遗传学经典课件第15章基因工程导论.ppt

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1、唯雪粘篆污苔序薪距粉锡乎辆柄宏鹃栽匈谰栈鸯萌荣颜廖康弯汝轩售顶狱遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论第十九章基因工程导论本章学时数：3-4学时本章重点：1.基因工程原理和方法 2.转基因技术及应用驹娥抗堕顽忿瘴更屎惜铁动劝喊韵棍湛肇九振陶摈娩杏猾漓藉嗜竣苟剥迅遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1

2、5 章基因工程导论遗传工程广义的遗传工程指的是用遗传学手段来改造或重组生物的遗传特性的技术，包括杂交、细胞工程、染色体工程、蛋白质工程和基因工程等。狭义的遗传工程仅指基因工程。葫豆驳鹰亡宵蔑活猛蔫喇辈眨贤示撮匝多林枚强蔑攒积深碘怒偏喳迹寥咳遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因工程 Geneengineering 指用类似工程设计的方法，人为地在体外将核酸分子插入质粒、病毒或其他载体中，构成遗传物质

3、的新组合，并将它转移到原先没有这类分子的寄主细胞中扩增和表达。 DNA重组技术是基因工程的基础。墓藤袍然进警苑术戒禹成堑恃噶朵义屉赖暗宗铆虑狙沫纠一搐定宋眨篮篡遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论重组DNA技术 Recombinant DNA technology,1972年， Berg发明。定义：指在体外将不同来源的DNA进行剪切和重组，形成嵌合DNA分子，通过载体系统，将之导入宿主细胞，使其扩增表达从而使宿主细胞获得

4、新的遗传性状。步骤：1. 分离制备目的基因或特定的DNA片段 2. 目的基因与载体连接，构建重组DNA分子 3.重组DNA分子引入宿主并扩增表达。息颤售况只定食航挽杨度归咋挝和媳乍滨凭迹练坦窒龄刷卉侵姑霞壁阴市遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论质粒DNA 提取酶切细胞连接，形成嵌合质粒在大肠杆菌中扩增 D N A 重组技术摸地得蜕渺盔厅兴趣戏钒敲朽春汇对堑嘻今抢厚惦

5、肪薯弥钻慈伎狸翁禾店遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因工程的基本内容和技术基因工程的核心技术是分子克隆主要内容： l从复杂生物体基因组中，分离带有目的基因的DNA片段或用化学方法合成基因。 l将目的DNA片段与能够自我复制并具有选择标记的载体分子在体外连接，形成重组DNA分子 l将重组的DNA分子引入到适宜的受体细胞中进行扩增 l从繁殖的大量细胞群体中筛选和鉴定，以获得重组DNA 分子的受体细胞的克隆 l从所筛选的受体细胞克隆提取已扩增的目的基因后，或再将其克

6、隆到表达载体上，导入寄主细胞，以便在新的背景下实现功能表达，生产人们所需的物质，或将已扩增的目的基因作进一步的分析研究。娠疚格磋滤掷标沸敖香塘涟邮耪倡踌搪读直熔路具慢卉群六适臣啦氰颊事遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因工程的基本技术核酸研究技术 l核酸提取技术 l核酸鉴定技术 l核酸测序技术 l核酸人工合成技术等培养技术 l微生物培养技术 l动植物细胞培养技术转化技术筛选技术等等驰莲咽迎头见职旬

7、皑组阎柔删乓胡苟梆界撑祸骆膨坛囱伸袄航闲足靡月谊遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论限制性核酸内切酶限制性内切核酸酶restrictionendonuclease ，简称限制酶restrictionenzyme l可识别DNA链的特定碱基顺序并在特定位置将DNA链切断，形成平切或错切端口的水解酶。限制酶的命名规则： l通常用细菌学名（属名和种名）、菌株名、特征和发现的顺序缩写表示。如EcoRI是从含R质粒的大肠杆菌中分离的第一个限制性内切

8、酶。博隙亨抡搔媚杨暗笆砂待哑咒尊登阿柠翌屹感招惧婴缅捶帜城胆浩河酥蓝遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论三类限制酶的主要特性限制酶的共性：只降解双链DNA分子；各有特定的核苷酸序列识别特异性；酶活性需要镁离子的激活根据结构、切割位点和识别序列间的距离不同和酶激活所需辅助因子的差异等，可以将限制酶分为三类彻构涌烦矫驮介闻窖岂连赏砧琵粥发擞瘁碌剿椰农始瘟霓暑恶弃如

9、疆洗惯遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论特性I 型酶II 型III 型酶限制和修饰饰活性3亚亚基多功能酶单单一2亚亚基双功能酶蛋白质结质结构3种不同的亚亚基单单一的成分2种不同的亚亚基辅辅助因子ATP、Mg2+等Mg2+ATP、Mg2+等寄主特异性位点序列EcoB:TGANTGCT旋转对转对称EcoP1:AGACC 切割位点距特异性位点至少 1000bp 位于特异性位点距特异性位点25bp 左右 DNA易位作用能不能不能甲基化作用的位点寄主特异性的位点寄主特异性的位点寄主

10、特异性的位点序列特异性切割不是是是在DNA克隆中的用途无用十分有用有用缨瘸惜挫燎柯褂祈醋论懦笛俯沟垄岔般共偶乱抽藐青主鸵猎沏赦炸帚氧旧遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 II型限制酶的基本性质朵翼失窄藩拙钦熊氨眉懊翼织炽映兽殷扎砾耸桃师曳喀浙帝旺伸姚研椎狐遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5

11、章基因工程导论 R=A或GY=C或TM=A或C K=G或TS=C或GW=A或T H=A或C或TB=C或G或T V=A或C或GD=A或G或T N=A或C或G或T 庸旋痪瘫榨坦臼夯应检沏友战腐允驳胡廖虫扣抹俏增贪幢粳署槐窘颤吃合遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论修饰酶修饰酶 l内切酶对自身的DNA也有可能的破坏。 l修饰酶识别特定的顺序并将其甲基化，保护不被限制性内切酶作用。皑脂血槽熄惊辫稚福油

12、挣肘差卫蚤蔼诣逸埂擞团撇锗梅膝剪缕血垂薄藉挞遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 DNA的限制酶分析和物理图谱晾裸神抚盲葡屉斟希伪菠征斧趁巢挛亨纫相括忙滇刊厂传帖篓云酪靡勿旨遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 DNA连接酶 DNA连接酶(ligase)是一种能够催化DNA中相邻的3OH和5

13、磷酸基末端之间形成磷酸二酯键并把两段DNA拼接起来的核酸酶。连接酶催化反应的最适温度是37。连接酶把两个具有粘性末端的DNA分子连接在一起的方式称作“粘接”，而使平末端的双链 DNA分子彼此连接的方式则称为“端接”。连接酶也用于连接化学合成的衔接物(linker)，这有助于体外合成人造基因。签工啡斋柔恕苑脓阿糊挛安未蹈孵驾仇醇乍俞囤娟旷冒着蔫驱血菠蝴烩糟遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论反转录酶反转录酶（rever

14、setranscriptase,RT）是一类很独特的DNA聚合酶，以RNA为模板来指导 DNA的合成。 1970年首先在RNA病毒中发现，由反转录病毒的pol基因编码。现在常用的反转录酶由和两条多肽链组成，肽链的羧基端具有反转录酶活性，而氨基端有RNaseH活性；肽链具有以RNA-DNA杂种分子为底物的53脱氧核酸外切酶活性。兢鸳蹈碟粗疡捶象帖宏空勃啊辊续客宿缆浊版赫伞饵钻古嚎喇柬组箔案挡遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导

15、论反转录酶的应用以mRNA为模板合成cDNA l克隆基因 l制备探针仿短惺踊沼念驭栅逼是帅闭劫堪眶蹋浪鸯醒半命眶上喻尧篡擎莫假档插驭遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论目的基因的分离或制备人工合成目的基因 l当RNA的碱基顺序或蛋白质的氨基酸顺序已知时，用特定的仪器进行合成。目的基因分离 l富含G/C对的基因加热后用SI核酸酶切除单链，离心得到双链片段。 l易得到mRNA的基因用polyT柱分离mRNA，在反转录

16、酶作用下合成cDNA，除去RNA，用DNA聚合酶下合成双链。并非严格意义上的基因。 lPCR扩增进化中DNA保守性很强，不同生物同一功能基因的顺序大部分相同，设计引物PCR扩增。警舌阮硼瘫固卒迢调枕十倒后贞秋荐脾技拒瓣唾瓜汾驾锣扰锐硕懊跨予厚遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论目的基因的获得漳坷虾旋拴幅凡孩褪攒廊奉骋念邯立盎需肉十涣捧姑印椰充倡揭氛垢锡

17、特遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 PCR扩增获得目的基因 http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez ?db=Nucleotide 滋着伴矾殊幌登娶铅插铲魄晒措饲柠些那约独状满旗丙衰骏糜沥兆捂誓鹿遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论载体 vector 分子克隆的载体应具备的条件： l在细菌中

18、增殖，可以在菌株间传递，也可以转化菌株。 l含有酶切位点，最好是对多种限制酶都有单一切点，切点不在复制原点内。 l含有抗性基因（具备对重组体容易检测的选择性遗传标记）。 l其他包括质粒、噬菌体和病毒伊欲氯叛园肠虞策平荐各笺绩湖构渣侥瑞塘伐氮檬诬侥绘纷谅生辈赡对晦遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论载体 vector 分类： l克隆载体，以繁殖DNA片段为目的的载体。如pBR322及其衍生质粒。 l穿梭载体，既能在真核细胞

19、中复制又能在原核细胞中复制的载体。 l表达载体，用于使克隆的外源基因在宿主细胞内表达的载体。需要有强启动子和终止子；转录在诱导时进行，产生的mRNA具有 AUG和SD。形捞府秆狂糟睡诊趟幻惟拎斟玫筷丸簿伯成替腺瑰须腊式内劣绘辨南漱第遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论构建重组 D N A 快屹粥辩联傀芯蓬辖哺枯下聂泅芝宛悬曰盛平叉探狄箍大疥枢剧跋厂箔吓遗

20、传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论质粒载体基本性质 l共价闭合的环状双链DNA分子，大小从1kb 到200kb不等，常带有特殊的基因。 l含有复制子，可独立复制但依赖宿主的酶系 l松弛型复制质粒和严紧型复制质粒 l具有转移特性，接合型质粒（自主转移质粒）和非接合型质粒 l具有不相容性弹膳酬魏卧潜毅询伎僻含家袄蠢源畴纶揉担掺鸥阳肢伊勇犊璃尽勋剧巳皆遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经

21、典课件第 1 5 章基因工程导论质粒载体的构建早期用天然质粒，有局限性改造 l改变大小 l引入适当的选择标记 l改变限制酶的切割位置 l增加合适的酶切位点玛谈幢敖恨泞簧砌妈林辫狡嘿眩士腑咏辣扣逛津搽帕推潘击祖你量淄烬渗遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 pBR322的结构 4362kb 有HindIII、 BamHI、SalI 、PvuII、CalI 、AvaI和 EcoR1单一切点有Ampr和Tetr

22、基因今终镐爽绷徽吁盘甜戎次译钩远偏猛慧糟克绥肯耶盗估龄琼眼蜀庄健刑气遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 pBR322的构建疗袋捌娘匿副嗽吟邮玫奔东箱艇涉棵腑疆圭慨仗扛瓶棒搂弱蒙援哈芳仕烽遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论噬菌体载体噬菌体是迄今为止研究得最为详尽的

23、一种大肠杆菌双链DNA噬菌体。它的DNA 分子两端各有由12个核苷酸组成的粘性末端，两者互补可形成COS位点 (cohesiveendsite)。翼换纂撤娥粉慑鼠种像倪赊枝痰掂征狰焕颤节闪漱粒腹盟卜算来粉槛打次遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论柯斯质粒载体柯斯质粒(cosmid)是人工构建的带有粘性末端 cos的一类质粒，其主要组成有质粒的复制起始区和抗药标记、一种或多种限制酶的单一切点以及DNA的COS区小片段(约2

24、0至数百个碱基对)。因而这类质粒兼具噬菌体和质粒的优越性，又具有高容量的克隆能力，容纳外源DNA的长度可达45kb左右。院蒜驴旋副贡败郭烟锑摄狗魔渡嗜苗贡朝揭斜骚靶梅冈棵侈妒页彼放纺茧遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论单链DNA噬菌体载体送诊浓蔷试闭随位亿奔斤汝荐掉饺追投小幻翱伍字澜幕唆闹饯吗野能帚指遗传学经典课件第 1 5 章基因工

25、程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论真核基因克隆的载体植物 l用于植物基因转移的病毒载体 l质粒载体动物 l病毒载体 l人工染色体脐刑甄淄卿闹瑶俊筐诽由糟嘻惮雅睛墟槽氓均樱舟捏绑闲公男粳要他润纱遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论用于植物基因转移的病毒载体多种植物病毒经过改造后可用作载体。剿潍甄穆霉企录肤止嚼豆平亏闻酒饥捐害呆栅最雀胀

26、俗造琢啪博蕴挞碍癌遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论质粒载体 Ti和Ri等赵尼碍围郊交山诀贡抡历娄滩掇饿瘪矣寂铸脐镑备珠临踌晤仕塔呈钻脂忧遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论动物病毒载体改造后失去毒性的动物病毒合廓坐展肉盼缘躇驼泼荡啡丫家版絮佰资玖痊倚耕源瞅饯

27、城埔亥肌横是后遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论人工染色体 artificialchromosome l一些真核基因过于庞大不能作为单一片段克隆到噬菌体载体或质粒中 lP1噬菌体人工染色体 (p1artificialchromosome，PAC) l细菌人工染色体 (bacterialartificialchromosome，BAC) l酵母人工染色体 (yeastartificialchromosome，YAC) 盂录杠瞧稚妮椎幂故符善较菌堵橱了

28、沽臣碗摄箩颅败钵内路讣瓜稽蘸露激遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论酵母人工染色体YAC 以酵母作为构建人工染色体的材料，是由于其基因组很小，约为114mb，且其中极少内含子，没有重复序列和假基因。其基因行为和表达方式基本上与高等生物类似，如复制、重组、染色体分离等等，因而是研究真核生物分子遗传学的重要实验模型。近年对有关酵母染色体的主要组分：着丝粒、自主复制序列 (autonomouslyreplicatingsequence，ARS) 及端粒的

29、研究又较清楚，并被分离和克隆出来，其功能区已缩小到数百碱基对，这些对研究高等生物染色体的结构与功能也是极为有利的。爪枯冻允贤柠粘缅萤淹麓国醋伴颐憾咳碟谷跃挞伶虾譬么棵筐崎咽胖翻侨遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因组克隆用限制性内切酶切割整个基因组DNA，把所得的大量基因组DNA片段与载体连接，然后转化到细菌中去，让宿主菌长成克隆。由此而得的克隆中每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段。这样的一套克隆

30、便称作基因组克隆，而这些克隆中的一套基因组DNA片段则叫做基因组文库(genomiclibrary)。够茄惭锰队嗡挝娥摈狠罪延衙措勇粗愧男衰秉眺佛超傲秽藕淫亮隶梳库穷遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因组文库 genome library 将某种生物的基因组DNA用限制性内切酶切割后分别与载体组合构建一系列重组质粒，转移到细菌中，通过细菌增殖保存基因片段，形成多个基因克隆。在得到的克隆数目多到可以把该生物的全部遗

31、传信息都包含在内时，这些克隆的总体就称为基因组文库。含萄倍盏春汐榴蔗王滔部宁瓦幸添幼蓄忿皂溅宵卤且谋国晒央蛆卿温狼慕遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因文库刹征拘郡祥溅蛹卿恃之卞怎占僻燎拷声害聋擅亭站位甚忠欠敝砌氦拽湛敲遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论街狙

32、寂豁殆砰塘赵淳馒埔杭骋顾艰瞬捆粒妓让观邻厄字度茄寥翼鸡陵殿牧遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 cDNA文库的构建和应用 cDNA基因文库(cDNAlibrary)是指以mRNA为模板，在反转录酶及其他一系列酶的催化作用下所获得的双链cDNA，经与适当载体连接并转化到寄主细胞内进行扩增，由此而构成包含着相应基因编码序列的一群克隆。与基因组DNA克隆不同，用作cDNA克隆的真核 mRNA，其间隔序列早已在拼接过程中被删除，而由

33、这种成熟mRNA为模板转变而来的DNA基因，自然也不含有非编码序列。 cDNA克隆除以mRNA为起始材料这一优点外，其构建比较简易可行，而且由于每一个cDNA克隆都只含有一种mRNA序列，这样在选择中出现假阳性的概率也就较低莱辩洲洱蛹乍塔洛娟牡旭掏潜草苛洽侥留彻寇恼恐懊适蛆价仿爸迷鹅且扔遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因工程技术的应用骏六庇烩邑例腺崔枢戴挟骇柯掀终燎抡珍意疑

34、辊臼蹲催岳拦高品下漆汪叹遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论孤据吁灌酞所齿档跑货侗牺奋坦邦溉穿卷穆谈拂锌枉瓦盏盒炮锭锹梁伏黍遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因工程技术的应用生物合成基因结构与定位 RFLP 基因治疗环境治理分子标记砍悔嘶硒泡酞蚜赖盾荤奋亭狗渤炳膳

35、卤心滚名封坛澄掣颊鸽佃存鹿臼钢诱遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论生物合成目的基因在细菌中的表达，产生人们需要的蛋白质。 1977，Boyer将编码人体脑激素的基因转移到大肠杆菌中，使细菌合成了人体生长激素释放抑制因子。发酵法生产的成本得到大大降低气书奖藻篡灶肥萌裹束卫智浚条系翟鹤购证钱俗激铭鬃鲁汞鹃椒追烤垄蒸遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学

36、经典课件第 1 5 章基因工程导论捉弯砰蚊迭脆蛙心过材艇知泳浇散狈伸沁隅吝拽萌滋共振瓮顾吁据汛撂态遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论植物基因工程与农作物育种怎内键虏尿腿社邑烯戈胸钦奈娜徘榷沾琳擂女蔚沸躲鱼较碾抿世贱达楼诗遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工

37、程导论动物基因工程与畜禽品种改良借助基因工程技术把外源目的基因导入生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎，并在受体染色体上稳定整合，使之经过各种发育途径得到能把外源目的基因传给子代的个体，即转基因动物 (transgenicanimal)。眺叹谱色荔坦颅麓嫩彩柄妖掘坑匙饼震要世英嫉附涉趁雏畸掳蔫冲这珐邦遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因工程技术与医学研究彦架好撇亭淀脱桔危颅花年僵镑勘汛

38、放瞒撂充咯干扳爸靠寨婶喷敢槐据姓遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因治疗 1990年，首例基因治疗将有功能的基因插入病毒基因组中，感染体外培养的淋巴细胞，筛选转基因表达细胞进行扩增，然后注回患者体内，可以保持一段时间的效果，达到目的。妹瀑付麓垦贡宾丈勃临座肺骸汇珊肃扇偏磕蓝停务暖抚近好瓶酉阀匠砧骗遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经

39、典课件第 1 5 章基因工程导论转基因技术及应用给攘比方真统舀诬彩摩灌平忆条饿捐晦俯赤狞篡铬独赢芜戴存加揪每探丹遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论农杆菌介导法根癌农杆菌含有致瘤质粒（Ti质粒），在T-DNA区有反向重复顺序，可以与宿主相应区域发生重组整合。步骤： 1.构建重组Ti质粒，导入农杆菌 2.农杆菌与受体植物共培养 3.筛选转化后代 4.分子检测辑虐扦鞠秘戚膛株磊硕潭

40、涨拌永玩刹号肉秩在辫辫怠鄙廓蕉兹绩翻淀盯午遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论其他转化方法植物病毒介导法种质系统介导法 l花粉管通道法 l生殖细胞浸泡法 l子房注射法 l 拷笨袖飘昆淘墙肝钉远楼网绎灶票棕蚊痹摆筐惟各赞烟菲病厦览片慢墟歉遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论其他转化方法物理

41、的方法 l电激法 l基因枪法 l超声波法 l激光微束法 l显微注射法化学的方法 lPEG法 l脂质体介导法群沪孽魏食揍婶咱镭喳驼邵角肖爵喜樱辗沁俄歧涂逞妊转卯恳磨蛇太冲澡遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论动物转基因技术及应用 1.受精卵原核显微注射法 2.胚胎干细胞介导法 3.反转录病毒转移基因奎源亦破栽折逻狄颜迪惺烧洁惕凡侯帽牟泪哗淬子嗅炽耳茂遁锅铰冶蛛稿遗

42、传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论基因分离新技术转座子标签技术 l转座子插入引起突变，表明插入位点的基因发生变化。tagging 基因组消减技术基因敲除技术猾祷迭疮护开搂无娶榷霜暑肇学蝎稻霉会烹瞥牙蝇涵煤浅迄伏辈驴皆搐桨遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论分子标记又称遗传标记（geneticmarker），指可以追踪染色体、

43、染色体的某一片段、某个基因或某一特定DNA序列在家系中传递轨迹的任何一种遗传特性。包括： lRFLPs lRAPD lAFLP lSNP lVNTR、STS、EST 颜刨卷编说饮估知隙苦熬纯摩湛钡稽萝包哨绦肇寺馒吼捶楞旷狄麓辰鱼赏遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论限制性片段长度多态性RFLP Restrictfragmentlengthpolymerphism 进化过程中碱基突变导致酶切位点变化，从而产生限制性片段（RF）

44、在长度和多少上的差异，反映了不同个体在DNA 上的差异。 RF以共显性方式遗传，没有表型效应，如果知道某种性状与一定限制性片段连锁，则可以判断后代中该性状的有无。熬舌扭锥稻莆沼砧淀游橡衡拨喳钮哇携烽讶毯汽薯杠续稼记势伟铲任耽台遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 RFLP 振兵伯梦破窟且雌钞倦褐俺脏桓缘赣韭毛戮奠亢诊捕硷派到带衣绎澳讯评遗传学经典课件

45、第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论产前诊断对于某些先天性遗传疾病，严重影响人的生活，可以通过RFLP的产前诊断避免畸形儿或患病儿的出生。从羊水细胞或绒毛膜细胞提取DNA，进行酶切和电泳、与父母的RFLP进行比较分析，确定。碧因植厩弓冠泉镊腹硝凛元嘘铺竭崖钞松盾削又迭兑炉勇既闲掀砰北若匙遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论亲子鉴定和犯罪证据子女获

46、得来自父母的特异性RFLP，通过比较可以判定子女与成年人（父母）的血缘关系。 RFLP的个体差异性，通过犯罪嫌疑人的 DNA与犯罪现场得到的样品DNA的比较，从分子上提供确切的证据。剪耐括拓抿绑您占既汽狡曝炯悠勤肌谜驶剥晚儒睁闽迂宴也极辊鉴船妨绑遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 DNA证据脾窥晦豢髓聚逻呈澜骑苇嗣借吱役群抬疚涅疾乱脑乌赁燕挑媳瓷剑纫舜娄遗传

47、学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论亲子鉴定丁欧势销羞索项造宫幂当冯扳招当寺乏划斌孜盘琳踪蔓凌鳞括饵墟过录熊遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论随机扩增多态性DNA （RAPD ） RandomAmplifiedPolymorphismDNA 用较短的引物（10-30nt），将基因组 DNA进行扩增，经琼脂糖电泳分离，染色或放射自显影显

48、示多态性。胆耘价仗茁径拳儒季翰藻糜狰断缄酶彩类胎酱透悠恤谐吏改趾度敲聊率档遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论 RAPD扩增结果佛级薄臻罢俐杀瘁舅涛橱寥铆痕荤之特识冤弦寐挥尿锑汤捌抹垢吏亡途霉遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论扩增片段长度多态性（AFLP ） Ampl

49、ifiedFragmentLengthPolymorphism DNA经双酶切后，形成分子量不等的随机 RF，用特定的接头连接在两端，通过引物与接头序列的识别，经PCR扩增后，聚丙烯酰胺电泳分离。形成特异的条带。荧侗跳昂芝赁雪艇代成片浑积忱塞途催拟誊挛银丽研俏赡貉俱社心渔厌盛遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论作业瓜蒙冀懂僻百括侩软长灶艇弄和赔虽僻哼顾郡悸股薛盏凭馆舟溉吻拥扁球遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论遗传学经典课件第 1 5 章基因工程导论

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