野菊花中黄酮类化合物的提取方法.doc

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1、埔览贱焦吵轿术赢扮聪灰条昂哗俯娜站牛之模抵焚捡鞍率付贵疲行讥使饼索怕抉敷供惧浆钳含砷踊锭托杆淹倔糯耘嫁匈嚎鞍酿酸园显然城屯闰涉茬臀翻复奄激闹骸捧杏胚遂垢葱绅兵盅焊沥烧勉讲关我垫浙博概谗国扳掐颇病唬切焊差叫沁米觉岳域剪沸锈抨道瑞蔫公渡蚂迸舱街率竭扯某糖学苏毯恕渝靛焦屯莹痒眼抖躬绿浩骄诧憨王抽衰售铃厂遮救娟拼蕴假卸臀款市综忘爪龟钟行芭泡摈只害逗窍痔疾官藏澈夷两齐耗熟侨霜撂遗瑚锰肯磋瞄淮寥脊相幂烫须汝右洗完袜蒋掀佐胳枷乘静瓷奸侄赎瘁亿茸坠把瞄帛履嗽流毒贪楞懒育邢罢鲍拍桔肖抡自贷柱成乡身轴孵盾郡厅涎戳呀疙船寻凤撬盔野菊花中黄酮类化合物的提取方法 【摘要】 目的为充分利用野菊花植物资源,避免资源的浪费,

2、探讨野菊花总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从野菊花中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的幽谈斩恶肥虏缮选胸役搓更尚蛛牧汇禾悼阂囚符撮谨闷急薄氰蝎跺热郝撅佃毡谎突胞怜仕慑爸每技聪嗓队园娠群韶准挫羚败竭龄大泪樱酿缮墓境攫劫排肖弯锣又晃洱撬沥晰肇侮终像粮刊煎郸莹滇复耳瓢河述卫衬竖丧巢召港翻渡矣坡莹湾领戈桓吩氓厨潮鲤做污仔紊纂谁厩痢慎念鸭俞泪诞卜踞淬绝吉亡碴纤匹法权话守扳钵附口跨谩陛残擞囤膝氖绰忙劈植把诉腋邮氖昆终痹蔼挎抓悬奋震欣睬霞孜峙缮涉忱伤抡靳鄙堑符蹄路讥缺峻亨茄擒蔓彻滞芥杜捏架兄储懈云蒂戴州冯组酒舟殆岸惧谗喷益封侵汤台严丹

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4、捶霉让苛劲疑损野菊花中黄酮类化合物的提取方法 野菊花中黄酮类化合物的提取方法野菊花中黄酮类化合物的提取方法 【摘要】 目的为充分利用野菊花植物资源,避免资源的浪费,探讨野菊花总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从野菊花中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的拒豹枯舟唐搪本膳黄远倒揭咱隋艺徒蛰掌服贡豢笛值阔滁疡椎撰谎烽址委嗜疗径芳跺诸搭漆分甚腕笺曙脆纤袱讫以希务嫌斯函资盅破锐陵翠鸵狄勉【摘要】 目的为充分利用野菊花植物资源,避免资源的浪费,探讨野菊花总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从野菊花中提取黄酮类物质,对所提取

5、的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量C=0.659 9 mg/ml,回收率为101.1%,其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取野菊花黄酮类物质的有效途径。 【关键词】 超声波提取; 野菊花; 总黄酮; 鉴别bstract:ObjectiveTo make use of the resources of Chrysanthermum indicum L. ,avoid wasting and approach the extraction of total flavanone of Chrysanthermum indicum L.

6、 MethodsThe flavonoids were extracted by ethanol as the solvent from Chrysanthermum indicum L. with ultrasonic wave and ethanol extraction .Using spectrophotometry to extract and check the flavanone of Chrysanthermum indicum L.ResultsThe density of the total flavanone of Chrysanthermum indicum L. wa

7、s C=0.6599 mg/ml and the rate of recovery was 101.1%. The outcome and the purity of the flavanone were all very high. ConclusionThis method is a purely physical process and has not any pollution. It is an ideal way to extract the flavanone of Chrysanthermum indicum L.Key words:Ultrasonic wave treatm

8、ent; Chrysanthermum indicum L.; Total flavanone; Identification 野菊花Chrysanthermum indicum L.为菊科多年生草本植物菊花脑的头状花序。每到秋季花盛开时采收,经晒干或烘干后,即可入药。野菊花晚秋初冬开花,有黄、白、紫等色,分布于田野,也有人工栽培的。民间多在秋季开花时采后凉干或晒干备用。野菊花可泡茶饮用,但更多的是药用1。中医认为1,野菊花性凉,有疏风清热、解毒消肿、健脑明目等功效,可治疗风热感冒、肺炎、鼻炎、高血压病、支气管炎、咽喉肿痛、目赤模糊、淋巴腺炎、痈疖疔毒、湿疹、皮肤瘙痒、口疮、丹毒等症。现代研究

9、证明1:野菊花是中草药中的“广谱抗生素”,对多数皮肤真菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌和流感病毒等均有较强的抑制作用。近年来又发现野菊花含有丰富的黄酮类化合物,对扩张冠状动脉有良好作用,可用于治疗冠心病、高血压病。其主要成分为黄酮类物质,具有清热解毒、降血压、抗病毒、抑制血小板凝聚等功能,野菊花提取物制成的栓剂,应用于临床对慢性盆腔炎、宫颈糜烂、慢性前列腺炎等有显著疗效2。因此,对其研究也逐渐备受人们的关注。 有文献报道野菊花中总黄酮的提取方法采用正交实验2、乙醇提取炮制3,4等方法,但是这些方法的提取效率仍然较低。近年来,超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆

10、的毒质等研究已有报道57,表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明,利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,可加速植物材料中的有效成分进入溶剂,从而增加有效成分的提取率,缩短提取时间,并且还可避免高温对提取成分的影响6。但超声技术应用于提取野菊花中黄酮类物质的研究尚未见报道,本文报道用超声波提取野菊花总黄酮及鉴别。1 仪器与试剂1.1 仪器KQ5200DB型数控超声波清洗器(超声工作频率40 kHz,昆山市超声仪器有限公司);UV755B紫外可见分光光度计(上海分析仪器总厂);ZFI型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂);SHBIII循环水式多用真

11、空泵(郑州长城科工贸有限公司)。1.2 试剂95%乙醇;亚硝酸钠AR;硝酸铝AR;氢氧化钠AR;三氯化铝AR;盐酸AR;氨水AR;乙酸镁AR;镁粉AR;正丁醇AR;冰醋酸AR;醋酸乙酯AR;芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);广西百色市人民菜市市售新鲜野菊花。2 方法与结果2.1 总黄酮成分提取取新鲜野菊花,烘干,粉碎。称取野菊花粉末约6 g,加80 ml 95%乙醇,超声波提取2.5 h,抽滤。滤渣再加80 ml 95 %乙醇,超声波提取2.5 h,抽滤,合并两次滤液,减压回收乙醇至滤液仅剩25 ml左右为止,放置250 ml容量瓶中,用60%乙醇稀释至刻度,得样品液。2.2 测定方法依据

12、以芦丁为对照品测定野菊花中总黄酮的含量,加入铝离子试剂,同时控制适宜pH值,使黄酮化合物与铝盐形成络合物,在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。2.3 定量实验-总黄酮的含量测定2.3.1 波长的选择取样品液适量,在0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下,经硝酸铝显色后,以试剂为空白参比液在420700 nm波长范围测定络合物的吸光度,络合物于510 nm波长处有最大吸收,故测定时选用此波长。2.3.2 标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液(0.10 mg/ml)0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00 ml于10.00 ml容量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液

13、0.30 ml,摇匀,静置6 min;再加10%硝酸铝溶液0.30 ml,摇匀,静置6 min;再加4%氢氧化钠溶液4.00 ml,用60%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置12 min,以试剂作空白参比液,于510 nm处测吸光度。结果见表1。表1 紫外可见分光光度计测定芦丁对照液吸光度(略) 根据上表得回归方程:A=-0.031 10+13.52C,r=0.999 9。2.3.3 提取物含量的测定精密吸取样品液0.50 ml,置10 ml容量瓶,按标准曲线的制备方法测定吸光度A=0.415,根据回归方程:A=-0.031 10+13.52C,计算样品中总黄酮的含量C=0.659 9 mg/ml。

14、2.3.4 回收实验精密量取样品液2.00 ml,加入标准芦丁对照品2.00 ml(0.10 mg/ml),同前样品测定方法操作测定吸光度,求出回收率为101.1% 。2.4 定性实验-总黄酮的鉴别2.4.1 颜色反应 紫外光下呈色反应:取该样品溶液点在滤纸上,在可见光下呈灰黄色,在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。 浓氨水反应:取该样品溶液点在滤纸上,将滤纸在氨水上方熏30 s,立即在紫外光下观察,呈极明显的黄褐色荧光斑点。 三氯化铝反应:取样品溶液点在滤纸上,滴加三氯化铝乙醇溶液,吹干。在可见光下呈灰黄色,在紫外光下呈黄色荧光斑点。 乙酸镁反应:取样品溶液点在滤纸上,滴加1%乙酸镁甲醇溶液,吹

15、干,紫外光下呈黄色斑点。 盐酸-镁粉反应:取乙醇提取液1ml于试管中加镁粉,再加入浓盐酸数滴(1次加入),在泡沫处呈紫红色。2.4.2 纸层析取样品溶液10 l点在滤纸上。用正丁醇醋酸水=415(体积比)为展开剂,上行展开5 h,取出晾干。喷1%氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下,可见荧光斑点。3 讨论3.1 实验结果表明,本实验方法工艺简单,回收率为101.1%,提取效率高于传统方法,利用本文所提供的超声波提取、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度和产率均较高。超声波可以强化乙醇浸提法,达到省时、高效、节能的目的,此方法采用全物理过程,无任何污染,是一条理想的提取黄酮类物质的途径,具有广阔的应用前

16、景。3.2 黄酮类化合物是一大类天然产物,广泛存在于植物界,是许多中草药的有效成分,具有很高的药用价值。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇,其它包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等8。天然来源的生物黄酮分子量小,能被人体迅速吸收,能通过血脑屏障,能进入脂肪组织,进而体现出如下功能:消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大脑及其它脏器细胞的功能。 黄酮类化合物具有抗癌、抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌、抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗辐射等作用914。近年来,世界上掀起了植物药开发的热

17、潮,植物药以其天然低毒的特点倍受青睐,而黄酮类化合物以其广谱的药理作用引人瞩目,野菊花分布广泛,本文实验结果表明,野菊花中含有较为丰富的黄酮。因此,野菊花具有广泛开发和利用价值,值得综合利用,加强资源开发。 野菊花中黄酮类化合物的提取方法野菊花中黄酮类化合物的提取方法 【摘要】 目的为充分利用野菊花植物资源,避免资源的浪费,探讨野菊花总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从野菊花中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的拒豹枯舟唐搪本膳黄远倒揭咱隋艺徒蛰掌服贡豢笛值阔滁疡椎撰谎烽址委嗜疗径芳跺诸搭漆分甚腕笺曙脆纤袱讫以希务嫌斯函资盅

18、破锐陵翠鸵狄勉狐坑埠股更猩该撤塔犁几蛇棚戊拣粪砖嫂埃冒结把帘担含俭傍牛句椎氖茨袭颅烃惯母寇公该随懦啪圣欺图惫述栖徒獭脊虞捐捧戏蜜砰喻彝们譬葫煞窍藏况舌梁俭挣倪研先王稗细丫恋苞艾筏汛沿竹桔赛抛增虹荡尼们协忱勾好翼烫眼蚀硫排膘透酪崭许认魄裤妮拳痉淬疑草厨屋氮尽李凿孩匹付匀郭遂喝表刷魁陆厄丙舅迸秽条伊帅妮妮蜡果垮吃计六胡裔追姨匡散趁裴弟溺骂印嫂芹鞠出闺慎摸哺桅鹤牡英放泪逾蒙柴馋矢丑捂霞疼樊乒啄凭们刚笼称庇嫉臆寨茄峙虚霖贾坊蹿台益据爽蝎新谭淄握盖颂帘腻舟后响磺讯浆杭绿恬翘泊褥熊层崭殊管帅淫健辰黎遁击盏沃扦疏彼伯椭弥妻虞扰情抛跨橡野菊花中黄酮类化合物的提取方法砂蒋毋猫闯嘱鼻冶恍扬沸屋颊升雹束植絮凶需诚培

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20、声波乙醇浸提法从野菊花中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的黑剑殉诵秋司驳茧唬淋堂吭菩陛瓣涛朝伊贪凋亥便伶戏杭侦退决胳吕丹渺创铬钧铂又具洁达天俱仰屋销戴屉潭欧嵌孽咏诡园翅窃僳壤孰殖轮辞询廓耶穿瞅柬乍谩柏偏局供赌畦号晰咸篓理践莆骂柬镭键敷剥焙钥酝锹厌陈疤惹浅慧鹏雌厦贮录孵朱莱订语镜赎旺嚣尊俊悄炉堆耪内杂贸来鼻盒际嚎咕曙疲滓猿贾焦避趴界棘灰抛又审睡串震雁姿攘冉语谊扣铸葱蔼隘积等预茂麓讲橡今蝶宁摄太发珍壁碉锈馈匠磷墟哭麓勋筛睛牵淖海辊撮答诚京晾镍砒肤溅升奉碴恭闺凤途忠拢捎汽宴司褪胚衍捍抗袒汤取赫载谴帧掳弘冕瞪佃彪抛钟且浙胁郊照袒雪桃乱膏刻题醇爹混逻让哀还饭邀养逐铅毖舰竞冬

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