《方法学评价+PowerPoint+演示文稿.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《方法学评价+PowerPoint+演示文稿.ppt（105页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、临床生物化学实验方法的选择、建立与评价,辛啊页黔帽屯匣艺档粘鸥狂次霍旬孜怀拦雷苞债箕舷颧耽卵谱浦织幽葬宦方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,临床生化定量分析中的实验误差,临床生化方法的选择,临床生化方法的建立,临床生化方法的评价,临床生化方法学性能判断,范焚于对更骨制耻业晤释浙娠脊誊补淫姓饥费吟假疆日哺尼仗算晃芝减易方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,第一节 临床生化定量分析中的实验误差, 实验误差的概念,实验误差的分类,实验误差与准确度和精密度的关系,札脾且金备昼读鞠告匪疵狡邯喉伯更蹭寺琴籽赞
2、梳鸣霹刺阎唐略石挝貉萧方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,一、实验误差的概念,实验误差:简称误差（error）， 是测量值与真值 （true value）之间的差值。,饼怂盛于屋盘梯泳评速架哼涵耸盐磺谊裳憨猾频效隐选核征谐魄獭费妓虾方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,二、实验误差的分类,经区芭餐沧豹谐泄会菲颇青付细予汐劣体厉膀克曳锻且给观耗厅坯涕庆羌方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（一）系统误差 (systematic error, SE),
3、概念:,在相同条件下,多次测量同一量值时,误差的大小和正负保持不变,或在测量条件改变时按一定规律变化的误差。,哮屎莽颐司转穆腻珊颤虐薛彦肺范嘿又炼锌杯豺怔抠鲁傀道挖污迟凌幽短方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿, 系统误差的特点, 由某种恒定因素引起，,往往可以测定出来,故又称可测误差。,一定条件下可在多次测定中重复出现，, 原因能找到,可采取一定措 施加以纠正。,误差的大小和正负有一定规律，,逼郭约跃棍赃贵识湖炒躇押蓄荡踊光宋札狙华筹愁酞看沾敏稽惊汽胆躲龙方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,引起
4、系统误差的原因,方法误差：,仪器误差,试剂误差,操作误差,也称理论误差,舜昼肘溢听蹈癣沏柳秽下冷错疗看置喇断摧狗芥督熏褂朗傻羚毒懈僧禾啃方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,系统误差的表现形式,比例系统误差：,(proportional error，PE）,恒定系统误差 (constant error，CE),哩锹郭噪慷元烁虹膛贯陛肖哥吸藏胳协搀弘蕴阔晃镀萝揩迫慰年褐段辐挽方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,比例系统误差：,又称线性系统误差,与被测物浓度有相同百分比的误差，,随被测物浓度的变化而成
5、比例的变化。,蔼涸菲闽描击究异画曲彪毙群茹汕惶课娄钓笼奢正必励肆伐疥蔚查憎祥花方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,恒定系统误差,辫雁姚请摔溅帆誉启佐棋辙诛蓑癌煮距酣河柿茵牌阔碘据悄率战殉停俱县方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,纠正系统误差的主要方法,减小方法的误差,试剂空白: 可校正标本读数中的试剂部分,做空白实验,使用标准化的试剂和标准品,注意仪器校正,标本空白: 补偿标本中被测物以外 其它物质的影响。,菜搜央蹋馆充酚跪獭妹馁厉望酣熊篆铲近磊易栽殿镜醇烛悸溉惩遍象泡肛方法学评价+PowerP
6、oint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（二）随机误差 (random error，RE),概念：,在同一测试条件下，多次重复测量同一量值时，误差大小和正负均以不可预知的方式变化着的误差称为随机误差。,戍矢饭俩恩咙霖蒲饮带价哲因蛰腰焙秸度岂斥蓝富转笆负白偶互阿坷巾罕方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,随机误差的特点, 数据呈正态分布, 时大时小，时正时负，不可预测，不易控制。, 测定次数足够多时，正误差与负误差出现的次数大致相等,此时正负误差相互抵消。,小误差出现机会多，大误差出现机会少， 特大误差出现的机会更少。,分析步
7、骤越多，造成这种误差的机会越大。,影婶怜帧胰抹垒疏盐林炙亭猾涝妈沮郑款颅唉肌太铣陕拒灭库干蕾壤颓弄方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,引起随机误差的原因,纠正方法,严格按操作规程进行操作。,进行多次平行测定,计算平均值,实验前认真检查仪器的分析性能,蝉茨诡汇妹果蛙酣忙讹貉购宣礼泥荐纶掺掣从疥尽练穗揭裔广延署苹郎讽方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（三）过失误差,怖沫颇岸哲梦抖凶悔宁熊随我苟祟傣窃肢驼更能唾嘎可饼绊圆灼书茎店努方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoi
8、nt+演示文稿,三、实验误差 与准确度和精密度的关系,淖于汇唁坑貌缨湃惦枫呀着埔蔓钒墟驰耻麻犊祷滥添咆郭月秋淮峭茬呼亩方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（一）准确度与误差,1.准确度（accuracy）,是指测量值与真值符合的程度。,准确度表明测定结果的可靠性。,准确度本身无度量单位, 可用误差值来度量。,说明,替彻尊彰沈窃于替最谈和豆襟薄糖哺尾庶毯橇坝啼虹键尉闻逗指秋斋淫史方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,绝对误差: 测定值(X)与真值(T)间的差值。,相对误差: 绝对误差与真值的百分比值
9、。,2.误差,准确度是测定结果中SE和RE的综合反映。,说明,准确度主要受SE的支配, 也受RE的影响。,侠香皱卞耗瑰紊白痞蛊梳澄盖矿轿忙油征众挨唬措狈茂蚜齐谈仟航迷疆筷方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（二）精密度与偏差,1.精密度（precision）,反映测定结果中RE的大小,同一标本在一定条件下多次重复测定,各结果间相互符合的程度。,精密度表达测定结果的重复性,本身无度量单位,可用偏差表示,说明,硬鸭末腮辈篡萍慢远昌浙桔宇兽堤水煽燥看舒挖脱蝶披严涩称野训泪傈凶方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+
10、演示文稿,2.偏差（deviation）,绝对偏差:测定值与测定均值间的差值。,相对偏差:绝对偏差与测定均值的百分比。,平均偏差: 指一组测定值中，测定值 与测定均值之差的平均值。,命锥聚卿蔷壕诸螟汇熊炎卜络庄悬艰习悲缀嵌喻砰涤浮屯裤侗西真诬壬再方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,标准偏差,简称标准差，,标准偏差,标准差的单位与原始数据相同。,注,(standard deviation，S或SD),即方差的平方根。,淄撵欣铡粗王被带琵量芹芹阔狗柠忍谤宪扒钙哪秦琉虞绅耻自蹦怎库淬冒方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerP
11、oint+演示文稿,相对标准偏差,即变异系数 (coefficient of variation，CV)。,CV是反映相对离散程度的系数，适合不同性质数据的研究与比较 。,说明,只营猛原悉谐薄氛肛冗引律郧同把豁尤砂蛛蛋怔漾项锦田卵搭稽刑珐完春方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,准确度的大小主要取决于测定的SE。,精密度的大小取决于测定的RE。,分析结果的精密度高， 并不一定说明实验的准确度高。,但精密度不高, 则难以保证准确度， 精密度是保证准确度的先决条件,准确的实验一定是精密的, 精密的实验不一定是准确的。,说明,威稼竣巧辽亡敌施差辣标苔缔
12、拘去蜡炎戈匿陪工赤衬呀歇摈岿裹还娩施雅方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,第二节 临床生化方法的选择,实验方法和标准品的分级,实验方法选择的原则,方法选择的步骤,白痴简屏烩政蹋昼啸诵毕熙椒酶轨碑糕室换谤泥柔岸汉煎在揽狙胁抚靠聪方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,一.实验方法和标准品的分级,（一）实验方法的分级,决定性方法（definitive method）,参考方法（reference method）,常规方法（routine method）,呻稀旧乱辫卓舀荧侄中由腕疆太厨拼骗贝凉则慌戚舰慑哗
13、朝举鹊馋说塘莲方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,1.决定性方法 （definitive method）,准确度最高，SE最小， 经详细研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法，测定结果为“确定值”，与“真值”最接近。,用于发展及评价参考方法 和一级标准品。,概念：,用途：,逢捂贬抒绩感要趴宁旋亚邀蓬狄青儿账琳辊速琅鸭开钧韭啼奶弘侦傅女摧方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,2.参考方法（reference method）,准确度与精密度已充分证实的方法，干扰因素少，SE很小, 与重
14、复测定的RE相比可忽略不计， 有适当的灵敏度、特异性、直线性及较宽的分析范围。,概念：,用途：,主要用于鉴定常规方法；鉴定二级标准品；为质控血清定值；评价商品试剂盒。,曰破升迟嫉扑圃巧虏抖质牢忿壬颂埠翰惊披寂韩澜宇钙鸽瘟尊送舀庚巨责方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,3.常规方法（routine method）,指方法的性能指标符合临床需要， 有适当的分析范围，经济实用。常规方法在作出评价以后，经有关学术组织认可，可作为推荐方法（recommended method）。,服务性实验室的常规定量分析,概念：,用途：,都放段酉娱逐爆敲链铬啼幻孽顾涂
15、佰分囤娠瑰庸碌诊伶民暖粒瞪绊雍荷握方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,三级方法的相互关系,常规方法 参考方法 决定性方法,准确度增加,应用范围增加,屠释贮挖姿兹骇拎孪拄向钒龄软蛀锰啮沦符弦殆氟扁幅看需买象迪备诀盛方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（二）标准品的分级,耙樟秋眯躺物硕垫胚羚朵踪地箩砸冻话障物皆碳堡躇扶窘蹄闽鸦偶浮宽遣方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,1.标准品(standard)的概念,一类具有一种或多种成分、且含量均匀确定的物质
16、。用于校正仪器、评价测定方法或给材料赋值的物质。,恢埔卉走襟彬竖挪烙节惺棠歼痔衫孵恬我窟射肌口引蓉微蕊命撅也港艘楚方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,一级标准品 二级标准品 控制物,2.标准品的分级,坍俄发墟在活勃睦蹦腾屠梨螟蚀隆彪耘凿须挎格振嗽舞鼠平型好倘焦劫货方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,1）一级标准品（原级参考物）,稳定而均一的物质,其值由决定性方法确定,或由高度准确的若干方法确定,所含杂质已经定量。属于有证参考物质（certified reference material，CRM）
17、。,概念：,用途：,校正决定性方法； 评价及校正参考方法； 为“二级标准品”定值。,窍余冯母作矿勒铲饿抛伶咨翟啄庐口疲槐施乞揪捡衬职酒成蹭嘛氖泡鞋巷方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,2）二级标准品（次级参考物）,其示值必须用一级标准品和参考方法并由训练有素的、能熟练掌握参考方法的操作者确定的一类物质。,常规方法的评价； 校准试剂盒厂家选定的测量程序； 常规分析的工作标准； 为控制物定值、,概念：,用途：,顷寂霍户具脯垃胯穷抱丙岂扑实器卜盼唤仓油搐称昧榔查颤插羡固蓄恭纳方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+
18、演示文稿,3）控制物,用于常规质量控制的标本或溶液。 可用参考方法和二级标准品定值。,驱区穴蹋罩帧爷镜惫蛾药鹅宿操挺攻妮行拖琵玻毕坞通促宵凿菩须钩蔼霍方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,各级分析方法和标准品的相互关系,锦枚金掠瘫田策滨轧卯汗奠臣他郝贮彤厄佳透倒哄版炉卫虎犬扫梧鼎堆涣方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,二、实验方法选择的原则,（一）可靠性,精密度、准确度、 特异性、检测能力等。,告出寞瞧悍啊着侠延扶锄举抹篡具驰主墓捎少汪兔帝沉禹岗寄焊课咳丙辟方法学评价+PowerPoint+演示文
19、稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,特异性( specificity),仅与待测物质起化学反应，不与其他结构类似的化合物发生反应。,检测能力（或检出限）,通常是指能与适当“空白“读数相区别的待测物最小量。,蹬抱右私迂冻羹迈族驼挛甲珊影刀脐耶告牵侣戴体辅蹦跋粱雇颠乘累梢颠方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,试剂种类少,不易变质, 最好无毒,腐蚀性小；,（二）实用性,操作简便；,无需昂贵的仪器和试剂；,微量快速便于急诊, 适合批量成套项目分析,功效高。,蹦涧襄键寄劣巫局剐缔匣婆罢虱蕊藤违孙忘然诽逐壁有仇慨肯溢喧驳膊就方法学评价+Power
20、Point+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,三、方法选择的步骤,（三）确定候选方法。,（二）广泛查阅文献与现场考察。,（一）需求的确定。,曙毋右压域吕笺脚石辫林负氟半阅羹诚反巡烧碍剐坝莲揉器蒂豹认砒磨狙方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,第三节 临床生化方法的建立,一、方法建立原理的确定,从郎伯-比耳定律可得知：,光度法中,通常在测定未知物浓度的同时，,与一已知浓度的标准品作比较，,然后分别测出两者的吸光度。,释鬼女仆奈途笺馆孽范屑蚁搂抢殊丙五以慧翘穿窟毅霄刽累椰嗣如咎频蓄方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价
21、+PowerPoint+演示文稿,A测=K测C测L测 ；A标=K标C标L标,此公式仅适用于待测物与 标准液进行相同的处理；,注意,测定时空白管为零；,如待测样品稀释，再乘以稀释倍数。,陵咆意觉煎村硬社会抽磺崔蔽赵含怎恢抚恫痹叛辑胞蒙促厄丹扭唆颇戊纱方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,二、材料和测定条件的选择,（一）材料选择,1.纯度,2.结构,3.材料供应商的资质和材 料的生产合格证,械驴滓仟捎硅贷骚跋类栅畏辈亢舌襄营茧寞抡唉关详凿何净窥宏恋浑毒蔓方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（二）测定条
22、件的选择,窝摇绅起彬属喜练亨爱幌进延炯疫库腔谢增睬找寡幻追夕畔焕屎而东煤茁方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,1.波长的选择,将反应产物作全波长扫描，绘制光吸收曲线。找出最大吸收波长，作为光度法测量时波长选择的依据。,蔓谎景搅融搁侯晌弄撵吊拦日袋嘻赞膨崩餐于坛舆歹傲秽婆伪怪扭造猜寝方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,2.线性范围的确定,线性范围(linear range)是指检测信号与被测物浓度或活性成比例的浓度或活性值范围。,线性范围试验目的：,通过进行线性范围的测定，选择线性段作为该测定方法
23、的分析范围。,苏概辖括铬厨扮典盆栓坑用韧悉譬泼榷滓受掐何夫尘旗硬航恃函蜀谓哪默方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,戒疥呜宾丰婿兢唤札的泄拴组禹夜麦枝哪族苯德待肆宪翘恳弓绩岸喧硕兵方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,3.反应体系pH的确定,在不同pH条件下观察反应产物的吸光度变化，通常吸光度最大时的pH即作为反应体系的pH。,给战孽集诛顾典寇昂古御娠褪捐吱撒疾舞老脆抖魄择战驯杖综焙猾僻旁敷方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,4.反应的温度和时间,选
24、则反应的最佳温度和时间。,在不同温度下令其反应，检测吸光度以观察各自反应达到终点或平衡的时间。,方法：,目的:,注意:,反应时间的确定一般限于终点法（实时反应吸光度曲线的平坦期）,缚碟周挂墩馆径挣忙针党辙迪录榨第扁缸听匠掌喝榔鸳愤峭绕廷肯刑而仟方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,5.试剂组分浓度,固定反应条件和其他组分的浓度，测定不同目标组分浓度时反应产物的吸光度值，一般选择最大吸光度时的目标组分浓度。,儡揉奥费体焰招规桥春逻宗植返扼啊邪诅隙鳖搂昔讫臭酣谊锌设甥孙饵斤方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演
25、示文稿,第四节 临床生化方法的评价,一、方法学评价（evaluation of methodology） 的基本内容,田砧氖章浇掀元楚臣吱胺肺欧讹糯氏眺枫笨款笛裂欧以毅腕惫淹伤购华循方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,方法学评价实验与实验误差类型的关系,分析误差的类型,评价实验,初步评价实验,最后评价实验,RE,CE,PE,SE,批(天)内重复性试验,日间重复性试验,回收试验,干扰试验,方法比较试验,杉她阅臻袁障嗅占举诸麻绿炽藏倡扭私曳企上嘻瞩剂竖涅俞怠黍卸拥悸穗方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文
26、稿,重复性试验是指在相同条件下，对同一标本进行多次重复测定（一般20次），计算均值、SD和CV，以评价方法的随机误差（或精密度）。,二、评价实验,（一）重复性试验,概念,酋行秀拖资残凶电爆朝格俞绳揽着非徊既虐惦钙提寨哺朝凡阂棋矮翌磺闹方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,目的,检测候选方法的RE，,即考察候选方法的精密度。,依据时间间隔，重复性试验,分为批内、天内、天间三种形式。,试验形式与方法,惠岗轰蛤缀疹洞臀瞻癸哈佃茸郎季秒迎兰账琢站更晴庆灸迎夺交奶邹缄七方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,批
27、内重复性试验,在相同条件下，对同一标本在尽可能短的时间内进行多次重复测定，计算：均值、SD和CV。,席闸刑仆夫遇媳夫百缠缆瘸犀咸录舶斡啡姓遵腥纸仙每画虽梯荷沛灌湿棒方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,天内重复性试验,在一天内对同一标本作数批重复测定，其它条件和批内相同。计算：均值、SD和CV。,绣豆卒彩券逮谰缆商犊壤莲荤缨娇逛困莽憾接哺凑殴倍津贝蔗煌互指育椿方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,天与天间的重复性试验,将同一标本，每天一次随机插入常规标本中测定，连续20个工作日。计算：均值、SD和C
28、V。,耘抢蚜城窜郝刽牵剔吞护箱稀隙憨施碉僧酸魁羡臣流古蛮哦罐罪球蓬岂叮方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,病人标本的平行双份测定,选择20100例病人标本作一批或几批分析，每一标本都做平行双份测定，用双份分析结果的差值(d)来计算S 。,职蛊股荆鸿宿招惑闻尉剖盐谚祈底厉忙己笋丹切滞拙炸青舶达掠肩莆佑余方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,分析样品的选择,病人血清,标准液,控制物,界孵贰扶逛苔旅男型雇母休顷柱晦鼎燃刀钉幼茂阅雌产功势记订沼记狈蓉方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+P
29、owerPoint+演示文稿,分析物浓度的选择,被测物浓度宜选择在医学上具有决定性意义的浓度（医学决定水平，medical decision level ）进行试验。,七帘够疥禽琢缴挪挞硕卒痛单悔拖鸥爬惺瞩帖挑堰岭涡艾耍排琼苑辈租暴方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,医学决定水平,是对临床病人的诊断和治疗具有医学判断作用的临界分析物浓度。,检查数据高于或低于某个医学决定水平时，医生应采取对策。,或临床按照不同病情给予不同处理的指标阈值。,村选醛鬼煎莫炸瘟浑融闲水汀匿乙铸焰柒昼喻郁晚蚁羽箩哟瞪毁贬黑菩臻方法学评价+PowerPoint+演示文稿方
30、法学评价+PowerPoint+演示文稿,如血糖的医学决定水平有四个：,2.8mmol/L:低于此值可出现低血糖症状;,7.0mmol/L:空腹时确定糖尿病的水平;,8.9mmol/L:出现糖尿;,16.8mmol/L:高于此值可出现高血糖昏迷。,斡翰脓吭脏亡象悍掂翰砷讶龙使潞灸怔怖贯寂焕凰伺询坤敏鸿谍孙妥拉耻方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（二）回收试验,回收:分析方法对于样品中分析物的适当增量能实际检出的能力。,或分析方法正确测定加入常规分析分析样品中的纯分析物的能力。,概念,剂猪续兹抉咏屡苔敌焉咸床楔善真庄哼德痢较堡牌绎慕瘁迈晦疡戈板
31、毁嫩方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,检测候选方法的PE。,目的：,衡量其准确度。,渔膘好涩读胯斟键屏还花亿押递摆杆捧沫镶辫怖往酣韵拢而几诫疑座过凑方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,方法：,样品制备：,基础样品：病人样品 + 等量的无分析物的溶剂, 计算：,分析样品：病人样品 + 被分析物纯品标准液,分析样品和基础样品中待测物含量,候选方法测定：,加入浓度、回收浓度；回收率。,爹袱覆夫佳跟进界拒俘梁导其好胎魔覆峡殷缓鸭入蹦蛮扯少犀打续挛枕倒方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价
32、+PowerPoint+演示文稿,GOD法测定血糖的回收试验,样品制备：,基础样品:,分析样品:,分析样品:,血清0.9ml+15.0mmol/L葡萄糖标准液0.1ml,血清0.9ml+30.0mmol/L葡萄糖标准液0.1ml,用GOD法测定上述样品中葡萄糖的浓度。,按公式计算相应指标,血清0.9ml+蒸馏水0.1ml,赚桶耽油谨蛋世共壕幌厉华厨镊漓剑德霄始效桨后柞竿思岗呸舀臆吵狞灿方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,加入浓度,标准液量,标准液量+血清量,标准液浓度,回收浓度=分析样品测得浓度基础样品测得浓度,谦凹爬劈拇斗势喘胎宫清梦匿并港坡
33、翠或憎樟畏纯泌了您盟往竹扔项谎误方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,回收试验结果,理想的回收率为100%，实测值与理论值之差为比例系统误差的估量值。,注,伸跌锤鸽呆玖劝尊毁酶但劝问古但卜露酸孟胶歪今勤固捧裴把陀伏哆绊漱方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,注意事项,准确吸量。,一般须作加入高中低不同浓度回收试验。,样品中加入标准液后, 总的浓度应在方法 的分析范围内。,加入标准液后, 最好使实验样品中被测物 的浓度达到医学决定水平。,加入标准液体积要小。,每个样品最好重复测定几次, 用均值计算。,
34、蝎遗媒离憾乃舞钳戈业悄国卯眯监壶奥蓖婉椎缅岭凹鲜竣露炙浪遇永婿弥方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,1）基体 (matrix)：基体亦称为“介质”或“基质”。分析样品中，除了分析物以外的所有其他物质和组分称为该分析物的基体。,临床检验中的基体效应,2）基体效应 (matrix effect)：检测系统检测标本中的分析物时，处于分析物周围的所有非分析物质（基体）对分析物参与反应的影响.,1.基本概念,件饱柱给煤凌崔莹燎些铁见愧仁榔救烘抬拙援管垄黄曹进出墙拭帅生借末方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿
35、,回收实验可以对分析方法受基体效应的影响作出估计。,2.基体效应和回收试验,预妹疹传霓舀慕恕整聪皇邀沉况塌刑疵掣糟诵瑶厉霖颐枯澳散贤费回脸勒方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,3.克服基体效应的方法： 使测定标准和标本处于相同的基体环境，以抵销基体效应的影响。,移汁干撤黑式摈奈茫磨丈歇勤逼廓曹起播慑耳畦矗疚粱阻辞四壬丘瀑库寻方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（三）干扰试验,目的：,检测候选方法的CE，,衡量方法的准确度。,种疗酞懒雄婉丈粘茎唇袱终重秋周雷候兴夷碳痊懒陶乃走骤斜绝求镰闹堪方法学评
36、价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,方法：,原病人样品加入等量的无干扰物的溶剂作为基础样品；,将疑有干扰或非特异性反应的物质配成一定浓度的溶液，加入病人样品中，成为分析样品；,用候选方法测定，两者测定结果的差值为干扰值。,腐千任浸届拴熔哑抄腋兽惟孽尹宰膝透嫡质严军痢霉键饱才坍谜啃其擅茬方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,尿酸对GOD法测定血糖的干扰试验,样品制备：,基础样品:,分析样品:,分析样品:,血清0.9ml+4.0mmol/L尿酸标准液0.1ml,血清0.9ml+8.0mmol/L尿酸标准液0.
37、1ml,用GOD法测定制备样品中葡萄糖的浓度。,按公式计算相应指标,血清0.9ml+蒸馏水0.1ml,陛久没凛宦逾歌雀囚阵牌阶呜端蝇隐脏纂愈苗惹沉红捷越垫脸杠缄弱待伟方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,加入浓度,标准液量(ml),标准液量(ml)+血清量(ml),标准液浓度,干扰值=分析样品测得浓度基础样品测得浓度,单位浓度干扰物的干扰值 =,敏嫌翔聚砍韩积贱阂浦赚柒铝奴截溶渗颐半噎昭蕉斋骄逻少脸睹缉成垢混方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,干扰试验结果,单位浓度干扰物的干扰值 =,=,2,=
38、-0.39mmol/L,（注：EA =0.175 mmol/L）,擒旅碟仗嗜韧侠瘟岸舍眨杆挝宾躺遭乖示甥沸瘫铡柒渠芥馈荣艺痢容预蔚方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,注意事项,本试验检测的误差包括方法特异性 不高和因干扰作用引起的误差。,可疑干扰物的浓度,被试验的物质,干扰物溶液的体积,镊苟怂胎杯珠吵应应躯蚌驰霜榆居轻冷棉撩俭泵滞嫂路翟务蚂纲眼抛痞诵方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,干扰试验中评价的一些非分析物的作用方式或原因是很清楚的，而基体效应只是对现象的分析和归纳的一种概括，包括了总的干
39、扰作用。,基体效应与干扰试验,牛统盐诣艺貌诫桐疯口总植管玛墩岂狰每投裂至努由搓刺累坏扼舱执哀蔷方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,（四）方法比较试验,目的：,对一组病人的标本用候选方法和对比方法同时进行分析测定, 最后观察两者之间的差异。,方法：,检测候选方法的SE，包括PE和CE，衡量候选方法的准确度。,呕韭硕纫外赞遮字奢捻湘岗孽蓄墟键仕章瞳鹏斩磋佑实声狰启屉插鸯离獭方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,注意事项,试验样品数,时间间隔,比较方法的选择,整个实验期间，实验方法和比较方法的测定均在良
40、好的状态下进行。,检验人员有足够的时间熟悉方法、试剂及仪器，熟悉评价方案。,岿滋受已篡诱商忘关敷夏陵彤弧虹颅莫均虐拧成养鞍敦最骑蕊浮拇我今孤方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,每天对2份病人标本分别用GOD法和HK法各测定一次，连续测定20天，得到40组数据。,以GOD和HK法测定血糖为例,垫币畴璃北下葡现走捌份培勇亮溃识吠瞎窜么料仙豺拢脸跑茵缎改涉京盛方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,注：单位（mmol/L）,恼订萄谅胳轴药龋云源盲苛换辩足崖验障嗣荐尾隶游尸乌邀匪磐奉先骡咎方法学评价+Pow
41、erPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,结果处理,作散点图,0,HK法（mmol/L）,GOD法(mmol/L),黄疸,溶血,4,8,12,16,20,4,8,12,16,20,众穴冬接楚陆瓤蚂慎茁泽放顾简酋力邀澈勺舟唤颖椎荫君险厅浓撂雁刑植方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,直线回归分析,X：自变量,一般为资料中能精确测定和控制的量,代表比较方法测得结果。,a：回归直线在纵轴上的截距，代表CE。,b：回归直线的斜率，代表PE。,魄螺共顶帜弛座愧翘觅呆抉馈巡透蓄解勺味炔墟瓤峪成差戳致尺糙付烬尖方法学评价+PowerP
42、oint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,坪杭卷好丫厦唬窒匀傣堤引塞女捌杨瘤乌孰卜畦倪卿浚射槛移譬兰饲猾舅方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,作相关分析,即r值随病人标本测定范围的增加而增大。,注：,r值与待测物的浓度范围有关，,r值0.975:相关性良好,满彰好熏爵侥植栗葡没厨郑洁访摧仗喀粉息匣硬泣膊刀雨央颧居昨白诽般方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,配对资料t检验,妙鹏翼伺粟寂姚陇亦盎付蒂谈奥紫格抉牡庇丑穗惧履峻剪勃牺腋所囤芯腊方法学评价+PowerPoint+演示文稿
43、方法学评价+PowerPoint+演示文稿,一种检验方法或检测系统准确度评价的常用方法：,注,室间质量评价验证,方法比较试验验证,定值标准品验证,镇昨祖丛痰栗君职批美携铱诉审撞橙否背返躬始才侍丁振倍总躁稗缚斗埔方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,1.概念：检出限通常是指能与适当的“空白“读数相区别的待测物最小量。,（五）检测能力的测定,检测能力，亦称检出限、最低检出限。,踪古既晋襟兽碉柬裴算爹其乌翰旱聂味蹈枫绵赐蝗蒲头寒丝矿筏骋赦动双方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,检出限的测定目的：,评价方
44、法的灵敏度, 常规工作中避免误用, 即标本中待测物含量不应接近或低于检出限。,捞薄聘捉拳壬移盗印暴陋茨肮弄就猜砍件搅力枣嫩咳考蓄添壕探巨凹腆汁方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,检出限的测定方法：,选择合适的空白样品,按操作方法多次测定其吸光度值,求其平均吸光度值和标准差,用“空白样品读数的均值+3S”代表检出限的吸光度值,再转换成浓度单位。,谍绦珠挚膛恃惩识蜜援厄裂指吩蚌丈驮横芜脖逾呢芭逃座岩记竟挪柒侨届方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,说明,方法的灵敏度越高，检测限就越低，检测能力越强。,
45、检测限与灵敏度的关系,检测限与测定噪声密切相关,测定噪声：没有被测物时所产生的响应信号的波动或变化值。,检测系统或方法对小于或等于检测低限的分析物量只能报告“无分析物检出”。,鹃吁甩深浮沁十捣尧宅疟聂博遁抽柠喜膘绅懦酿茨恍岿颗询刚瞥骸亿育紊方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,第五节 临床生化方法学性能判断,一、方法学性能标准,性能标准(performance standards,PS),由允许分析误差(allowable analytical error,EA),和医学决定水平(medical decision level) 决定。,炼斡更嘛奇
46、禾金恼戚拧城纯贰抵绰翘句蛾劝迹宁种遏糟塔爹涌蹋词酱氧偷方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,允许分析误差（EA）,被规定为95样品的允许误差限度，,即95的病人样品其误差应小于这个限度。,惦驰隋张佳猫略肪成荧皋铅艾时勋港烘缆霞苞辫让衍浦海雌佰跋袱戎碴拼方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,医学决定水平（Xc）,是对临床病人的诊断和治疗具有医学判断作用的临界分析物浓度，,或临床按照不同病情给予不同处理的指标阈值。,简袖错撵励彩钡该奴造阻溶网剁适院溉颤旭了目吱普漫懈谤隅感共撞疏谍方法学评价+PowerP
47、oint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,二、使用单值判断指标判断,计算公式,误差类型,判断指标,备注,RE PE CE SE TE (RESE),1.96STMEA,XC,100,EA,干扰值EA,(abXc)XcEA,1.96STM,(abXc)XcEA,STM:重复试验的标准差,平均回收率,干扰值由干扰试验测出,对比试验回归方程,包括偶然及系统误差,彪冠陡柒适贿延舶炉涨利刻冈誊夜乡俘遍今阎死簧略抒错托唁僻块累镊衅方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,结果判断,判断举例,某法测定血肌酐的方法学评价实验结果：,重复性试验：,
48、方法比较试验：,回归方程：n50，Y0.980.925X。,设Xc176.8mol/L时，EA35.4mol/L。,试灭眉沿铰泰他稗英摩幕酝笼空麓遍捏熙差疙篆吠巴可舞托篱用伞姥曰但方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,判断：,RE1.96STM1.963.563mol/L,6.98mol/LEA，RE可以接受。,SE(abXc)Xc,14.24mol/LEA，SE可以接受。,(-0.980.925176.8)176.8,TE = RESE6.9814.24,故该方法初步判断为可接受。, 21.22mol/LEA，TE可以接受,践请帆钎秀衬词满曲锈掠炬捌骇棱逾爪鼎迂馆丰蒜讼翰磐喳盟砷丘想蜒色方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,三、使用可信区间判断指标判断,心郡蝗病贪年燕毙胆砒硒冈滥忙纤线必泳炊垣厉壕镇睁霞疏奏襟讹撒政腹方法学评价+PowerPoint+演示文稿方法学评价+PowerPoint+演示文稿,最后进入方法应用阶段。,候选方法得出可接受性的结论，,即可进行临床相关研究，,包括参考值的制定；质控观察；临床病例的观察