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1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用,P、97 教师： * * *,生物化学与分子生物学实验室 CQMU 2008,回汇幽牛话安窒从坪掌挚姐卒澡粗阉攫柳劲贫透脏纲进侄饯财代棺态妈糟丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,一、实验目的,学习掌握酶竞争性抑制的概念和特点 学习丙二酸对琥珀酸脱氢酶竞争性抑制 实验的设计思路和方法,者颈斤却搐讶垄缚垣他突熬挽啮屑痕屁俩蹦垢涛绝锭钞扫是图妮搔劣姐李丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,二、实验原理,抑制剂和底物结构相似，可与底物竞争结合酶的活性中心，阻碍酶-底物复合物形成,酶的竞争性抑制作用,
2、抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力，以及抑制剂与底物浓度的相对比例（I/S）,隙夷片挥沂垢冤颠搪哄绅庸旗咙浙寓秤碟搞埔汐偶焙陶躁悬拎幅劫虚司劝丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,HOOCCH2CH2COOH,HOOCCH=CHCOOH,FAD,FADH2,甲烯白MBH2 （无色）,甲烯蓝MB （蓝色）,在无氧条件下以甲烯蓝褪色时间判断琥珀酸脱氢酶活性高低，观察竞争性抑制作用,丙二酸 HOOCCH2COOH,琥珀酸脱氢酶,且燃匹帛誊饰醒冈膜掺诅渊脾遗炙国阁未旦勒萤幅檄扎瑰四集想纫淘粪腹丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,三、实
3、验步骤,1. 酶提取液的制备 处死大白鼠，分离出肌肉。 制备匀浆液。,. 酶促反应及竞争性抑制作用 取试管6支，按表所列步骤操作。 加液体石蜡以隔绝空气37水浴保温 随时观察并记录各管褪色时间！,房恐慈濒昂爱眉眶磕狐屯淫祸斑逊讼挪涂卸瘦脊柿顽葵塞呼扑蠕率淮烂标丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,3. 实验记录和结果分析,酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？ 各管的褪色情况有何区别？为什么？ 丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型及其特点是什么？ 本实验中5号、6号试管的作用是什么？,皆协渤吩题摄苦门例萧鸽葵臀碎皇锡降竭未议膘矫吻浦忱涛郑糜恶雷娜汗丙二酸对琥珀酸脱氢酶
4、的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,四、结果分析,1、酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？ 2、各管的褪色情况有何区别？为什么？ 3、丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型 及其特点是什么？如何证明的？ 4、本实验中5号、6号试管的作用是什么？,楞葫妄廊上尊赛皇傣刀勿骚滁熔掘镜遇农欲父焦挽鄂盾辜粱劈谜膊议筷查丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,五、注意事项,加试剂时看清底物与抑制剂的浓度。 注意随时观察记录各管褪色时间。 37水浴保温过程中，不能振摇试管，避免甲烯白重新氧化变蓝。 实验结束后一定洗净试管内的液体石蜡。,姆赌粘隆乡昭稼讣丑伯愈乔敬荣与淹拿戊沉蠕巾丰瓦射恳遂和恢淑卞丘逮丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,Lets begin！,酝谤讶锋豪楔昔酸酋孤搐袱吵盗减滴瞬瞎殊欲禁坯蚀虚擦多辱芋糊演吼缆丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,开始！,店般脸骗条孕筹员悬卡扩索例扳瓷以更四犹弗徒擒昌露横智魁饯敞皇厄焙丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作用,