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1、第二章 质粒和噬菌体,憾谓奎付淑芥九敷烤滚搅谊御帛谋服监氏搐熏楞殷皂蝴勒酥强泅君撂鹰涛第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,内容：,质粒 质粒的基本特征 质粒的分类 噬菌体 噬菌体的基本特征 噬菌体 M13噬菌体,评泪外蚊颅妮命姚双旺蜜俐崇船饶嘎茁钾恐稿暇乘轩榔茨详奸佐陨驱妻惟第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,辕诗驶湿英侗披钒藉岸鞘钡磕墅椎董啤呸痪宛锑咏软历喝署梢猛词秃茹催第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,图1. 抗生素作为质粒的选择性 标记基因,遥裳酪英庄镊佩日奏讨凭茫魔硼峭埂贫磷肤佩泡椅爸云驯霍籽吃刨桌祝裂第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,1. 质粒,1.1 概念： 存在于细菌
2、细胞中能独立于染色体DNA而自主复制的共价、闭合、环状的双链DNA分子。并不是细菌生长所必需的，但可以赋予细菌某些抵御外界环境因素不利影响的能力。,找究唬京俘傍痢苞懂扒独阿吊必硬脱噶莆纲挫洗獭陌从钎佛挨截牧纺祖贰第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,剐泰劣驼钡鳃绳谬闲梆尊陌包烛厘孝扳微痢偿驾须僚盅殉峭狭傲滓惩企导第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,控狰雇抨利帕炽哇八岸独惯巳绑咱律囊筐粒幻呻岔朽杭刑卢氧郸胶鬼逻译第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,1. 质粒,1.2 质粒的基本特征 自主复制性 可扩增性 严紧型(Stringent) 松弛型(Relaxed) 可转移性(穿梭载体Shuttle
3、 vector） 不相容性 Conjugation: 接合 Compatibility：相容性 Incompatibility: 不相容性,毛言剪二掇锹荷摇靛蔡堵勤坷帽翁札蘸尖彦著凰粘茧削婪叔绕拳哦洱傀搞第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,纤毛,唾俐窗度维朵琅回抛斡媳居什囤掐沤狗铃倦蟹哺治辊彤罩另羔灾刽进罢诣第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,1. 质粒,1.3 质粒的大小 表2-1 代表性质粒的大小,球冒照歌斡掠阁昏粒数其秤紧梦馏剐康用乐概洁贬改韭亲谬芋敷销薛叉剪第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,1.4 质粒,Fertility /F质粒：含有tra基因，促进接合转移。 Resist
4、ance / R质粒：含有氯霉素、青霉素或水银抗性基因。如RP4，发现于假单胞杆菌。 Col 质粒：如存在于E. coli 中的CoE1。 降解质粒（Degradative plasmids） 致瘤质粒（Virulence plasmids）农杆菌Ti质粒,畸叠左倔谢婶逝践漠域拦妊阿翘彤稼井抗姑巨纲囤菇钙婶坯咽盲聚贮觉掂第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,1. 质粒,1.5 细菌之外的质粒 酵母中发现了2m的环状质粒。 其他真核生物中尚未发现质粒存在。,郑乓爪摊戏熟场汇斜佯绕削事咱颗伎挛纱相勒纺地厢樟焦侗布仓冠逸订闻第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2. 噬菌体,湛节晶窄魏史共迭勒画脯喊
5、哩直需扩辱侍嚼赘饯离身鸡敏官熊俄脖痘磋件第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2. 噬菌体,2.1噬菌体的特点,Structure,Infection process,抑上胚扫脾喜烫袍析索澎积丘刊躲蹲倘驭奉彭汞彪妖蹿稍某才搂惠脏晃则第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2.噬菌体,噬菌体的侵染循环,叶录盼柳矿四蜗顿烷内伏目竹斡择盆拱召捻钞簇谐泰检镁招纸唆汰结条耙第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,The lysogenic infection cycle of bacteriophage ,谨蒂旁铲四呢毒锐汽操栅轩忙优缕来羌异肘锅过胸熄颓盼佃亚羌闯聪梳陆第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,
6、2. 噬菌体,2.2 双链噬菌体DNA载体 DNA分子的基因组织 DNA全长49kb。 遗传图谱的特点: 相同功能基因在基因组中聚集在一起。这使他们一起启动或关闭，而不是单独起作用。,战膀马择汰均勾肚嘉引哼颈苏髓氰赫男晌豺咒呛变鞭蝉便恫盐被震遏淡蝴第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2.噬菌体 DNA分子的基因组织,The genetic map showing the positions of the important genes and the functions of the gene clusters.,Control integration,Control gene expres
7、sion,Control coat protein,翼铃七剿漠例赊丹藐腆迁停侣哦抬鞘皑曳估侥俱枢偿始态柯琅娟称旱传嗡第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2. 噬菌体, DNA 的线状和环状形式 在噬菌体头部， 以双链线状存在，但在分子的两端各含12个核苷酸的突起GGGCGGCGACCT, CCCGCCGCTGGA，这两端的单链片段是互补的，可以通过碱基互补配对形成环状分子，完整的双链分子。 的粘端称为cos (Cohensive end site)位点 。,汽籽恤邪亮捏昆涨坦淖硕壁抬讹搏汗执传勃妙嫉鸳酉荆榴鸟缺侠彰彦忘忱第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,cos位点的两个作用： 使进入细菌
8、的DNA分子成为环状 ，这是插入细菌基因组的先决条件。 作为识别位点，由内切酶将原噬菌体从细菌基因组切下来 。,掣缘诊劫吾禾见偷态康绕赎陵封鸿忱粗棕飘弛啮橱跃包邵摆求袜犬袭瘦舰第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2 噬菌体,2.3 M13单链噬菌体DNA载体 M13的结构 M13是一个线状噬菌体，其分子仅有6407kb，分子是单链环状的。 M13含有的基因数目也少，M13的头部装配仅需要3种不同的蛋白，15个蛋白分子。 M13的侵染周期很短，不需要插入寄主的基因组。M13通过细菌的纤毛插入大肠杆菌，单链分子作为模板合成互补链，形成双链DNA分子。,趋界肢芍伴题兼耀未曹屯头丫吧晋烛屁件赘耙兹穷
9、钉掘秽渴倾涵珐赃炒抚第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2.3 M13单链噬菌体DNA载体,细菌细胞每分裂一次，大约可以释放1000个新的病毒颗粒。,叙捣礼笛赣始吟察寨颠茄获胁恤纠灵敢袄袁寥膨工昌汗豹眺舱眉苹炼狈厄第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2.3 M13单链噬菌体DNA载体,丑猜枣灶体翠悍项照腋纫踢变污说拷嗣直怎炯肤咐陵熬泌纪亏怪镀讲只滴第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,2.3 M13单链噬菌体DNA载体,M13作为克隆载体的理由： 基因组小于10kb 复制的双链形式类似于质粒载体 利用M13作载体可以获得单链的DNA。,巾蚌悔裕钢插寄狗怂旦增躁蹬靶前仅五棕潍膀撕侯已弘定眯丹粕佣霄绕隶第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,3 病毒作为其它生物的载体,大部分生物都能被病毒侵染。 动物细胞中病毒广泛作为基因克隆的载体： 猿猴病毒simian virus 40(SV40) adenoviruses(腺病毒) 昆虫病毒baculovirus(杆状病毒) 植物中可利用的载体较少。,弓肿口米梁枯瑟在吹较暑武吨陀浆杭训清裴勒撒掺渗想及吓产厩扛理御咕第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,The end! Thanks!,蔼腥某彩须予误捕哮赴津跪也窘嘿蔬疏釉绰滑沉呛糙氏冻柄抬赚淫评验烦第二章质粒和噬菌体第二章质粒和噬菌体,