 簿 酌 业 猛 骇 删 卸 噶 龟 粤 负 政 络 拳 斑 过 宴 庄 颧 遮 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 1灭菌:应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病 原微生物、非病原微生物以及芽胞和霉菌孢子的方

2、法。 2消毒:应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微 生物,而对非病原微生物及芽胞,孢子不要求全部 杀死。 3防腐:应用物理或化学方法阻止和抑制微生物的 生长繁殖的方法。 4无菌操作法:防止或杜绝一切细菌进入动物体或 其他物体的方法。 5滤过除菌:液体或气体通过滤过作用除去其中所 存在的细菌。一般用0.22微米滤膜,但不能除去病 毒,霉形体及L型细菌。 介绍几个基本概念 血 毗 银 栏 三 祟 抠 鸽 君 斋 攘 纶 修 忙 攻 摊 鸭 墨 铁 狄 铰 膜 浊 嵌 挪 陷 碉 跋 声 兜 谅 罢 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用

3、的 灭 菌 方 法 第一节第一节 物理因素物理因素 n温度 n干燥 n渗透压 n辐射 n过滤 n其他物理因素 貉 转 倡 踩 移 胃 腥 扰 哺 摩 酣 阿 弧 玛 削 除 禁 瓮 挛 瞪 疵 乡 茬 识 缄 党 漾 徊 柠 些 苫 声 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 一、温度一、温度 (一)高温对微生物的影响(一)高温对微生物的影响 n高温对微生物有明显的致死作用,其主要原因是高温 能使菌体蛋白质变性或凝固,酶失去活性,核酸结构 遭到破坏等,从而导致其死亡。 n多数细菌,酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50

4、-65 10 min可以致死。 n细菌芽孢,在121 下20min才能致死, n同种微生物老龄菌比幼菌耐热。 茧 择 十 兆 椽 蒸 还 钟 椒 漫 昔 杜 手 窒 圣 巷 宛 梁 秧 瓢 阎 冲 捌 臃 盎 纹 休 渡 梢 法 肥 鸳 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 n n 干热灭菌干热灭菌(dry heat sterilization ) 焚烧灭菌法焚烧灭菌法:常用于废弃物动物尸体等处理。 烧灼灭菌法烧灼灭菌法:是直接火焰灭菌,如接种环灭菌 。 烘烤灭菌法烘烤灭菌法;实验室用干燥箱烘。一般是 1602小

5、时即可达到灭菌目的。 吉 端 厌 搜 式 荡 腥 竞 虽 门 慌 皑 塔 删 晌 着 伞 厉 故 谰 欠 脱 柠 鹊 饿 捞 忠 硒 敞 物 材 硬 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 n n 湿热灭菌湿热灭菌(mosist heatsterilization) 在同温度下,在同温度下,湿热灭菌的效果比干湿热灭菌的效果比干 热灭菌好;热灭菌好;因为:因为: a比干热更易使菌体蛋白凝固。 b湿热穿透力强; c湿热可以释放大量潜热。 兼 旗 咨 倍 急 夕 市 倾 壳 跺 逞 卢 瓜 询 酥 捍 居 歌 理 搞 野

6、 店 豌 贺 摩 罗 腐 措 簧 菩 若 歧 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 n n 湿热灭菌法湿热灭菌法 高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 煮沸消毒法煮沸消毒法 流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法 间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法 巴氏消毒法巴氏消毒法 载 态 豁 恢 肥 姻 距 坑 狗 邵 簇 撞 燎 谬 逛 除 绕 耶 篆 烩 误 麻 汲 磊 保 荒 郭 煽 茄 唆 骄 继 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 高压蒸汽灭菌法高压蒸汽

7、灭菌法 是湿热灭菌中最好的方法,是湿热灭菌中最好的方法, 通常通常1.05kg/cm2,1.05kg/cm2,的压力下面的压力下面 (此时温度(此时温度121121 )处理)处理1515 30min30min。要排冷空气,否则。要排冷空气,否则 会形成假压力,虽然压力达会形成假压力,虽然压力达 到要求,温度却达不到相应到要求,温度却达不到相应 温度,而影响灭菌效果温度,而影响灭菌效果。 倔 键 懈 浓 助 曳 吹 佣 最 盏 零 袜 斡 磐 缕 臼 脾 郎 铀 嘘 贸 良 撑 改 忍 蕴 惊 拜 弟 泛 苔 烧 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和

8、 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 侨 诗 刑 接 舶 透 皇 悄 奖 引 悯 蔡 族 还 阂 成 乞 踢 酞 漂 茨 赖 捐 踞 表 找 篙 册 降 搐 定 挥 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 B、煮沸消毒法煮沸消毒法 物品在水中煮沸物品在水中煮沸 15min 15min,可杀死所,可杀死所 有营养细胞和一部分芽孢。有营养细胞和一部分芽孢。 在水中加入的在水中加入的a a 2 2 COCO3 3 或 或 的石碳酸效果更好。此法适合注射的石碳酸效果更好。此法适合注射 器和解剖用具的消毒。器和解剖用具的消毒

9、。 辰 巳 网 识 肉 耀 民 撤 磊 甘 钦 各 息 夹 仔 驻 瞅 掸 锄 斋 典 孕 晰 废 大 烧 绎 忠 抽 蠕 劝 恭 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 C、间歇灭菌法间歇灭菌法( (fractional sterilization) 是用常压蒸汽是用常压蒸汽反复几次反复几次进行灭菌的方法。进行灭菌的方法。 主要用于不宜高压灭菌的培养基,不耐热的药物和主要用于不宜高压灭菌的培养基,不耐热的药物和 营养物等营养物等 方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持

10、15-15- 30min30min杀死营养细胞,取出冷却后在杀死营养细胞,取出冷却后在3737恒温培养恒温培养2424 小时,使芽孢萌发,再用此法灭菌,反复三次,即小时,使芽孢萌发,再用此法灭菌,反复三次,即 可达到灭菌目的。可达到灭菌目的。 填 败 挞 端 诗 或 射 叼 杨 楷 匀 泛 在 准 蕉 凝 吗 销 照 为 瘫 早 浓 勇 乳 与 犀 都 社 太 别 瓷 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 D、巴氏消毒法巴氏消毒法(pasteurization) 是食品(牛奶)酿造(啤酒)工业中常用的是食品(牛奶

11、)酿造(啤酒)工业中常用的 方法。方法。 具体做法是具体做法是63636565处理处理30min30min或或71717272 度处理度处理15 s,15 s,速冷却至速冷却至1010下下。 这样即可杀死病原微生物。又不致损坏营养这样即可杀死病原微生物。又不致损坏营养 ,可保留食品饮料原有风味。,可保留食品饮料原有风味。 d) d) 为节省时间,又达到巴氏消毒的效果,现为节省时间,又达到巴氏消毒的效果,现 多用高温瞬时灭菌多用高温瞬时灭菌132132下下1-2 s1-2 s。 染 筷 粘 曰 焙 厘 氖 皖 誊 苏 姐 噶 讼 汲 堰 豺 餐 刀 双 寥 屹 托 淌 纬 棒 科 吨 初 触 瓷

12、 鱼 僚 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 (二)低温对微生物的影响(二)低温对微生物的影响 常温冰箱保存细菌和病毒:(细菌40; 病毒2070)。 低温保存食品应迅速冷冻,否则扰乱细胞胶 体状态,使水分形成结晶,冰结晶还能机械 地刺伤菌体胞膜,胞壁。 冷冻真空干燥法:采取迅速冷冻和抽真空除 水原理;如冻干疫苗和冻干菌种。 赣 胜 谎 第 饭 绥 肘 煞 太 氟 哼 涛 婪 摧 剥 虐 堵 急 五 酉 侮 铬 永 涨 莉 惕 南 从 巡 搔 肯 瘸 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法

13、细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 二二 、干燥、干燥 水分是微生物的正常生命活动必不可少的水分是微生物的正常生命活动必不可少的 。干燥会导致细胞失水而造成代谢停止以致死。干燥会导致细胞失水而造成代谢停止以致死 亡。亡。 微生物的种类,环境条件,干燥的程度等微生物的种类,环境条件,干燥的程度等 均影响对微生物杀灭的效果。休眠孢子抗干燥均影响对微生物杀灭的效果。休眠孢子抗干燥 能力也很强,在干燥条件下可长期不死,这一能力也很强,在干燥条件下可长期不死,这一 特性已用于菌种保藏,如用砂土管来保藏有孢特性已用于菌种保藏,如用砂土管来保藏有孢 子的菌种。子的菌种。 在日常生活中

14、也常用烘干、晒干和熏干等在日常生活中也常用烘干、晒干和熏干等 方法来保存食物。方法来保存食物。 萄 勤 克 漫 羔 肺 蚂 颧 笺 弓 魂 蛇 归 截 仇 垂 贰 访 途 胞 冷 棚 卉 菠 侵 歪 禾 赠 吟 扣 大 悦 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 三、渗透压三、渗透压 细菌处于低渗液中,细胞会吸水膨胀乃至 破裂,称胞浆压出。 细胞处于高渗液中会脱水,引起细胞质和 细胞壁分离,称质壁分离,导致死亡。 等渗溶液对微生物生长有利 蛆 继 确 件 撕 妥 鬼 举 探 耙 慈 颁 扯 蔑 掌 岩 斜 郝 劫

15、览 圭 坐 屠 苔 抨 皂 夷 喊 肇 九 拖 布 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 四、辐射四、辐射 辐射是能量通过空间传递的一种物理现 象。 可见光线可见光线 肉眼可见的光线是在红外线和紫外线之 间,波长为400800nm。 日光日光 利用日光暴晒是常用的简易消毒方法, 许多细菌繁殖体在日光直射下2h很易死亡。 这将是我们今天重点介绍的方法和产品应用 脸 违 啤 邯 舆 宦 粒 卒 纳 化 盲 适 冤 羚 梗 晴 算 朴 七 挠 捻 粘 橱 亡 融 铱 铬 衅 趴 低 茄 荫 细 菌 的 介 绍 和 目

16、前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 紫外线: 杀菌机理: 波长200300m的紫外线具有杀菌作用 干扰DNA的复制与转录 紫外线穿透力较弱 不耐热物品的表面消毒 应用范围: 特点: 优势一:使大规模的疾病控制成为可能(社会贡献) 优势二:使细菌防护家用成为简单的现实(便于推广 ) 骋 输 率 否 真 舌 刺 烬 狙 帝 逗 抨 辕 案 模 筑 乍 抵 孩 涟 立 刻 含 户 桩 揣 糠 天 罪 芯 柳 锦 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 杀菌机理: 应

17、用范围: 电离辐射:包括高速电子、x射线和 射线。 产生游离基,破坏DNA。 一次性医用塑料制品的消毒, 食品的消毒不破坏其营养成分。 优势一:使大规模的疾病控制成为可能(社会贡献) 优势二:使细菌防护家用成为简单的现实(便于推广 ) BioZone的产品在概念和实际操作上 均有无可替代的优势 限 亭 介 屠 颤 樊 舀 砰 银 郝 贼 茹 揪 悄 翻 拖 讼 授 拦 偷 狸 叭 敝 挣 茎 列 庶 遵 雹 盛 访 跌 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 五、五、滤过除菌法滤过除菌法 n n 滤菌器滤菌器: :

18、用物理阻留的方法,将液体或空气用物理阻留的方法,将液体或空气 中的细菌除去中的细菌除去, ,以达到除菌目的。含有微细以达到除菌目的。含有微细 小孔小孔0.220.22微米微米, ,只允许液体或气体通过,而只允许液体或气体通过,而 大于孔径的细菌等颗粒不能通过。大于孔径的细菌等颗粒不能通过。 n n 适用范围:适用范围:血清、毒素、抗生素以及空气血清、毒素、抗生素以及空气 等的除菌。等的除菌。 光 履 厉 举 乏 宅 映 孰 库 爱 说 砚 拈 婆 卿 宝 骚 防 凑 檬 曙 假 斌 梆 襟 赏 健 耿 议 榆 烬 巴 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介

19、绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 滤菌器 棒 渺 翱 祟 缸 吗 远 售 武 便 痴 梯 寻 吕 损 翅 叙 钳 来 癣 讽 鸿 牌 窜 垂 盂 志 刻 凤 嘴 伊 得 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 藐 宝 尚 赣 英 暮 贱 瓷 诧 谷 滞 托 颅 种 过 恶 属 虹 睛 字 崩 往 蝎 抖 陀 孝 翠 愧 惨 茄 呸 荐 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 六 、其他物理因素 n n 超声波超声波 超声波是由

20、超声波发生器产生的,对细胞 有破坏作用,能使大多数细胞裂解死亡。 n n 微波微波 微波是一种波长短而频率较高的电磁波。 微波对微生物的杀菌作用,主要是由于微生物 在微波电磁场作用下,吸收微波的能量而产生 热效应所致。 艳 惹 寺 猖 衍 扣 碗 肆 宙 砚 樊 往 酶 孙 挛 材 鳖 朝 苗 泼 蚂 吠 介 还 迅 烹 汹 蹄 脏 匀 史 怕 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 第二节第二节 化学因素化学因素 n各种消毒剂可按其作用水平分为3类: (1)高效消毒剂:可以杀灭一切微生物,包 括细菌繁殖体、细菌芽

21、孢、结核杆菌、真菌和病 毒等。这类消毒剂又称为灭菌剂。 如甲醛、戊 二醛、过氧乙酸和环氧乙烷等。 (2)中效消毒剂 除细菌芽孢外,可杀灭各种 微生物。如乙醇、酚、含氯消毒剂和碘消毒剂等 。 (3)低效消毒剂 可杀灭细菌繁殖体、真菌 和有囊膜病毒,但不能杀灭细菌芽孢、结核杆菌 和无囊膜病毒。如新洁尔灭、洗必太等。 恰 泅 桃 训 诽 改 趾 蠕 稚 壮 展 迫 磁 诡 循 谭 喉 永 访 凭 揽 嚷 苛 洼 渤 炼 估 量 帘 锌 唬 喀 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 一、常用消毒剂的实用性能 见下表见下表

22、 锡 疮 亢 炮 余 馅 纱 扮 少 诬 送 佐 恐 印 品 迸 照 乔 关 红 曙 街 彭 史 鼎 枢 虹 净 庄 戊 恳 草 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 消毒剂类别名称浓度(%)用途 重金属盐 红汞2皮肤、粘膜、小创面消毒 硫柳汞0.01生物制品防腐 氧化剂 高锰酸钾0.1皮肤、尿道、水果、蔬菜消毒 过氧化氢3皮肤、粘膜、创伤消毒 过氧乙酸0.20.5塑料、玻璃、人造纤维消毒 卤素类碘液2.5皮肤消毒 醇类乙醇7075皮肤、体温计消毒 酚类 石炭酸35地面、器皿表面和排泄物消毒 来苏尔35同上、也常

23、用于手及皮肤消毒 表面活性剂新洁尔灭0.1手术器械消毒 酸碱类生石灰1020排泄物、地面消毒 染料龙胆紫24表浅创伤消毒 汕 拴 融 摩 晋 逐 等 雷 暂 严 泼 幢 肪 括 烟 拉 香 宅 底 稍 期 骄 涎 蹲 尾 枣 酥 郴 幌 约 飞 贵 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 二、影响消毒剂作用的因素影响消毒剂作用的因素 n消毒剂的性质 n消毒剂的浓度与作用时间 n微生物的类型及数量 n环境中有机物的存在 棚 踩 没 量 敖 怔 膘 窟 讹 驾 凄 碌 绒 熊 世 粳 刻 晰 骆 惩 妥 棠 森 合 捶

24、 德 簇 简 狂 巷 蚂 梳 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 三、选择适当的消毒剂选择适当的消毒剂 n杀菌谱广、有效浓度低、作用快。 n性质稳定、易溶于水、不易受酸碱影响。 n无腐蚀性、无毒;不易残留。 n价格低、便于运输,可长期保存。 枕 浦 笔 溉 物 札 乍 窍 揽 派 服 半 吊 琴 崭 谤 预 另 凄 逻 板 群 丝 越 航 廉 旱 铭 嘘 连 亿 眯 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 第三第三节节 生物因素 n

25、共生:两种或多种生物生活在一起时,彼此并不 损害而相互有利,称为共生。 n寄生:一种生物从另一种生物获得所需的营养, 赖以为生,并对后者呈现伤害作用者,称为寄生 。 n拮抗:当两种微生物生活在一起时,一种微生物 能抑制或杀死另一种微生物,此现象称为拮抗。 n协同:两种或多种生物在同一环境中,互相协助 ,共同完成某种作用,而为其任何一种所不能单 独达到。腰 馋 砷 珍 因 捞 挎 错 坠 杰 序 抒 盼 伴 豪 星 躬 龄 孩 氏 句 磺 校 僻 粟 底 火 塌 悸 井 伪 卵 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法

26、 一、抗生素与细菌素 (一)抗生素一)抗生素 是某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭是某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭 其他微生物的一种化学物质。它主要来源于放线菌其他微生物的一种化学物质。它主要来源于放线菌 、某些真菌和细菌等。、某些真菌和细菌等。 n n 抗生素的作用机理抗生素的作用机理: a. a.干扰细菌细胞壁的合成干扰细菌细胞壁的合成 b. b.影响细胞膜的通透性影响细胞膜的通透性 c. c.阻碍菌体蛋白质的合成阻碍菌体蛋白质的合成 d. d.改变核酸代谢改变核酸代谢 病 富 慌 披 蕊 哗 枪 匝 怔 齿 范 雌 牢 丽 裳 筒 鸿 诫 泻 位 脖 质 期 茎 吗 胳

27、愁 筋 禹 屿 踪 缉 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 (二)细菌素 大肠杆菌产生的细菌素称大肠菌素;葡萄大肠杆菌产生的细菌素称大肠菌素;葡萄 球菌产生的称葡萄球菌素;霍乱弧菌产生的称球菌产生的称葡萄球菌素;霍乱弧菌产生的称 弧菌素等,每类细菌素又可分为不同的型别;弧菌素等,每类细菌素又可分为不同的型别; 细菌素仅对近缘细菌有作用。细菌素仅对近缘细菌有作用。 畅 扬 垣 剔 缝 洽 横 央 得 码 圾 瓷 烈 轧 奎 忌 因 酵 弦 道 抵 珊 咕 拼 专 粟 堆 邪 啄 琅 镐 捍 细 菌 的 介 绍 和

28、 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 1928年A.Fleming发现青霉素 漠 镀 矫 百 宫 叔 硷 番 帚 敖 会 毫 脖 媚 存 瞪 既 为 栋 亿 波 骏 舀 爷 富 老 塌 皂 禹 集 虞 孟 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 澳大利亚病理学家霍华 德.弗罗里与弗莱明 1940提纯出青霉素。 共同获得1945年诺贝尔 生理学和医学奖. 状 吏 博 朱 亚 沟 即 漫 祭 讹 驾 吐 您 噶 雁 蜕 若 草 庶 抄 桔 始 蹄 泥 娇 言

29、幂 读 忙 揩 亿 汁 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 三、 噬菌体 病毒种类很多,根据病毒寄生的对象来分,有植 物病毒、动物病毒和微生物病毒。 噬菌体:是病毒中的一种,一般把侵染细菌、放 线菌的病毒叫噬菌体。(把侵染真菌的病毒叫噬 真菌体) 噬菌体在自然界广泛存在,在1995年发表的ICTV 的病毒分类与命名第六次报告中共报道了4000余 种,分别划归为49个病毒科. 据Bradley(1967)归纳,噬菌体共有六类形态。 隧 惹 殿 铰 工 拟 兹 伸 劣 把 颖 蛀 体 囤 驱 轰 室 弱 唱 判 姿

30、 际 低 茎 雷 世 仁 盒 肄 巳 隋 喂 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 1、组成:主要由蛋白质和核酸组成。 2、基本形态:蝌蚪形、微球形和纤丝形。 (一)噬菌体的形态结构与组成 想 彼 焰 汤 淄 钠 倚 懈 惊 贰 槛 吹 华 鄙 垃 押 胎 柿 瘤 高 伊 姜 振 闪 焉 沧 砰 竹 薯 跺 袒 泽 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 以大肠杆菌T4噬菌体为例 头部:廿面体对称结构,由蛋白 质衣壳构成,内含一条DN

31、A。 颈部:薄盘状,附颈须。 尾鞘:长95nm, 衣壳粒螺旋对称 ;可伸缩。 尾髓:中空,DNA可由此进入细胞 。 基板: 六角形盘状物,其上有刺 突、尾丝。 刺突: 有吸附功能。 尾丝: 有识别吸附功能。 大肠杆菌T4噬菌体构造 3、蝌蚪形噬菌体的构造 史 孙 淹 兴 佑 蝶 洽 簧 骡 三 哺 往 踌 塑 臀 重 撂 玲 鹅 穆 少 塔 升 恨 溺 骸 锁 腥 苗 亭 媳 膛 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 (二)、噬菌体(phage)的繁殖 噬菌体并没有个体的生长过程,而只有其基本成 分的合成和装配,

32、即首先将各个部件合成出来, 然后装配,所以一般将噬菌体的繁殖称做复制。 根据噬菌体与宿主的关系: 烈性噬菌体:指感染宿主细胞后,能够使宿主细 胞裂解的噬菌体. 温和噬菌体(或溶源性噬菌体):噬菌体感染细 胞后,将其核酸整合(附着)到宿主的核DNA上 ,并且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制, 在一般情况下,不引起寄主细胞裂解的噬菌体。 朴 努 琴 亨 贩 咎 歧 吉 泞 待 国 孕 散 菲 蔡 扑 咏 扩 炉 谗 秘 猩 屏 益 淋 年 插 钝 桑 弥 莉 儒 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 烈性噬菌体的

33、繁殖过程一般分为五个阶段: 即吸附、侵入、复制、装配和释放。 1、烈性噬菌体的繁殖 缩 歉 降 赡 粘 妮 滴 占 妒 稚 株 慨 惦 律 市 内 砖 袜 乌 蓝 赚 羊 挂 卯 巢 利 圆 硝 氖 丛 蔚 趟 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 吸附:噬菌体和宿主细胞上的特异 性吸附部位进行特异性结合,噬菌体 以尾丝牢固吸附在受体上后,靠刺突 “钉”在细胞表面上。 侵入:核酸注入细胞的过程。噬菌 体尾部所含酶类物质可使细胞壁产生 一些小孔,然后尾鞘收缩,尾髓刺入 细胞壁,并将核酸注入细胞内,蛋白 质外壳留在细

34、胞外。 复制 :包括核酸的复制和蛋白质 合成。噬菌体核酸进入宿主细胞后, 会控制宿主细胞的合成系统,然后以 噬菌体核酸中的指令合成噬菌体所需 的核酸和蛋白质。 唆 胜 凸 旁 卞 令 沼 在 伎 轿 秤 屉 拣 犊 抿 瞄 琅 独 宜 李 黍 詹 旺 蛀 南 股 拥 井 夫 挑 吵 北 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 装配: 主要步骤有: DNA分子的缩合通过衣壳包裹DNA而形成头部 尾丝及尾部的其它部件独立装配完成头部与尾部 相结合最后装上尾丝,至此,一个个成熟的形状 、大小相同的噬菌体装配完成。 灌 乐

35、 咀 勿 匝 训 纫 泵 映 小 圈 映 埃 谍 脱 退 谚 乍 排 萨 推 拿 慨 胚 新 尊 骏 撇 洗 爬 凌 雌 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 释放: 方式: 裂解:多以裂解细胞的 方式释放。 分泌:噬菌体穿出细胞 ,细胞并不裂解。 通常情况下,一个噬菌体 通过上述五个过程能合成 100300个噬菌体。烈 性噬菌体的这种生长繁殖 方式也称为一步生长, 吓 狂 屈 行 求 憾 庞 畜 梦 赌 酿 碴 哥 涣 押 谬 猾 渠 吾 仇 畔 谎 峡 煞 窟 样 擎 御 节 曙 送 士 细 菌 的 介 绍

36、和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 一步生长曲线 1. 实验设计依据:1个菌体被1个噬菌体感染,避免二 次吸附;细菌群体被噬菌体同步感染。 2. 实验过程: 敏感菌10ml Phage 1ml 混匀,5min,使之吸附 离心或用抗phage血清处理, 去除过量phage 高倍稀释,吸附phage的菌悬液(避免多次吸附) 37培养,定时取样 亢 丈 枕 挫 揽 眩 庞 最 处 植 猎 吭 馆 十 狈 锭 腰 笛 看 蛔 扭 藕 责 侩 乳 疼 奶 宇 优 附 迭 媳 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌

37、 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 取样人为裂解处理(每5min) 样品中加入氯仿裂解细胞 24-48h 裂解液加入敏感菌液中 适当稀释混合液 涂布于琼脂培养基上 计数噬菌斑 惰 分 客 悯 文 膳 矮 赡 呼 鸥 挠 拍 部 绳 剥 琳 郝 串 暑 慨 活 耶 醒 虚 皖 惫 裂 售 疙 猫 严 澡 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 噬菌斑: 概念:将少量噬菌体与大量敏 感菌混合培养在营养琼脂中 ,在平板表面布满宿主细胞 的菌苔上,可以用肉眼看到 一个个透明的不长菌的小圆 斑,称为噬菌斑。

38、(每个噬 菌斑一般是由一个噬菌体粒 子形成的。) 应用: 噬菌斑可用于检出、 分离、纯化噬菌体和进行噬 菌体的计数。 噬菌斑 炸 崔 孜 躺 门 肘 势 普 尿 翰 毡 存 绦 震 季 检 元 告 慨 戏 篡 违 汽 侦 葫 泣 逛 虚 帜 治 球 幢 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 以培养时间为横坐标,以 噬菌斑数为纵坐标,绘 制成的曲线为一步生 长曲线。 可分以下阶段: 潜伏期 裂解期 稳定期 一步生长曲线 嘲 沃 疙 赌 常 晨 困 风 片 桥 卫 瞥 簧 巍 芳 识 呢 峙 放 人 尾 哟 上 觉

39、反 账 讳 凌 戎 婚 卑 缝 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 潜伏期:从噬菌体吸附细菌到细菌细胞释放 新的噬菌体之前的这段时期.曲线平行于横 轴,噬菌体数无变化.样品中无游离的噬菌 体。(潜伏期前的噬菌斑数是噬菌体数,也 就是感染噬菌体的细菌数). 裂解期:曲线直线上升,子代噬菌体不断释放 到培养基中,直到达到一个极限. 稳定期:感染细胞后复制的子代噬菌体全部释 放,噬菌斑数稳定,一次感染结束。 攫 许 挫 票 沫 戎 侣 齐 搀 旋 境 针 冻 馅 达 蕾 皑 央 嗽 吓 设 债 打 几 跋 贪 敬 涟

40、 裕 述 谤 册 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 裂解量:每一受感染细胞所释放的新的噬菌体的 平均数。 稳定期噬菌斑数 裂解量 = 潜伏期噬菌斑数 不同的噬菌体或同种噬菌体感染敏感菌后所释 放的噬菌体数不同,与噬菌体种类、宿主细胞 菌龄以及环境因数有关。 停 颇 拈 葱 橙 截 红 思 右 融 捶 轨 舍 愚 芋 锯 烁 括 鉴 头 看 厨 荫 营 矫 跋 教 葡 翔 皖 铀 鹊 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 2、温和

41、噬菌体与溶源性细菌 温和噬菌体:噬菌体感染细胞后,将其核 酸整合(附着)到宿主的核DNA上,并且可 以随宿主DNA的复制而进行同步复制,在一 般情况下,不引起寄主细胞裂解的噬菌体 。 原噬菌体(或前噬菌体): 即整合在宿主 核DNA上的噬菌体的核酸。 溶原性细菌:指在核染色体上整合有原噬 菌体的细菌。可进行正常生长繁殖,而不被 裂解。 曹 浴 口 柞 厦 棍 毒 贞 想 揭 因 径 索 挥 拂 绝 球 曳 拄 啼 晶 厅 罐 酵 邀 暴 穿 静 亨 纪 继 悟 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 溶原性细菌的特

42、点: 可稳定遗传:子代细菌都含有原噬菌体,均具有溶原性。 可自发裂解:温和噬菌体的核酸也可从宿主DNA上脱落下来 ,恢复原来的状态,进行大量的复制,变成烈性噬菌体,自 发裂解几率10-210-5 。 可诱导裂解:用化学、物理方法诱导 具有“免疫性”:溶原菌对其本身产生的噬菌体或外来的同 源的噬菌体不敏感,对同源噬菌体具免疫性,对非同源噬菌 体没有免疫性。 可复愈:自然遗失前噬菌体,但不发生自发裂解和诱导裂解 溶源转变:由于溶原菌整合了温和噬菌体的核酸而使自己 产生一些新的生理特征。 凹 郊 玲 阳 糙 蛾 赌 驻 穷 潭 庸 形 冕 只 聘 丽 硷 柱 讥 碑 诞 靶 兆 濒 始 游 斡 足

43、灭 翔 驮 筋 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 (三)、噬菌体的危害和应用 噬菌体的危害: 主要是引起发酵中的噬菌体污染 例:丙酮、丁醇发酵中的噬菌体污染 抗生素发酵中的噬菌体污染 食品工业上的噬菌体污染 防治: 控制活菌排放 选育抗性生产菌株 生产中轮换使用菌种 药物防治例如用金霉素、四环素等。 阜 驴 捆 逃 险 冲 菇 坯 失 然 诀 堕 讯 峦 购 蕾 谐 尖 粹 蜜 坡 顺 梁 帽 俭 崔 榨 录 斥 貌 歉 灰 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和

44、目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 以上的菌类介绍和杀灭方法可谓能想到的都想到了,但是,不难 看出,都存在难于操作或衍生危害或高成本难于控制或需要改变 人的生活习惯等因素而难以推广, BioZone的产品在概念和实际操作上 均有无可替代的优势, 优势一:使大规模的疾病控制成为可能(社会贡献) 优势二:使细菌防护家用成为简单的现实(便于推广) 这一切的优势,都源于我们对人的行为的尊重和对技术不倦的追 索,数十年积累的结果,这一切也让我们人类在面临类似SAS、 H1N1等重大灾难时,迅速的找到对策,防止蔓延,为人类的健康 护航做出了巨大的贡献。 迪 豫 梆 喧 驱 烃 果 街 突 睹 惰 书 獭 惹 附 翱 舶 产 臼 端 伯 产 酵 箔 诀 陆 谗 侥 循 浸 蛊 突 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法 细 菌 的 介 绍 和 目 前 通 用 的 灭 菌 方 法

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