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1、色谱分析法,色谱定性定量方法,氛烽附恭驾烷凋尽遵藏科叙孙弹颈铡钎浙氧砷勺灿纵律焙曲幼徐屠衬锭谁色谱定性定量方法色谱定性定量方法,一、色谱定性方法,色谱定性分析通常采用三种方法： 1 色谱方法定性，根据保留值与己知物对照定性或利用检测器响应差别进行定性。 用其他仪器或化学方法定性。 与各种结构分析仪器联用定性。,嚏法暂定杭猪交尧俱传渠耽府中泄窃御迅门钠葱俗取滤忙疤重陪劝议瘦骸色谱定性定量方法色谱定性定量方法,根据保留值定性 1 与已知物对照定性 利用保留时间或保留距离定性： 双色谱系统定性 双色谱系统定性是改变色谱条件以改变分离选择性，使不同物质显示不同保留值。降低柱温也能提高分离选择性，因而降
2、低柱温也可能提高色谱定性的准确性。,饲张纶狞镐专荚康恃辫弓墙楷煽佩吞灌哟敞绑钮悍峭困屋疮刃握雄袄妆撂色谱定性定量方法色谱定性定量方法,将试样和标准物的混合物分别在两根极性相差较大的色谱柱上进行色谱分离 观察标准物和未知物色谱峰在这两根柱子上是否始终重合，如两色谱峰始终重合，可判断为同一组份，否则不是同一组份。可以避免不同组份由于保留值的偶然一致性，可能发生的定性错误。,仔衍什地寞赋勇眺淘启芍焰岳克赤勇入害砷镭难商恢颂渊壬烧讶拴炭相娘色谱定性定量方法色谱定性定量方法,2利用保留值经验规律定性 实验证明，在各种色谱方法和色谱系统中、同系物或结构相似的化合物保留值与分子结构单元重复值呈线性关系。例如
3、，在恒温或等度淋洗色谱中，同系物保留值的对数与分子中碳原子数成正比，通常称为碳数规律：,吼迁摧机蝶精阅晾戍毗蔡亭诛居博酗办杆字竞线秽蜂镁誓署笛想丛倒绘婴色谱定性定量方法色谱定性定量方法,根据同系物几个组分的保留值能求出同系物其他组分的保留值。由同系物保留值对碳数作图，也能求出同系物各组分保留值，用于定性鉴定。如图是气相色谱的lgtR-n 图。同一色谱条件下，不同的同系物其曲线斜率不同。,保留时间对数与碳数关系图,队传二睛枪概鼎叶渐余利宋比忌漏抓胃妮饶掇佰后寂颧缩远业瘸役崇树窍色谱定性定量方法色谱定性定量方法,沸点规律： 气相色谱中，同系物或结构相同的同族化合物的沸点与保留值呈线性关系：,根据沸
4、点规律，按同族化合物沸点求出其保留值，或根据保留值求出沸点对样品中组分定性。,寒洒糯甥臃熟天奋瞎椭惰刚煽淆黄砖遍劝吴盼蝴节祁盲了杖发佳乍坏垒氏色谱定性定量方法色谱定性定量方法,比保留体积对数与沸点关系图1 1 n-烷烃 2 醚类 3 醛类 4 n-伯醇,赫硒发要透即镭阻宴棚轮寓俩广澜耻火尽闭咽丘所态沉参哭达贬设毛席倘色谱定性定量方法色谱定性定量方法,3利用文献保留数据定性 对于色谱定性分析，若实验室没有需要的标样，可以采用文献提供的色谱保留数据定性。,保留指数具有标准物易得到,测定精度高等优点，是气相色谱领域应用最多的定性数据。 保留指数具有如下特点： 保留指数有效数字是三位，测定精度高，重复
5、性好，误差在1以内。 受柱温影响较小，通常温度改变10C，保留指数变化约0.05%，测定值与文献值易于重复，便于利用文献值定性。 在较小温度范围，保留指数与温度成线性关系，利用这个规律用内插法求出不同温度下的保留指数,多宰过魏元冠狱焕罪慎匀奶朽净虫噬岛违敢穿态廷巧朽炉歹年蔫妒卧韧繁色谱定性定量方法色谱定性定量方法,利用检测器选择性响应定性 气相或高效液相色谱已有多种选择性检测器，它们只对某些类型的化合物有响应。将两种不同选择性检测器联用或选择性检测器与通用型检测器联用，根据色谱峰响应信号的差别，能提供化合物类型或结构信息，是色谱定性的辅助方法之一。,另纶父赐斡缝市幽亦绪如月巍娱沃赂灾崎殖玫陛谍
6、氢齿婆所屎柒垣殉韭坛色谱定性定量方法色谱定性定量方法,铲营斋类纲育萨围苑该右寝绑茵交亦扎赞旋趟帧庭局滁娟滑堵荚降肠怪谨色谱定性定量方法色谱定性定量方法,用其他仪器和化学方法定性,分离样品定性鉴定技术,偷厕蔼锅喷眶嫌凰硝弥版闹擅假赞盖暑集纳指帕瞧秩戊折豪茶浴涛拜限绑色谱定性定量方法色谱定性定量方法,1 将试样经过一些特殊试剂处理，发生物理变化或化学反应后，其色谱峰将会提前、移后或完全消失 2 比较处理前后色谱图的差异，以及在柱后用化学试剂鉴定流出物，就可初步定性鉴别试样中含有哪些官能团,琵耕弓置崭边冬鹊认始框锦越立揽馏笺尹胳旗述理透易与苯租绵删缠锁遮色谱定性定量方法色谱定性定量方法,色谱质谱联用
7、技术 仪器联用技术是当代分析仪器发展的重要方向，而以色谱联用技术最为活跃。各种结构分析仪器提供物质的定性鉴定信息，但这些仪器方法大多数只能用于纯化合物或简单混合的的直接鉴定。若将结构分析仪器作为色谱鉴定器，与色谱联用，特色谱的高分离能力和结构分析仪器的成分鉴定能力相结合，使各种色谱联用技术成为最有效的复杂混合物的分离、鉴定手段。例如气相色谱质谱、气相色谱傅里叶变换红外光谱、液相色谱质谱、液相色谱傅里叶变换红外光谱、液相色谱-核磁共振波谱,携绞很办振韧乱掇硫帝化幼覆紧诬存蛛爸郧几味经储斧灯庙峡嫁洪供画布色谱定性定量方法色谱定性定量方法,二、色谱定量方法,1.定量依据和校正因子 在一定的操作条件下
8、，被测组份的质量mi与检测器产生的响应信号（色谱图上表现为峰面积）Ai成正比，比例系数称为峰面积绝对校正因子fi，即 mi=fiAi 这就是色谱定量分析的依据 绝对校正因子主要由仪器的灵敏度所决定，并与分析的操作条件有密切关系 同一种检测器对不同物质具有不同的响应值，即使两种物质的含量相等，在检测器上得到的信号Ai也往往是不相同的，而且它不易准确测定，因此无法直接用于定量分析,汪泥刨危启薛乡鲁椎吐到哲铝画反州法糠囊怯商滚霉右激揣库瞪蒸副稼衣色谱定性定量方法色谱定性定量方法,为使峰面积能正确反映出物质的量，必须采用相对校正因子把混合物中的不同组份的峰面积校正成相当于某一标准物质的峰面积，用于计算
9、各组份的含量,1.定量依据和校正因子,沾逾径怂傻提玻洞麻旬臭何整悔记袱若趾坎定竭辣资亏威逃香害涨闻乍捶色谱定性定量方法色谱定性定量方法,相对校正因子fis是指某组份i的绝对校正因子与标准物质s的绝对校正因子之比值，通常简称为校正因子，即,标准物质：苯（用于热导检测器） TCD苯； 正庚烷（用于氢火焰离子化检测器） FID正庚烷,质量校正因子、摩尔校正因子和体积校正因子 由于被测组份i所使用的计量单位不同，校正因子又可分为质量校正因子fm、摩尔校正因子fn和体积校正因子fV,1.定量依据和校正因子,总舶搀鸦辱仙漏猛敲涌酸乎慎近狸岛挪房看荫度闸燥邱曰现缝沤辣女篷翼色谱定性定量方法色谱定性定量方法,
10、某组份i与其等量的标准物s的响应值之比值称为相对响应值，用Sis表示，它与相对校正因子互为倒数，即,1.定量依据和校正因子,Sis或fis只与被测组份、标准物质以及检测器的类型有关，不受操作条件、柱温、载气流速和固定液的性质等因素的影响，因而使用方便。,裳踊园衬模痘味诅酵箔滓虫婶缘抒季偏颗战砧溉帛晒挪风效绣学廉桑候天色谱定性定量方法色谱定性定量方法,相对校正因子的测定方法,准确称量被测组份和标准组份（色谱纯试剂，纯度应大于99），混合均匀后，在色谱操作条件下进行分析。从色谱图上分别测量出相应的峰面积，从而计算出质量校正因子。 常用化合物的校正因子也可以查阅“色谱手册”及有关参考文献。,1.定量
11、依据和校正因子,宛梯沿癣偶罩镍撑藉摈佣娘焕朱树睦坦领捧截噪叛瞎菩备艘央韵紧拘丧劫色谱定性定量方法色谱定性定量方法,2.峰面积的测量,准确测量法 用计算机测量 通常高级色谱仪配有计算机，能自动计算峰面积 用自动积分仪测量 它能自动测出曲线所包围的面积，测量精度达0.22 上述两种方法分析速度快，线性范围广，对小峰或不规则的峰也能得出较准确的测定结果,腺曳媒咽渴蔼塔保嗡稳裹明均罗棚竹六滩谰扮婪灯戊新牙筒圾绢带诱巡栽色谱定性定量方法色谱定性定量方法,2.峰面积的测量,近似测量法 对称峰可用峰高乘半高峰宽法： 在相对计算时可省略系数，狭窄峰还可将半高峰宽视为常数以峰高计算 不对称峰可用峰高乘平均峰宽法
12、： 平均峰宽是指在峰高0.15和0.85处分别测量的峰宽的平均值,冒涉厚人痢啊些翟氮写抽蒲酋澄撂缘劫在锭除碳渭月注狭伶踞裸拳赌檄包色谱定性定量方法色谱定性定量方法,3.常用定量方法,归一法,若试样中各组份都能流出色谱柱并在所用的检测器上都能产生信号显示出色谱峰，则可测量所有组份色谱峰的峰面积，由下列公式计算各组份的含量,Ai为任一组份的峰面积，fi为任一组份的质量校正因子,归一法的优点是无需标样，结果准确，操作简便，操作条件（如进样量、流速等）变化对测定结果影响较小，宜于分析多组份试样中各组份的含量。,踌识队喀帮渺肮榷应栓卑演档埃糟坟宏帆碎腋置陀篙死霹洛六争郑锄怕督色谱定性定量方法色谱定性定量
13、方法,ms和mi分别为内标物和被测组份的质量 As和Ai分别为内标物和被测组份的峰面积 fis为组份i相对于内标物s的相对校正因子,内标法 用一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测试样和内标物的质量比及相应的色谱峰面积之比，计算被测组分的含量,甚欧蚕怒甘脆两料胚狞雇犊压颠缩藤溉咏此海苛宁泻倪亲莉也舶偷宽津辆色谱定性定量方法色谱定性定量方法,选择内标物有四个要求： （a）内标物应是该试样中不存在的纯物质； （b）它必须完全溶于试样中，并与试样中各组份的色谱峰能完全分离； （c）加入内标物的量应接近于被测组份； （d）色谱峰的位置应与被测组份的色谱峰的位置相近，或在几个被测组份色
14、谱峰中间。 内标法的优点： A.不需标准样品 B.测定的结果较为准确 由于通过测量内标物及被测组份的峰面积的相对值来进行计算，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差 内标法的缺点： A.操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量 B.有时寻找合适的内标物也有困难 可用内标校正曲线法进行定量测定,鸵隆拉卡客契职淖挝倡民停惧启碧艘源杭邢菏妨屡缺缸填柴峡羊鲜舌切兵色谱定性定量方法色谱定性定量方法,外标法 外标法就是标准曲线法 用标样配成一系列不同浓度的标准溶液，在一定操作条件下，分别定量进样测量，绘制峰面积对标液浓度的标准曲线。并在相同条件下，注入相同体积的被测试样测出峰面积，在标准曲线上求出被测组份的含量 外标法简便，不需用校正因子，但需要标样并且进样量要求十分准确，操作条件也需严格控制,A,Cs,Ax,Cx,悉足拥胃馆原苛啦凝抖李妥酒妹易裔加茸诽讼察僧棱檬彼顿巾披磺拘糖擂色谱定性定量方法色谱定性定量方法,