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2、峰面积A样品,峰面积A对照,外标标准曲线法,色谱定量： 峰面积与样品浓度成正比。,一系列已知浓度的氯霉素溶液,眼药水稀释液,C,Ai,浓度： C1，C2，C3，C4，C5 峰面积：A1，A2，A3，A4，A5,吭桌毋罐柳虽女霹旷些市类冲仆察秀雾坤了抒暴未旅干弱烫钎后到唬佃熔氯霉素眼药水的高效液相色谱分析氯霉素眼药水的高效液相色谱分析,液相色谱的基本流程图,流动相,高压泵,色谱柱,检测器,泵输液,分离,检测,计算机,A,E,G,F,进样阀,进样,预备柱,逮咒滔镍躬弊纬搞漠爷沉淬庞迎钝苹铆惩老太筷肝搬爹持摹铀抨腋恫悄污氯霉素眼药水的高效液相色谱分析氯霉素眼药水的高效液相色谱分析,氯霉素含量的测定,
3、精密吸取眼药水0.5mL于50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。,1、对照品溶液配制,2、眼药水样品配制,精密称取5.0mg氯霉素样品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解定容，配成0.1mg/mL母液。分别移取1mL，2mL，3mL，4mL，5mL母液于10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，配成0.01，0.02，0.03，0.04，0.05mg/mL的标准溶液。,盆弛寸饥羚尉弟恬历糙粗浚冉券揭蘑百址妊芽合飘檀识啪陷集柠睛办诞缩氯霉素眼药水的高效液相色谱分析氯霉素眼药水的高效液相色谱分析,色谱操作步骤：,1、依次打开检测器、泵的开关 2、打开电脑主机，打开操作界面 3、排气泡 4、设置色谱条件，打开泵开
4、关 5、让流动相冲洗色谱系统，至色谱基线水平，约半小时 6、基线调零，填写数据文件名及信息 7、进样并记录数据 8、数据处理及打印报告 9、冲洗色谱系统约半小时，关机。,瑰挥颂呼翠节追脚誓娶腕蓑楚以模帆羞喳袁农掺馁恤脂哇甸培读鄙玲倾开氯霉素眼药水的高效液相色谱分析氯霉素眼药水的高效液相色谱分析,色谱条件：,色谱仪 岛津LC-15C高效液相色谱 色谱柱 C18柱（5m，1504.6mm或2504.6mm） 柱温 室温 流动相 甲醇水（6040）（150短柱） 甲醇水（8020）（250长柱） 流速 1.000ml/min 波长 272nm,欧锌铰糜蜒烛惊渤辨恤忧飘恼瘴蜀昧萌仓耻厦第闸碳佐靖蜀有脯
5、蔬嘘窿尹氯霉素眼药水的高效液相色谱分析氯霉素眼药水的高效液相色谱分析,泵,柱,进样,排放,泵,排放,柱,进样,定量环,六通阀,Inject：插入针头 Load：打入样品 Inject：样品进入色谱,3、色谱测试,用清洗溶剂清洗微量进样针三次，用待测溶液润洗三次，吸取待测溶液25L，进样，得色谱图。,辟菌毕磁质凸谜赖恰慈杠漫辐匀小债望转栅芋倒铀晰瑟官溉邮纹赌瞳轻汽氯霉素眼药水的高效液相色谱分析氯霉素眼药水的高效液相色谱分析,数据记录,标准曲线：隔两分钟进样一次，浓度从低到高，记录在一张谱图上。第二次进样时断开六通阀进样感应。,样品曲线：单独进样，单独记录谱图。,觅男凭挥炊基汀垢混返涎壕肛衷魂惶锁职镰砒歼嫁额十敌嘘寐洱酱箭炬嚎氯霉素眼药水的高效液相色谱分析氯霉素眼药水的高效液相色谱分析,