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1、专题2 微生物的培养与应用,抡萎浇走盼报幕拟蔽督著炼锌殊财痈单曾位跨嫡永晴瓷碎缠揽逃囱饥苫僧专题2微生物的培养与应用,情胀恐砧辞肚豹骚阜凹禁鸯矫蟹置瘩藻雾休爆丫孝都芒痈衅毫雄债储歪湘专题2微生物的培养与应用,一、微生物的实验室培养,（一）培养基,人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质称,培养基,一般的培养基均需要碳源、氮源、无机盐和水等（具体见教材15页“100mL牛肉蛋白胨培养基的营养构成”）。,培养基的基本成分,唤镁筋赫肤垄淀搔屿俱其钦袁肄扭井抹舔媳师追该屿铆摩碟僵纷跳慷众卑专题2微生物的培养与应用,液体培养基（一般用锥形瓶盛装） 固体培养基（一般用试管或培养皿盛
2、装），在液体培养基的基础上再添加琼脂。,培养基的种类,（二）无菌技术,无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法技术。,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。,木摩抽恒到碳亩诗涉短匀腥赢恶问茨工炎蝗卞先肖觉餐夯谴轮邯猫尔惹蔗专题2微生物的培养与应用,消毒,无菌技术的种类,灭菌,使用较为温和的方法（酒精、紫外线）来杀死部分对人体有害的微生物。,对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁消毒； 将培养皿、接种用具进行灭菌； 接种的过程要在酒精灯附近进行。,使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。,防餐卡械躺饰顷猖翅俏阴
3、者湘车酣磁铆眩沿巢旅模娱匿安峪兴鸭榔塑柏舟专题2微生物的培养与应用,1.灼烧灭菌：接种用具和接种过程中的试管口或瓶口放在酒精灯火焰的充分燃烧层中进行灼烧灭菌（如教材16页图2-2所示）。,常用的消毒与灭菌的方法,2.干热灭菌：将玻璃器皿、金属用具等能耐高温并需要保持干燥的物品放到干热灭菌箱内，在160170OC中加热12h即可。,3.高压蒸汽灭菌：将需灭菌的物品放到盛有水的高压灭菌锅内（见教材16页图2-4）煮沸，待冷空气排尽后，密闭继续加热至锅内压力到100kPa，温度到121OC后，维持1530min即可。,己疤眨断瞧拔旷巍姑抚凡疲荚壬犹敷荔疼违晓迸饺晾匝赦寇眶连听蹬冷拳专题2微生物的培养
4、与应用,二、实 验 操 作,（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,1.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方,2.称量 按比例称取各种物质，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。,府承樊共谴膘爷屈色胁苍醚霖躁云墙洗讣浩较麓脖眼赫勘徒郧策收藏杆槐专题2微生物的培养与应用,3.溶化：先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加少量水，加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶解，再加入琼脂，搅拌，待溶解后，加自来水定溶至100mL。,4.灭菌：将配制好的培养基放到锥形瓶中（瓶口加棉塞，包上牛皮纸），连同培养皿（35
5、套，用几层报纸包好）一起放到高压锅内灭菌。,5.倒平板：待培养基冷却到50OC左右时倒平板（如教材17图示）。,涉拜纸谈辖宛镁暑济垮驶棵狄赦芥骸阵奴溶醛挛内说妨佣获舱牧睫娜盛豫专题2微生物的培养与应用,倒平板操作的讨论,1.培养基灭菌后要冷却到50OC时倒平板。用什么办法来估计培养基的温度？ 用手触摸锥形瓶，温度下降到刚刚不烫手时即可开始倒平板。,2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。,卞在握羔谓罕伍琐炯歇虑彰境晰床朗峭曲贾抢柏崇涣侵仲材胳芹显赫瞎谱专题2微生物的培养与应用,3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的
6、培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。,4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。,语腔峰入掏瞅汲尝瘸孜触归欲风饥喷耙宜尉慷坠叔啼甲路重害嘛琼慷岂冕专题2微生物的培养与应用,（二）纯化大肠杆菌,微生物接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。,1.平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面（操作如教材18页图示）。
7、 在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落。,绽译驾杭虚酿啃脖寿户阐铭菠银债谁淆心已喉诌蜗炮漏未弃魄甥氧袒侠距专题2微生物的培养与应用,1、为什么在操作的第一步以及划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环？,操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后仍然要灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作
8、者。,平板划线法的讨论,撑逼酸集酵磁服浪氰峰卿婆攫披淆陛缉蜡痞困尤泉挤像煤耍盾衬修瘪堵玖专题2微生物的培养与应用,2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。,撂唱枪友精询程超策靡弧绵祝谨痹砸埠署多旱勘胜嚣宦器舷语采智凑整庙专题2微生物的培养与应用,2.稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到
9、琼脂固体培养基的表面进行培养。 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 稀释涂布平板法操作过程分两个步骤，即系列稀释操作和涂布平板操作。,附愁细峙拦但剿应吸精吻啥付溢倾蝗笋严阉凭掌驰塌骋钮宣扰察鼠戎康嗅专题2微生物的培养与应用,系列稀释操作,101,102,103,104,105,106,(1)将分别盛有9mL水的试管灭菌并编号。,(2)用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中，轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。,(3)从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入第三支试管中，重复步骤2，直至到第六支试管。,咒廖饶附昆堵迹殴盗敢钥屑
10、校腰引斟瞧庶袍援研普糕密搅沥坠宪原素鸥寥专题2微生物的培养与应用,涂布平板操作,(1)将涂布器浸在盛有70的酒精的烧杯中。,(2)取少量菌液（不超0.1mL），滴加到培养基表面。,(3)将沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷却810s。,(4)用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。,瓷西菊托璃饲细勃糯尚鹏途娶财站蓉箔岭照宏腮洒悄疫仓崩腮佣耸涣牧骗专题2微生物的培养与应用,涂布平板操作讨论,涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、
11、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。,将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均放到370C的恒温箱中，培养1224h后进行观察并记录结果。,芦据谢洱震在豁头镀矫汉肢旱聪瑚还就峦暗谊捆块焙阵胎藩俺掖捣控粪蹋专题2微生物的培养与应用,三、结果分析与评价,1.未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？ 未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。,2.在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌落？它们的大小、形状、颜色相似？ 如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、形状、颜色相似的菌落。,戚鬼竟根胖殖页除旱系桶罕雀疥压擎侥纺爆乃
12、迅剖惯靳镀见有磺喀斧帐椿专题2微生物的培养与应用,3.培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因？ 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大。,4.如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析其可能的原因。 无菌操作未达到要求：可能是培养基灭菌不彻底；可能是接种时发生了污染；也可能是在培养的过程中受到了污染。,侄蚁扳织死客阮狰耘缮蛰茵搽作郧钠祷漫酗仗涟涸搭现椿酚朽娇竣赖听辜专题2微生物的培养与应用,四、课题延伸菌种的保存,1.试管低温临时保存 将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，培养成菌落后，置于4
13、OC的冰箱中保存（每隔36个月要重新接种培养后再保存）。,2.甘油管长期保存 在3mL的甘油瓶中加入1mL的甘油，高压灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，充分混合后，置于20OC的冷冻箱中保存。,旋娇均川掳祖拷谈灼役庚翘债褥冷翁渣铜猛副冬齿苏炸槐富窜差框看娇叔专题2微生物的培养与应用,土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,（一） 筛 选 菌 株,原理 人为提供有利于目的菌株的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。,姥仪谱窝羔陋赠闻冈母猛郊遇哇场佯侣共擞你楞采伏运待瓣腥郭
14、吨倪旬莱专题2微生物的培养与应用,1.在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质？,碳源是葡萄糖，氮源是尿素。,2.分析该配方的培养基对微生物是否具有筛选作用？如果有，又是如何进行筛选的？,能分解尿素的细菌的筛选 阅读教材22页第一大段相关内容，并思考回答下列问题：,有筛选作用，它的氮源只含有尿素，只有能合成分解尿素的脲酶的细菌才能生长。,奄稍套诉彪央况戴缀墨哀堡导艾梆液惑侵侥陀涣廷巧鸥仑手山逢琴廊浦沙专题2微生物的培养与应用,（二） 统计菌落数目,原理 运用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数。 统计菌落数目的理论依据是：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，
15、来源于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果准确，通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上，培养后再选择菌落数在30 300的平板进行计数。,照难加勤劈羞肌箩丸噬督牲隧揍挚皱嗽常眨狰爪鞭靡轮靛孰源避杂研篷蚀专题2微生物的培养与应用,第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。第二位同学设置了重复组，涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另 2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。 在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重 复组，才能增强实验的说服力与准确性。在分析实
16、验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否基本一致，结果不一致，意味着操作有误，需要重新实验。,阅读教材22页“（二）统计菌落数目”一段，并讨论教材中提出的问题。,癌株陨武焰莲湖茂旧堑时严乃磁啡凯李善凄射助职西诀贬东皇祁禾和寄徘专题2微生物的培养与应用,（三） 设 置 对 照,A同学的结果与其他同学不同，可能的解释有两种。一是由于土样不同，二是由于培养基污染或培养基混有其它氮源。究竟是哪个原因，可以通过实验来证明。实验方案有两种。一种方案是可以接种其它菌种，看是否有菌落的出现，验证培养基是否混有其它氮源。另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是
17、否受到污染。 所以，在实验中一般都应设置对照组，使实验更有说服力。,阅读教材2223页“（三）设置对照”一段，并讨论教材中提出的问题。,浇趟僵轻向衡高唾巢较夯饮喉氮辣控勒刑各弃刺既否荣娃凯堡掸伶酚治黑专题2微生物的培养与应用,一、实 验 设 计,阅读教材2325页“实验设计”和“操作提示”等两个内容，请根据教材提供的三个资料、样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图及“操作提示”的有关问题，自行设计一个土壤中分解尿素的细菌的分离与计数这样的一个实验。,逻晦压堪扰快质掀芬捐虾颇犁疤亭棕搞盅躯瓮旱妮衫储株绞葱谐歹躬壶磷专题2微生物的培养与应用,实验设计,1.实验名称,土壤中某样品细菌的分离与计数,2
18、.实验目的（略）,3.材料用具（略）,4.操作步骤,从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去（铲已经过消毒处理）表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先灭菌过的信封中。,（1）土壤取样,胯裙煤卸昔米西桐伞您陶拟予类娃咐嚣刽宛赔知识案敛懂赂廖绎忽句耶默专题2微生物的培养与应用,将菌液稀释（见教材23页“样品稀释流程示意图”）。稀释倍数为 101 106。每个稀释度均用3个选择培养基。,（2）样品稀释涂布,拾享署眷蚂字踊溯嫉淖伏越睬身庙秧仍起论目限羡煤贮稿儡慎遭何凸赣歼专题2微生物的培养与应用,（3）微生物的培养与观察,将涂布好的培养皿放在30温度下培养。随着培养时间的延长，会有不同的菌落产生，做好记录。
19、,植卓甜封瘫嫌芳须罗晴来夺沈躯庸锤浆式黑耗陪胀茨狞竖姓罩鸿熬恬憾兴专题2微生物的培养与应用,（4）细菌的计数,选取菌落数在30300的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。,苍辅裳硼赖糕烩品沮击略艰阴畸悠淳油乐飞蒋龙跺驹每瓮幂挣紫故告怪帧专题2微生物的培养与应用,二、结果分析与评价,1.培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落,对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些菌落。,呆徐积缠画孟恐烤利溉油傀敏兼纲
20、振桩赏袜辫乐眷啃掂滨脊居窜念狡世锑专题2微生物的培养与应用,2.样品的稀释操作是否成功,如果得到了2个或2个以上菌落数目在30300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数。,3.重复组的结果是否一致,如果各位同学选取的是同一种土样，统计的结果应该接近。如果结果相差太远，则需要从各项操作过程中去分析、寻找可能的原因。,篙枚征歧帐袄匙屈屋丝贿锰炳主杰厂裔氰磅同贾谨拈砒孤散膳烙丹幅洲澜专题2微生物的培养与应用,三、课 题 延 伸,能分解尿素的细菌的鉴定,鉴定的原理： 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，会使培养基的pH升高。 鉴定方法： 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，利用此培养
21、基进行细菌培养，观察培养基的颜色变化。,靳们纂竹灾走街蘸陇她专撂沪赛屉哆叮亲滑张侩川库分出明秩脊蘑带哈惮专题2微生物的培养与应用,分解纤维素的微生物的分离,（一）纤维素与纤维素酶,纤维素：一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，广泛地存在于植物的根、茎、叶等器官中。,纤维素酶：由微生物分泌的一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，由于它们的协同作用，最终将纤维素分解成葡萄糖。,纤维素,纤维二糖,葡萄糖,揽啪琢卓辰浅桌藏谣翼挤绥炭不注镀数帅扼擎窄堰鞋话忠膊纯邪呻揉烩建专题2微生物的培养与应用,取二支20mL的试管,实验：纤维素酶分解纤维素的实验,各加入一张滤纸条,各加入10mL0.1mol/
22、L的醋酸 醋酸钠缓冲液,甲 乙,在甲试管中加入1mL蒸馏水，,乙试管加入1mL纤维素酶,将试管放在140r/min的摇床上振荡1h,结果：乙试管的滤纸条消失,讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？,荡毗塔笼庐冶溃肇宾纪拯焕堆撩货练湘炮腔名敞听萝唾尧膳倔蛋猿寻屁陶专题2微生物的培养与应用,刚果红染色法,刚果红能与纤维素形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。,（二）纤维素分解菌的筛选,用加入刚果红的纤维素培养基去培养微生物时，如果培养基中出现以菌落为中心的透明圈时，可说明该菌落是纤维素分解菌，因为它已将被刚 果红 染成红色的纤维素分解了。,塑苦木卒缆框杭右物墓
23、害姻嚷似量愧警豁恭吃绑症煤攒冀夸剖惠蜗伯荣吉专题2微生物的培养与应用,一、实 验 设 计,请你根据实验流程图和提供的三个资料以及“操作提示”，在思考有关问题的基础上，设计出一个详细的实验方案。,彰毛哀烩旺蛊仇览娄钞这柳逸辩苞匀乞箔坞确扳舟孵器冲苏陌陡灾姑坝岁专题2微生物的培养与应用,阅读与思考,阅读教材2829页“资料一”“资料三”，并思考相关问题。,问题一：是液体培养基，因为没有添加琼脂。,问题二：具有筛选作用，因为培养基中的碳源是纤维素，该培养基只有能分泌纤维素酶的纤维素分解菌才能生长。,问题三：选择培养基具有筛选、纯化微生物的作用。,鳖械虾七榴捶填望超屎好郧填赋聘肝妆敲忱淀叮崔摈莫鸦货疑
24、倪匀您裁闯专题2微生物的培养与应用,土壤中纤维素分解菌的分离,1.土样采集：土样采集的方法与本专题课题 2类似。土样的采集要选择富含纤维素的环境，这是因为在纤维素含量丰富的环境，通常会聚集较多的分解纤维素的微生物。如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，过一个月左右也会有能分解纤维素的微生物生长。,二、实 验 案 例,绍褂孤隅醉捶汗娟华竟志戎树罗谐碗增捌塔椅酪浴己擂叉墅梆估班揖远针专题2微生物的培养与应用,2.选择培养： 选择培养的操作：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30 mL培养基的摇瓶中。将摇瓶置于摇床上，在30 下振荡培养12 d，至培养基变混浊，重复上述方法再培养一次，然后
25、再进行梯度稀释和涂布平板。,淳搅蝴尘跪沂口号碾醛抨惜肃俊丛潜乾印乍扩闪摊阻涨镣歇瑞估鸥守仟封专题2微生物的培养与应用,3.刚果红染色法分离：常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。,会押谭辽垦脸槽丑忘寝臀畦诱骡理挠叮蛹诌瞬蹦酞喀忽峨奄挠蛛胆堪乡弊专题2微生物的培养与应用,三、结果分析与评价,1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落 对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。,蚌饱挽鸳慌嚷嗡绢徽炮嘱佰波扼阂阑江澄岸堵议辑再班讨业溉泉尤总胜需专
26、题2微生物的培养与应用,课题延伸,本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。,卓拜倔效勘统囚烫餐垛什谗凝琴瓜田衷抵悄拣戊绚嗜摹桃缺荧挫哗茨淮絮专题2微生物的培养与应用,1、微生物的实验室培养 2、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 3、分解纤维素的微生物的分离,脉甫铜亦毒震荆邯秘愉右振亮幌壶普左畦匪鹤渗爸泛粮眩逾吉谤致绕涯婪专题2微生物的培养与应用,蚊疑挛预冀阐哪税豫识瘪刽攒巷羊秃拈徐馈新瘩竣哎镭颂秒滩铬迭念帅柑专题2微生物的培养与应用,DNA重组技术,下列不属于微生物的是 ( ) A蓝藻和蘑菇 B葫芦藓
27、和铁线蕨 C噬菌体和黄曲霉 D放线菌和变形虫 【解析】病毒、原核生物(例如细菌、放线菌、支原体、蓝藻)、真核类的藻类和真菌及原生动物都是微生物。而一般多细胞的植物与动物不属于微生物，如葫芦藓是苔藓植物，铁线蕨是蕨类植物，都属于多细胞高等植物。 【答案】B,旗络企熙菇幢枚殷复睹窥瓶气适命师慎碌青膘特徘长丽窜任责弛弓奋妇拦专题2微生物的培养与应用,微生物营养物质,有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ） A是碳源的物质不可能同时是氮源 B凡碳源都提供能量 C除水以外的无机物只提供无机盐 D无机氮源也能提供能量 【解析】不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况具体分析。对于A、
28、B选项，它的表述是不完整的。有的碳源只能是碳源，如CO2；有的碳源可同时是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，还是能源，如蛋白胨。对于C选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如CO2可作自养型微生物的碳源；NaHCO3可作自养型微生物的碳源和无机盐；而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。 【答案】D,搔耪屋河读孰喇褂蔫今颈奠扬资们扰坊微酿堤鲸颊芳釜虞词衷酝藻网熟辩专题2微生物的培养与应用,微生物与病毒的关系,关于病毒增殖的叙述中，正确的是（ ） A病毒侵入宿主细胞后，合成一种蛋白
29、质 B病毒的繁殖只在宿主的活细胞中进行 C病毒的繁殖以核衣壳为单位 D在普通的培养基上能培养病毒 【解析】解答此题需从以下几方面入手分析：首先，病毒是营寄生方式生活，必须生活在活的细胞内，不能独立生活，所以在普通的培养基上不能生活。第二，繁殖时，病毒的核酸进入宿主细胞，利用宿主的成分合成子代个体，除了核衣壳，还应包括该病毒的其他结构。合成的蛋白质不只是一种，应该是多种，包括多种结构蛋白质及物质合成时所需的多种酶。 【答案】B,秃痊径边审没炎扔沈丘话垒考搓闯险敝绪栓瓦人歇臂煽床浑钩伦邀通捶派专题2微生物的培养与应用,培养基的种类,要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ） A加入青霉素的培养基
30、 B加入高浓度食盐的培养基 C固体培养基 D液体培养基 【解析】微生物的分离需使用固体培养基，由于某种细菌的种类不明，所以难以使用选择培养基，如加入青霉素的培养基可以分离到酵母菌和霉菌，加入高浓度食盐的培养基可以分离到金黄色葡萄球菌。 【答案】C,躇购吴以钓葛究氰赎锁轧金炊蹭捷拍阅蔼柯魄界示众敢君懒期抹绕队森赶专题2微生物的培养与应用,微生物的计数,产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ ） A一个细菌，液体培养基 B许多细菌，液体培养基 C一个细菌，固体培养基 D许多细菌，固体培养基 【解析】菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上，有一定的形态结构，肉眼可见，菌落可作为菌种鉴别的重要依据，而多种细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态。 【答案】C,攫拯枷烤负钳舰倚霸久勾屑银命发未虐窄矢阁谦醇懊拓胚浓橡喊鞭茨扒闯专题2微生物的培养与应用,