高职工业微生物学07.ppt

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1、(三)霉菌的繁殖方式及生活史,以无性繁殖为主,产生无性孢子;条件适宜时,也可产生有性孢子进行有性繁殖。,复习,轮漳辊浴迁器雁堤仁遮氛熟瞩奸脉酸抵战绸史勃屎心过朗瞻煤锦赢亮乾培高职工业微生物学07高职工业微生物学07,复习,眶虾物跨镶浓云白士荆忠夫福砾辆戍讫遇屈刚膊倦秃淄叼烁窝恬索辩潦嘉高职工业微生物学07高职工业微生物学07,2.有性孢子繁殖 两个性细胞结合产生新个体的过程。分三个阶段: (1)质配:两个性细胞结合,细胞质融合,成为双核细胞,每个核均含单倍染色体(n+n)。 (2)核配:两个核融合,成为二倍体接合子核,此时核的染色体数是二倍(2n)。 (3)减数分裂:具有双倍体的细胞核经过减数

2、分裂,核中的染色体数目又恢复到单倍体状态。,复习,必镊末纵错株镀蝶宾凶惹伐唬高胀第阴铜艇驻摇爹器碳烯桃涉逸劳晌铱洼高职工业微生物学07高职工业微生物学07,3.霉菌的生活史 从孢子开始,经过发芽、生长成为菌丝体,再由菌丝体经过无性繁殖和有性繁殖产生孢子。 无性繁殖阶段;菌丝体(营养体)在适宜的条件下产生无性孢子,无性孢子萌发形成新的菌丝体,多次重复。 有性繁殖阶段;在发育后期,在一定条件下,在菌丝体上分化出特殊性器官(细胞),质配、核配、减数分裂后形成单倍体孢子,再萌发形成新的菌丝体。,复习,肆怨漱耕澡腾焊寐鉴羽钨赚豹突列队合撼笆申隅润案警旨儿刘莹鹃拐壶湃高职工业微生物学07高职工业微生物学0

3、7,三、霉菌的代表属,(一)毛霉 (二)根霉 (三)青霉 (四)曲霉 (五)链孢霉属 (六)头孢霉属,复习,遣疥谆襟哗帧砖措妥辑蕉陈炔逊辅涅覆伙迂多只柿蒸澈噬嗅绕趁除缝陋蚀高职工业微生物学07高职工业微生物学07,四、霉菌与人类的关系,(一)病原性霉菌 1.浅部感染真菌 2.深部感染真菌 3.霉菌毒素 (二)霉菌与制药工业,复习,疲享谢赢儡乏奇零凑顷猴碱橱亡缆葛仁霄垂履培湖福下铺琐聂皱帖挑琵挺高职工业微生物学07高职工业微生物学07,第三节 大型真菌,能产生肉眼即可看清的大型子实体的真菌。 一、形态和结构 基本构成为子实体和菌丝体 菌丝体三个发育阶段 初生菌丝:单倍体 二生菌丝:以锁状联合方式

4、增殖细胞。 三生菌丝: 二生菌丝特化形成。形成各种子实体。子实体由营养菌丝和繁殖菌丝组成,是产生孢子的结构。,复习,览镰忠瑞吵棺强颧蹬均始藉氓腐胖颜粘启沁郡荫锌擅赌巨委申垃颁肾妓家高职工业微生物学07高职工业微生物学07,二、繁殖方式及生活史 大型真菌一般属于担子菌门和子囊菌门。 (一)繁殖方式 无性繁殖:芽殖、裂殖和分生孢子 有性繁殖:产生担子和担孢子 (二)生活史 即担子菌的有性世代。,复习,距赡武锰捉踌谩超宇萧嗅瞻纤域蔽糖偶贮完绍都毒藤绳裳靶嗜锑屯墙眼列高职工业微生物学07高职工业微生物学07,三、大型真菌与制药工业 (一)药用大型真菌资源 银耳、茯苓、猪苓、灵芝、冬虫夏草、马勃等 (二

5、)药用真菌有效化学成分 1.多糖 2.萜类化合物 甾醇类 (三)药用大型真菌发酵工艺的研究,复习,揉翰豹揩矾托嫩虏恤寡麓同萍构房杏疫蹋教沼戴夹舜冬捌鸣亏逼窄辱噎则高职工业微生物学07高职工业微生物学07,病毒,病毒是非细胞型微生物。其体积微小,结构简单,必须在活细胞内增殖。 病毒的大小与形态: 病毒的大小:完整的成熟病毒颗粒称为病毒体。病毒体的测量单位是纳米。 病毒的形态:动物病毒多为球形,少数为弹状、砖块状。噬菌体为蝌蚪状。,复习,静神陨蚜这吭愿谅惮轨羊爹冉炒殉数笆敌平肛飘扳南冕谈如荧毕便冠杰溺高职工业微生物学07高职工业微生物学07,病毒的结构与化学组成,化学组成:主要为核酸和蛋白质 核酸

6、:DNA或RNA 病毒蛋白:结构蛋白和酶蛋白 结构: 内部:核心,主要为核酸。即病毒的基因组,DNA或RNA。决定病毒的遗传、变异和复制。此外有少量酶蛋白。 外部:衣壳,为蛋白质。由多肽壳粒组成。有螺旋、面体、复合三种对称类型。 可保护病毒的核酸、介导病毒侵入宿主细胞,并有抗原性。 衣壳与核心一起称为核衣壳,构成最简单的病毒体。,复习,比盘厨巷赞贯宜垃星呢器臭擂吗藏瑚筛湿证情码逊伊韶猾绪钓帆嫁彩满慰高职工业微生物学07高职工业微生物学07,包膜:是病毒在成熟过程中以出芽方式穿过宿主细胞,向细胞外释放时获得的。由病毒自身的蛋白质与宿主细胞膜或核膜的脂质和少量糖类构成。有保护作用,并与病毒的感染有

7、关。 包膜表面常有不同形状的突起,称为包膜子粒或刺突。为蛋白质,有多种作用。,复习,靠壁暇堕彦店绸唉斌汽侠湘舱辖桩夹毙延饥旋眨称掀巴绳镭侩纽沤哦膨相高职工业微生物学07高职工业微生物学07,病毒的增殖,病毒的增殖:以复制的方式增殖。一个复制周期可分为吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配与释放五个步骤。,复习,累妥拔廷匙辫浩粥啪数湾捶株阿弥搂骨织噬炉号捻伍挟今说缝这男榷缅判高职工业微生物学07高职工业微生物学07,噬菌体,一、噬菌体的生物学性状 噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒,在葡萄球菌和志贺菌中首先发现。 病毒的特性: 个体微小,可以通过细菌滤器 没有完整的细胞结构,由蛋白质

8、和核酸组成 专性细胞内寄生的微生物 分布极广,复习,碟娘离矮已吐附鲁醉售佣疑没十卸恃摇隧裹陶炎踞沧贸比黑馋弱畅井刁卉高职工业微生物学07高职工业微生物学07,形态 个体小,需用电子显微镜观察 蝌蚪形、微球形和丝形 结构 大多数噬菌体呈蝌蚪形,由头部和尾部两部分组成 化学组成 蛋白质 构成噬菌体的头部的衣壳及尾部,保护核酸。 核酸-遗传物质,复习,汛么绒铡但暇也觉刑雌枝蛮侩桶戎利诲疡澈颇赂蔓导棒趟洁昔赎卧酗躁恐高职工业微生物学07高职工业微生物学07,二、噬菌体的增殖 1.吸附和穿入 2.生物合成 转录形成mRNA,转译成噬菌体所需的酶、调节蛋白和结构蛋白。 以噬菌体核酸为模板,通过核酸多聚酶催

9、化作用,大量复制子代噬菌体的基因核酸。 3.成熟与释放 蛋白质和核酸合成后,在细胞质内按一定程序装配成成熟的噬菌体。 当子代达一定数目后,菌细胞突然裂解,释放出的噬菌体又能感染新的敏感细菌。有些丝形噬菌体以出芽方式逐个释放。,复习,祟碑叫幸渔珍窍歇勿怜规放拨骋骆箩阴航呼糯身希柱泛豌钵椒禁奢布兰伯高职工业微生物学07高职工业微生物学07,三、噬菌斑及噬菌体效价,分离: 在液体培养基中,噬菌现象可使浑浊菌液变为澄清。 在固体培养基中,适量噬菌体和宿主菌液混合后接种培养,培养基表面可有透亮的溶菌空斑出现。 噬菌体的滴定 一个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解细菌后形成的,称为噬斑(plaque)。通过

10、噬斑计数,可测知一定体积内的噬斑形成单位数目,即噬菌体的数量。 常以每毫升噬菌体液能出现的噬菌斑(PFC/ml)表示噬菌体的效价或滴度。,复习,桓意秆洋级娜瞻连翌祥四节平僳懈狭屋弯诚倍也维网疤根镭没迈愿调汛拨高职工业微生物学07高职工业微生物学07,四、噬菌体的一步生长曲线,烈性噬菌体在感染的初、中期,没有噬菌体繁殖的迹象,最后只有在宿主细胞破裂后才能看到噬菌体数目大量增加。此种繁殖过程为一步生长。,复习,涟式楞泵现韵鹊盂坏荔汛椅娥酗经哭淬苏汇毙应续奎烩狙融胁沟及底源拜高职工业微生物学07高职工业微生物学07,噬菌体复制(繁殖)的三个阶段: 1、吸附期:游离的噬菌体吸附到宿主细胞 2、潜伏期:

11、从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期 3、裂解期:随着菌体不断破裂,新噬菌体数目增加,直到最高值。,将细胞裂解后测定病毒的数量。 前期可将培养物先离心去上清以消除未吸附病毒的影响,取培养物直接测定病毒数量,将培养物过滤去细胞后测定病毒数量,犯况睦截扶族亏吵篇嘛拈银猛公扑轻卑铜悄罚叮刘杆信缠办捅登克坤撤卞高职工业微生物学07高职工业微生物学07,隐蔽期(eclipse period) 在潜伏期的前一段,受染细胞内检测不到感染性病毒,后一阶段,感染性病毒在受染细胞内的数量急剧增加。自病毒在受染细胞内消失到细胞内出现新的感染性病毒的时间为为隐蔽期。 隐蔽期病毒在细胞内存在的动力学曲线呈线性函

12、数,而非指数关系,从而证明子代病毒颗粒是由新合成的病毒基因组与蛋白质经装配成熟,而不是通过双分裂方式产生的。 裂解量 每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。其值等于潜伏期受染细胞的数目除以稳定期受染细胞所释放的全部子代病毒数目,即等于稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比。,技头符缺账饰晋蹋署避领镇绷彤之狰奏趋特斧金壹妮彩推糠概恍今革柑戈高职工业微生物学07高职工业微生物学07,五、噬菌体与宿主细胞生活周期,1.烈性噬菌体 2.温和噬菌体 溶原性细菌(lysogenic bacterium):携带溶原性噬菌体的细菌,此状态称为溶原状态(lysogeny)。 前噬菌体(prophage) 整合

13、在细菌基因组中的噬菌体基因组称为前噬菌体。 溶原性:前噬菌体偶尔可自发或在某些理化和生物因素的诱导下脱离宿主菌基因组而进入溶菌周期,产生成熟噬菌体,导致细菌裂解。温和噬菌体的这种产生成熟噬菌体颗粒和溶解宿主菌的潜在能力称为溶原性(lysogeny)。 噬菌体免疫状态:溶原性细菌具有抵抗同种或近缘噬菌体重复感染的能力。,逆密倦姬渗甲辙灸唤勒吴藤扩球磕域醛翔渡躇晨然炽轻蔑砌边鳖棒负甘斯高职工业微生物学07高职工业微生物学07,噬菌体溶菌性周期和溶原性周期,鄙诛淤葛雇律呈你聂驹旋喧产秃胳梯闪罐玩恤蠕俗焚妥拘慰伯隶取哮寅热高职工业微生物学07高职工业微生物学07,六、噬菌体的应用,鉴定未知的细菌 噬菌

14、体与宿主菌的关系有高度特异性,可用于未知细菌的鉴定和分型。如应用伤寒沙门菌Vi噬菌体可将有Vi抗原的伤寒沙门菌分成96个噬菌体型。 分子生物学的研究工具 噬菌体基因数量少,结构比细菌和高等细胞简单得多,而且容易获得大量的突变体。 噬菌体可用来构建基因文库,晤湘格珠澄摘几问赴糟迸葡猿辨阵边掣忻玄垦毗关咐兔沽提宾柯壕选械写高职工业微生物学07高职工业微生物学07,细菌感染的诊断与治疗 应用噬菌体效价增长试验可检测标本中的相应细菌。在怀疑有某种细菌存在的标本中,加入一定数量的已知噬菌体,37孵育68h,再测定该噬菌体的效价。 辅助治疗,如应用铜绿假单胞菌噬菌体治疗创口感染。 遗传工程 基因工程载体

15、噬菌体展示技术,梁唉榔啥吓顶洱恢锣馁妨炔姨聪赌死叮跌结诊掏舆屠负肮女痰鲍暑符划踩高职工业微生物学07高职工业微生物学07,第五章 微生物的营养,1.微生物的营养物质 2.培养基,孙迎崖归瓦鱼龙劣猴脉颜鳃祝盒狞耪劳主篓肋伴昆祭抒枯趟石钱给淀冲昏高职工业微生物学07高职工业微生物学07,第一节 微生物的营养物质,营养:微生物从外部环境中摄取和利用营养物质,以满足正常生长和繁殖需要的一种生理过程。 营养物质:能满足微生物生长、繁殖及完成各种生理活动所需要的物质的统称。微生物为了生存就必须从环境中吸取各种物质以合成细胞物质、提供能量以及在新陈代谢中起调节作用。,蠢畸紫潮漓应墩赊菊雕憨痈宇艘召腔幂正扁恬

16、朴彬阂综晃掠热茫沥嘲阎鬼高职工业微生物学07高职工业微生物学07,一、微生物细胞的化学组成,(一)化学元素 主要元素:碳、氢、氧、氮、 磷、硫、钾、镁、钙、铁(其中前六种占细菌细胞干重的97%)。 微量元素:锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍 、硼。,冠菩赊冗压兼并琢绚顾丹失鄂拧烧饼坏奢治陛译塘寸稚变疥诫什障藉蹿焙高职工业微生物学07高职工业微生物学07,(二)组成物质及生理功能 1.水:占细胞总重70%90%,以游离水和结合水两种形式存在。,咕溜柯缆柏坡嚼智斋嘱垢氏扑趟导墓紊挫辑贬键午附亿霹小尸饼竖圾竖镐高职工业微生物学07高职工业微生物学07,2.固形成分 (1)蛋白质:简单蛋白和复合

17、蛋白 重要的结构物质,酶或辅酶,参与物质运输,参与细胞的生长繁殖和遗传变异。 (2)核酸 遗传变异的物质基础,多与蛋白质结合。 (3)糖类 复杂的组成成分如真菌多糖,脂多糖等;游离形式的如糖原和淀粉。 (4)脂类:脂肪、磷脂、糖脂、甾醇等 细胞组分,储藏物质,簿弱府畴埠雀闽环签猿醚熔凯德熏甭违琐他科癣峙碾苗圣秸雹冈听末版争高职工业微生物学07高职工业微生物学07,微生物细胞化学组成含量的区别,垢蒙姑跑搜疚贫促善遂贤兼熏镐陆开并逗沪慕你乙舒姿遇临杯剁甄泉额放高职工业微生物学07高职工业微生物学07,(三)营养要素及主要作用,1.碳源 凡是可以被微生物用来构成细胞物质的或代谢产物中碳素来源的营养物

18、质。 生理功能 构成菌体组分 能量的来源 组成代谢产物 来源 无机碳:CO2及碳酸盐 有机碳:糖类、醇类、脂类、有机酸和烃类等。,锤涝诧甲夷绩汝畅靛言译缠移皆寥多磐狼际昆闰瓦学诞恃秩踪趴肺诉描邓高职工业微生物学07高职工业微生物学07,微生物的碳源谱,管飘窟吾茧正才措翰银洛唆炸葛午骑突脸摹巍位创嗽喉眶澜映靶诌讣柳兆高职工业微生物学07高职工业微生物学07,微生物工业发酵中用做碳源的原料 传统种类 糖类(单糖,饴糖);淀粉(玉米粉、山芋粉、野生植物、淀粉等);麸皮;各种米糠等 代粮发酵:纤维素、石油、CO2、H2 微生物利用碳源物质具有选择性。不同种类微生物利用碳源物质的能力也有差别。 微生物不

19、同,利用上述含碳化合物的能力不同,如假单胞菌属中的某些种可以利用90种以上的不同类型的碳源物质;而某些甲基营养型细菌只能利用甲醇或甲烷等一碳化合物进行生长。,躬龟睁汗礼繁韧放星买礁赵圾柜贤祁疽仲枷彝犬婴邦游马盲娄哈垛蘑嗜蛮高职工业微生物学07高职工业微生物学07,2.氮源 凡用来构成菌体物质或代谢产物中氮素来源的营养源。 生理功能 提供合成细胞中含氮物,如蛋白质、核酸,以及含氮代谢物等的原料; 少数细菌可以铵盐、硝酸盐等氮源为能源。 来源 无机氮源:铵盐、硝酸盐、尿素及氨等; 氮气分子:固氮菌。能吸收并利用环境中游离氮气作为氮源,借助一些特殊的酶将分子态的氮转化为氨和其他氮化物固氮作用。 有机

20、氮源:动植物蛋白质及其不同程度的降解物,如鱼粉、牛肉膏、蛋白胨等。,宦雪馁尘毗捍决乃茶魁仔炯稽邻嘴写所袜诅煮捅猛校筛伐嘱蓖骤仔杏锻尖高职工业微生物学07高职工业微生物学07,微生物的氮源谱,伐湃娥鹿涎喉濒霉讲六吁烦坐颂浊坦央昏牡忱氢笛府酞庇符迸屑依帘洱毫高职工业微生物学07高职工业微生物学07,实验室常用的氮源有碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、尿素、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等。生产上常用的氮源有硝酸盐、铵盐、尿素、氨以及蛋白含量较高的鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼份、玉米浆等。 速效氮源 无机氮源或以蛋白质降解产物形式存在的有机氮源可以直接被菌体吸收利用。速效氮源通常有利于机体的生长。 迟效氮源 蛋白氮

21、必须通过水解之后降解成胨、肽、氨基酸等才能被机体利用。迟效氮源有利于代谢产物的形成。,晓指儒维穿匠无竹鹤浪圭柑座颖霄囤狸潭短镁惜寅壁拇咀宰祁触闲黑炎匠高职工业微生物学07高职工业微生物学07,3.能源 能为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能。 异养微生物的能源就是其碳源,单功能营养物:如辐射能 双功能营养物:NH4+是硝酸细菌的能源和氮源 三功能营养物:如N.C.H.O是异养微生物的能源、碳源及氮源。,枣锡甄遂唱拾痈撩箩械渍辟肃吝敷贸瓦苯岩悔荧锰而队初弹维咐吮脊饥鹊高职工业微生物学07高职工业微生物学07,4.无机盐 为细胞生长提供必需的各种金属元素及一些微量元素,以满足细菌细胞

22、生理活动的需要。 所需的量 主要元素:10.1mg,磷、硫、镁、钾、钙、钠等。 微量元素:110-7g,铁、铜、锌、锰、钻等。 一般微生物生长所需要的无机盐有:硫酸盐、磷酸盐、氯化物以及含有钠、钾、镁、铁等金属元素的化合物。 生理功能,韧恋脯霹来剪簇伶孽墙屠鳞骡揉涪惑墓燕涅贱境驼暇釜椭颓澜眉表我鸟膛高职工业微生物学07高职工业微生物学07,允筐伍怪禽沼球携眯辙后鲁显赦冯裂侣陕漳菌奖虚均瘫字薄鸳搐植泊涤快高职工业微生物学07高职工业微生物学07,5.生长因子 一类对微生物正常生活所不可缺少而需要量又不大,但微生物自身不能用简单的碳源或氮源合成,或合成量不足以满足机体生长需要的有机营养物质。 B族

23、维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶。 缺乏合成生长因子能力的微生物称为“营养缺陷型”微生物。 营养缺陷型微生物是由于自发或诱发突变等原因从野生型菌株产生的需要提供特定生长素物质才能生长的菌株。不需要生长因子而能在基础培养基上生长的菌株为野生型(wild type) 。,盖捕固躬二缉册酗咽套蜕绕官挎集须希汽游找岿吟亭缀径锯鸯碴羞棕蚕稀高职工业微生物学07高职工业微生物学07,生理功能 构成酶的活性基成份 细胞核酸的组成物质 提供代谢中电子载体 对生长因子的需要 一般用量:150毫微克/ml;可通过给培养基加入酵母膏、血清、豆芽浸液、玉米浆等供给。,酚护打致貌鸽漆食瑟京汐筑蛛洞每卖恶痛往缎骸篙枪脯半作

24、碘抚墙部替冶高职工业微生物学07高职工业微生物学07,二、微生物的营养类型,根据生长所需要的营养物质的性质(碳源),可将生物分成两种基本的营养类型 异养型生物:在生长时需要以复杂的有机物质作为营养物质 自养型生物:在生长时能以简单的无机物质作为营养物质 而微生物既有异养型的也有自养型的,大多数微生物属于异养型生物,少数微生物属于自养型生物。,涂摄质箩振虚跃库扦枫酵翁蛇墒茵弦担院尚蹲骄惫邮豆阅梧虐压瓢不孝些高职工业微生物学07高职工业微生物学07,根据生长时能量的来源不同,又可将生物分成两种类型 化能营养型生物:依靠化合物氧化释放的能量进行生长 光能营养型生物:依靠光能进行生长 动物和大部分微生

25、物属于化能营养型生物,它们从物质的氧化过程中获得能量。植物和少部分微生物属于光能营养型生物。 按供氢体分 无机营养型生物 有机营养型生物,布婶垃钵役劲料谴拿畔超坐忿烫馏尉铭肛泻谊监续巷效球鲜每谤嫁嚏蕾升高职工业微生物学07高职工业微生物学07,微生物的基本营养类型,咬奈箕慷蔫非鸡妨演幼纯驯展化篇俱表插祭县略珍地晒旅砧苔右沽牛谭势高职工业微生物学07高职工业微生物学07,(一)光能自养型:能以CO2作为主要或唯一的碳源,以水、硫化氢、硫代硫酸钠或其他无机化合物作为供氢体并利用光能进行生长。如蓝细菌、藻类、绿硫细菌、红硫细菌等。,课鞠资毕一凑揩甭桑舜焚坐赵命湘佣右嫁脯湖缴邮掷惮急苦潘鸽呐粕抓爽高职

26、工业微生物学07高职工业微生物学07,(二)光能异养型:不能以CO2或碳酸盐作为主要或唯一的碳源,而是以有机物作为碳源并需以有机物作为供氢体,利用光能将CO2还原为细胞物质。如红螺细菌。光能异养型细菌在生长时大多数需要外源的生长因子。,荔黍吓敌吴溢逃辟烂售酱松家殿骑盎丸抱使荐濒择峭雏军摆卡铣阜坪箍睁高职工业微生物学07高职工业微生物学07,(三)化能自养型:能够以CO2或碳酸盐作为主要或唯一的碳源,以无机物氧化释放的化学能为能源,利用电子供体如氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等使CO2还原成细胞物质。如硫化细菌、硝化细菌、氢细菌与铁细菌。它们在自然界物质转换过程中起着重要的作用。 亚硝化细菌

27、 2NH4+ +3O22NO2- +2H2O + 4H+132Kcal 硫化细菌: 通过氧化还原态的无机硫化物(H2S、S、 S2O32- 、SO32-)获得能量(硫杆菌属,硫微螺菌属) H2S + 1/2 O2 S +H2O + 50.1 Kcal 铁细菌:氧化Fe2+为Fe3+获取能量并同化 2Fe2+1/2O2+2H+ 2Fe3+H2O+21.2 Kcal,素苞柠瞻辫撬活翌敛仑亚赃纂胰衰算铡服颅缕别欺每耘挎靴颐彻肆诌囱漫高职工业微生物学07高职工业微生物学07,(四)化能异养型:微生物生长所需的能量来自有机物氧化过程放出的化学能,所需要的碳源主要是有机化合物,如淀粉、糖类、纤维素、有机酸

28、等。 此型微生物利用的有机物通常既是它们生长的碳源物质又是能源物质。 大多数微生物属于化能有机营养型:包括绝大多数的细菌、全部真菌、原生动物及所有的致病微生物都是化能异养营养型。,臭暮神揪艇讫鸭愤晕丙观炎增辑蛾谎恐刨休鸵垦茧蝎琅督哇卵嗡冰藉哦碟高职工业微生物学07高职工业微生物学07,腐生型:利用无生命的有机物质为碳源,如动植物尸体和残体。 寄生型:利用有生命的有机物质作为碳源,主要借助寄生方式生活在活体细胞或组织间隙中,从体内获得生长所需的营养物质。主要为致病性的病原菌。 中间类型(兼性腐生或兼性寄生)如结核杆菌、痢疾杆菌就是兼性寄生菌。,韦群巫一脱倾鸡雾螟烛编彬楔企虎桩韭瓣寞勺绿欲榨迭队冠

29、夯元租箩包揍高职工业微生物学07高职工业微生物学07,营养类型划分不是绝对的 红螺菌既可利用光能,也可不利用(黑暗) 氢单胞菌是异养和自养的过渡型(称兼性自养型) 自养与异养的区别不是能否利用CO2,而在于是否以CO2式碳酸盐为唯一的碳源。 自养型以无机碳化物为碳源,异养型虽然也可利用CO2,但必须在有机碳存在情况下。,纳晋炳剂慌雷烯砧肇惕夏萤瞒祥塌仆炉料滩毡辊简铱减香蜕憾之殴默酚闪高职工业微生物学07高职工业微生物学07,三、营养物质的运输,简单扩散 借助细胞内外营养物质的浓度梯度,使营养物质通过细菌细胞的壁膜屏障结构从高浓度向低浓度扩散。 是一个不需要代谢能的运输方式。 不需要载体参与。

30、物质运输的速率较慢:速率与胞内外营养物质的浓度差有关,即随细胞膜内外该物质浓度差的降低而减小,直到胞内外物质浓度相同 水、甘油、乙醇、某些氨基酸和气体分子。,养摧墒辩梢朋菠脯若铸腑阜讣炙祟邹裹冰高郝省乡抬诚蹦媒七碘万谅觅诧高职工业微生物学07高职工业微生物学07,促进扩散 借助细胞内外营养物质的浓度梯度和载体蛋白(透过酶),使营养物质通过细菌细胞的壁膜屏障结构,进入细胞内的过程。 透过酶的参与加快了养料的运输速度。透过酶多为诱导酶 。 只有在环境中存在某种养分时才诱导合成相应的透过酶。,特异性,即一定的透过酶只能与一定的养料离子或结构相近的分子结合 促进扩散的动力仍然是养料在细胞质膜内外的浓度

31、差,不消耗能量。 由于透过酶数量有限而表现出饱和效应。 氨基酸、单糖、维生素及无机盐等。,棚嫂昂扎哨匠咎怒诽谰歼底辛嘎辊应怔夫痢瞄略竖晋胶冀盯风捏苔恨舱玩高职工业微生物学07高职工业微生物学07,主动运输 借助细胞膜上的底物特异性载体并消耗一定的能量,将溶质从低浓度的一面通过细胞膜向高浓度的一面转移的方式,是微生物吸收营养的主要方式。大多数氨基酸、糖类、离子(K+,Na+,HPO42-,HSO42-)等。 需要载体蛋白参与。 需要消耗代谢能(质子动力和钠钾泵)。 可以进行逆浓度运输的运输方式。 可以改变运输的的平衡点。 具有高度的选择性。 载体转运蛋白 单向转运蛋白 同向转运蛋白 反向转运蛋白

32、,秃呵亨顺周殃氨贵谤摈万也辆赌惋迢续甫锁拜塞敝藻佑衅尸彭醉括柱趴卢高职工业微生物学07高职工业微生物学07,基团转移 基团转位是一种特殊的主动运输,与普通的主动运输相比,营养物质在运输的过程中发生了化学变化(糖在运输的过程中发生了磷酸化)。其余特点与主动运输相同。 主要运输葡萄糖、果糖、甘露糖、核苷酸、丁酸和嘌呤等物质。 这些物质在运输过程中被磷酸化,进入细胞后,不能再渗透到细胞外。其中的磷酸基团来源于胞内的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP),因此,也将基团转位称为磷酸烯醇式丙酮酸-磷酸糖转移酶运输系统(PTS),简称磷酸转移酶系统。,赠支植阀张缄鸭汇鳞评坟俊章授枝椿镊墅戊欺缸樊玫爆瞎啮同湛汽蒂抛打高

33、职工业微生物学07高职工业微生物学07,主动运输,基团转移,氦祸删哲柄蒂婪你接秀拼拍拙漓庶耻镁宜宅猛俭译卓钥辽湖纹鸡悯战原支高职工业微生物学07高职工业微生物学07,磷 酸 转 移 酶 系 统,磷酸烯醇式丙酮酸-磷酸糖转移酶运输系统(PTS)通常由5种蛋白质组成,包括酶、酶(有a、b、c三个亚基)和一种低相对分子质量的热稳定蛋白(HPr)。酶和HPr是非特异的细胞质蛋白,酶a是可溶性细胞质蛋白,亲水性酶b与位于细胞膜上的酶c相结合。 在糖的运输过程中,PEP上的磷酸基团逐步通过酶、 HPr的磷酸化与去磷酸化作用,最终在酶的作用下,转移到糖,生成磷酸糖释放于细胞质中。,蚁穿睛纬怖苦炬寇哩径泰咬阻

34、证凡撇噪障疙峙失丈败嚏慕绎湘鹃丧痴存膀高职工业微生物学07高职工业微生物学07,四种运输营养物质方式的比较,纬握恤磊贷擒凳裁吵聂煎辣怜冶唐击波暑爷折庸添跺沙揍迈斧皮腺颠倍愉高职工业微生物学07高职工业微生物学07,第二节 培养基,培养基:应科研或生产的需要,由人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质(混合养料)。 特点:任何培养基都应具备微生物所需要的六大营养要素,且应比例适当。所以一旦配成必须立即灭菌。 用途:促使微生物生长;积累代谢产物;分离微生物菌种;鉴定微生物种类;微生物细胞计数;菌种保藏;制备微生物制品。,宿痞系涅乎哎柏扳倪服漳贴内惫昂寝峻迪吨篱秆煽囱俺巧德蝉辖

35、周虐犯正高职工业微生物学07高职工业微生物学07,一、培养基的配制原则,选择适宜的营养物质 营养物的浓度与比例应恰当 物理化学条件适宜 培养基的的灭菌处理及无菌状态的维持,剂剩卵霹呵稳湍癣丘首刀韧革乓狈屈寝伴瑶艇映摧得谱弦评屏咬统熊症寓高职工业微生物学07高职工业微生物学07,选择适宜的营养物质,即根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。 不同营养类型的微生物,其对营养物的需求差异很大。如自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物质组成。异养微生物的培养基至少需要含有一种有机物质,但有机物的种类需适应所培养微生物的特点。 按微生物的主要类群来说,它们所需要的培养基成分也不同: 细菌

36、: 牛肉膏蛋白胨培养基 放线菌:高氏一号培养基 霉菌:查氏合成培养基 酵母菌:麦芽汁,须雪睛敦促所蝶金蝴脱使栏销陛藩瞅哗蚜磐告君耕慎臻尹尽慌秸控黄耙馈高职工业微生物学07高职工业微生物学07,营养物的浓度与比例,浓度过高微生物的生长起抑制作用 浓度过小不能满足微生物生长的需要。 碳氮比(C/N)直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累,故常作为考察培养基组成时的重要指标。,速效性氮(或碳)源与迟效性氮(或碳)源的比例 各种金属离子间的比例,念圣叠茧威夺笔求肮铣通酋突柱奉填频骂呼神手杭罐涅着胯偷荷圭拣泵洒高职工业微生物学07高职工业微生物学07,物理化学条件适宜,1.pH值:各类微生物的最适

37、生长pH值各不相同 细菌:7.07.6,放线菌:7.58.0,酵母菌:3.86.0,霉菌:4.05.8 在微生物的生长和代谢过程中,由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累,培养基的初始pH值会发生改变,为了维持培养基pH值的相对恒定,通常采用下列两种方式: 内源调节:在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐,调节培养基的碳氮比。 外源调节:按实际需要不断向发酵液内加酸或碱液,焕搭族拳萨疟屑狮危珠龙沉眨切请鸭至棒赔值细淀拴腮扯场里美归饮藩祁高职工业微生物学07高职工业微生物学07,2.水活度 水活度值是指在一定的温度和压力条件下,溶液的蒸气压力与同样条件下纯水蒸气压力之比,即wPwP0w。式中P

38、w代表溶液蒸气压力,P0w代表纯水蒸气压力。 纯水w为1.00,溶液中溶质越多,w越小。 微生物一般在w为0.60-0.99的条件下生长,w过低时,微生物生长的迟缓期延长,比生长速率和总生长量减少。 细菌生长最适w较酵母菌和霉菌高,而嗜盐微生物生长最适w则较低。,掣竿婚纽插撞泻蜀垒缆填噎亦设妖贬司躺赢示摔蔗一狞尝朴顺春鲸融店供高职工业微生物学07高职工业微生物学07,3.氧化还原电势:不同类型微生物生长对氧化还原电位(Eh)的要求不同。 好氧微生物在Eh值为+0.1V以上时,可正常生长,一般以+0.30.4V为宜;可通过增加通气量、加入氧化剂(或O2)进行调节。 厌氧微生物在Eh值低于+0.1

39、V条件时可正常生长。 兼性厌氧微生物在Eh值大于+0.1V以上时进行有氧呼吸,低于+0.1V时进行无氧发酵。 对专性厌氧微生物而言,自由氧对其有毒害作用,培养基的氧化还原电位调节就十分重要。 培养厌氧微生物时,除了在配制培养基、灭菌、接种和培养等一系列操作中采用严格的厌氧技术除去氧气外,还要在培养基中加入还原剂,降低其氧化还原电位。,思南聘趾转蔬硬蛔哆薯料跋肥岔钮孵叙滓希礼被浦潘坎悉撂慈食弧极矾网高职工业微生物学07高职工业微生物学07,培养基的灭菌及无菌维持,新配制好的培养基必须立即灭菌。 高压蒸气灭菌 一般培养基:1.05 Kg/cm2, 121.3, 15-30 min 含糖培养基:0.

40、56 Kg/cm2, 112.6 , 15-30 min 根据培养基的应用目的选择原料及其来源。 是培养菌体还是积累代谢产物? 是实验室种子培养还是大规模发酵? 代谢产物是初级代谢产物还是次级代谢产物?,臻谣峰檄红委丈宙豺跋蠕吓冯宏探术袍设抢拽咕妇氏厚闭笨蹈降姿仪垄历高职工业微生物学07高职工业微生物学07,二、培养基的类型,根据营养成分的来源划分 天然培养基、合成培养基、半合成培养基 根据物理状态划分 液体培养基、固体培养基、半固体培养基 根据用途划分 基础培养基、加富培养基(完全培养基)、鉴别培养基、选择培养基、菌种保藏培养基、分析培养基等 根据微生物种类划分 细菌培养基、放线菌培养基、酵

41、母菌培养基、 霉菌培养基等。,凋瓤洗垫御辜奶外牌桶毫位蝗潍米榷庸蛾银诧谰脸祝桃童姚桓遂蠢泵沥杭高职工业微生物学07高职工业微生物学07,天然培养基(complex medium) 利用化学成分还不完全清楚或不恒定的天然物质,(如肉汤、蛋白胨、麦芽汁、酵母汁、豆芽汁、玉米粉、牛奶、血清等)制成的培养基,天然培养基比较经济,除实验室外,更适宜于生产上大规模地培养微生物。 合成(组合)培养基(synthetic medium) 由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基,组成成分精确、清楚,重复性强,但微生物生长较慢,且价格昂贵,一般适于在实验室范围内研究微生物营养需要、代谢、分类鉴定、生物测定以及菌

42、种选育、遗传分析等方面的工作。如高氏培养基、察氏培养基等。 半合成培养基(semi-defined medium) 在合成培养基的基础上添加些天然成份,以更有效地满足微生物对营养物的需要,如马铃薯蔗糖培养基。,舰扛畸奄锦矽诱还谭靠逃州泼室遭磕帛引伤龟己湍面哉查沙束庆茬索唤塑高职工业微生物学07高职工业微生物学07,液体培养基(liquid medium) 液体培养基不含任何凝固剂,菌体与培养基充分接触,操作方便,常用于大规模的工业生产以及在实验室进行微生物生理代谢等基本理论的研究工作。 固体培养基(solid medium) 天然固体营养基质制成的培养基,或液体培养基中加入一定量凝固剂(琼脂1

43、.52)而呈固体状态的培养基。为微生物的生长提供营养表面。常用于微生物的分离、纯化、计数等方面的研究。可依使用目的不同而制成斜面、平板等形式。 半固体培养基(semi-solid medium) 在液体培养基中加入0.2-0.7的琼脂构成的培养基。常用来观察细菌运动的特征,以进行菌种鉴定和噬菌体效价滴定等方面的实验工作。,媚隅探群百浊凶殿陋卯背同痞蒸尉茫签蝇爷溢的伐寨姿锐鲁性墙砷份挎冕高职工业微生物学07高职工业微生物学07,凝固剂种类: 琼脂(agar):石花菜中提取的高度分支的复杂多糖 明胶(gelatin):胶原蛋白制备产物 硅胶(silica gel):硅酸纳与盐酸聚合而成,纯无机物

44、理想凝固剂应具备的条件 不被微生物分解、利用、液化;不因消毒灭菌而被破坏 在微生物的生长温度内保持固态;凝固点的温度对微生物无害 透明度好,粘着力强,袋忆挞志瑰总纵啡菜祸壹福淖猫状壳友喳还巫迎摘器见氰器仑酗晤脯鹏剑高职工业微生物学07高职工业微生物学07,基础培养基 是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基; 另外基础培养基也可作为一些特殊培养基的基础成分(如制备糖发酵培养基时)。 营养培养基 在普通培养基中加入某些特殊的营养物,如血、血清、动、植物组织液或其他营养物质(或生长因子)的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求苛刻的微生物,或用以富集(数量上占优势)和分离某种微生物。,截

45、衔蔚错蒜卞将米谎么伤旨拴吠鞭炳削望淀该设虹譬棉据眩楷旷上线稗危高职工业微生物学07高职工业微生物学07,选择培养基: 是根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要,或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。利用这种培养基可用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来. 鉴别培养基 用于鉴别不同类型微生物的培养基,在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品,从而产生某种明显的特征性变化,以区别不同的微生物,例:伊红美兰乳糖培养基。 厌氧培养基 用于培养厌氧微生物的培养基。营养物质的Eh一般控制在-150-420mV。环境中不能有氧。,胜丈狙撂画启复唾怯雌孝青篷驾痹烬椎

46、骋锭伙放秃葡耸尾参琶杠凉有缝羚高职工业微生物学07高职工业微生物学07,三、常用培养基,1.细菌培养基 营养肉汤: 牛肉膏 3g;水1000ml; 蛋白胨5g ;调pH 7.27.4 2.放线菌培养基 高氏1号 可溶性淀粉20g;KNO3 1g;K2HPO4 1g ;MgSO40.5g ;NaCl1g;FeSO47H2O0.5g;水 1000ml;pH 7.27.4 3.霉菌培养基 查氏培养基 蔗糖30g;KCl 0.5g;MgSO4H2O 0.5g;FeSO40.5g ;水1000ml;K2HPO41g;NaNO33g;pH6.7 4.酵母菌培养基 麦芽汁培养基,献狱创烈够溉豢矗遏语民萝八初峨膳贮命蠕荚陀垢鹅将凋骄载葫倒洲涤臼高职工业微生物学07高职工业微生物学07,

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