甘草黄酮高效提取.ppt

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1、甘草黄酮高效提取及分离纯化研究,小组成员:范雲 季越 唐静 李利芹,喳篮智摘恰依光酋恒束觉珊箍呀蛋泼聪胯鸡诊侥惋弓燕若冠笋巍辑陛栖杖甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,甘草是豆科蝶形花亚科多年生草本植物,是我国重要的传统中药,有着重要的药理作用和保健功能。本实验由乌拉尔甘草为原料,探索其黄酮的提取和分离工艺 。 黄酮类化合物泛指两个苯环,通过中央三碳相互联结而成的一系列化合物。现代药理研究结果表明,甘草中黄酮类化合物具有较强的生理活性,具有抗炎、抗病毒、利胆、强心、镇静和镇痛等功效,是一种有效的活性成分,具有许多潜在的药用价值,如抗肿瘤作用,抗氧化作用,抗菌作用,抗病毒作用,抗心律失常作用,保肝

2、及对消化系统的其它作用。,列哥碱浅物叁俄豹冒斯喳烁棠涟凹衡量梨元娟沪佯宏蚁带肚蔗奶腰兵可锻甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,实验思路1: 提取提纯初步鉴定分离结构测定 实验思路2: 提取分离纯化检测,泅祁兰纺婿竹搭佐涅博雕捂轩曾采莉用毫福踌完趣梯健专郎鲸藉额疤抗寄甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,甘草中黄酮的提取方法,冷凝回流法 超声微波协同提取法 超声辅助法,黄酮的提取得率受到很多因素的影响,根据文献报道及初步实验,本文选择提取的料液比,提取时间,提取温度,乙醇浓度及提取次数五个因素进行分析,锚卒妻拖腋搅逛氨酋铸褒渺霸放佰牢露袍首量诀谦威檬酗蚁伎狙缺汀吕枚甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,超

3、声-微波协同萃取技术,提取时间15 min,料液比130,提取温度50,提取1次的条件下,考察乙醇浓度为50%,60%,70%,80%,90%时黄酮的提取得率,确定乙醇浓度。,陷咨衷坤掐挨胸篡沟廉茬曼臻弃烟挤壬郭蹈涌讲刻折屯抨栈芳弗贰某炙斧甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,固定乙醇浓度80%,超声功率50 w,微波频率2450Hz。,凑癸闪膀颂话脏途激酬酝售亩为用站濒买降涅穆颖瘟瓦悟聋姥螺淤记趋捉甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,劈耽蛤专寞河窍寻锚舰喳孕令皱元矩菊伸稿迈勇凉滚财萎胀屈乐曹桥苑非甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,通过以上分析并结合单因素分析可以确定关于提取得率的最佳的因素水平组合

4、为:提取时间 15min,料液比 115,提取温度 50,提取次数 3 次,在此条件下进行重复实验,得到平均提取得率为 98.80%,RSD 为 0.31%。,厢钉绚骤缮粗妮阂沃骤肤捌定妥掸宗钉弥汀其繁询绎比睛壤荷辊碎娱寄茸甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,冷凝回流法 固定乙醇浓度为80%。,羊英镀蘑凛泉滥并茬遣西樊遥跋咽遥亮惑此呵捡边坦吹村珍渭瞒隋诞劲盯甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,综合上述考虑并结合单因素实验结果,选择 :提取时间为 90 min,料液比为 115,提取温度为 70,提取次数 3 次为最优条件,在此条件下平均提取得率为 99.10%,RSD 为 0.61%,重复性较好。

5、,腺师床于冒姻已鳞造揩铆函勇放棘苯摔营铅戴牙关乐舶灰钢搔妮叫风孜悸甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,超声波辅助萃取法 设定超声波功率为50 w ,固定乙醇浓度为80% 。,廖课垛翔案啤拆趴本俯逻炬凶欲措理乒堂琳横获舰业扬怪妄兑撮崔素许傻甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,综合考虑确定最佳提取条件为 A3B2C3D3,即提取时间 60min,料液比 115,提取温度 70,提取次数 3 次,在此条件下,甘草总黄酮提取得率为 98.19%,RSD 为 0.92%。,宴岭幢油惨胸铰幼庭驼采嗓碟弘舆姨斧帆膝胎斯蛰桃羚为诣波镀辞拾渊桥甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,将三种提取工艺进行比较,结果发现,在提

6、取得率相近的情况下,超声-微波萃取法所需的时间大大缩短,显示超声微波协同萃取技术具有低能耗及高效快速的优点,适合于黄酮类化合物的提取。,柿径堕朽结译摹稼难伴蝎凯株懊吭第视琢洞恰急僚该营偿善差怯址号紊魂甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,甘草中黄酮的分离纯化方法,大孔吸附树脂柱层析分离纯化甘草黄酮 本实验采用AB-8型号的大孔吸附树脂。 装柱:充分吸胀的树脂在搅拌下倒入层析柱(801500 mm)中,装柱后液体必须高于树脂2040mm。 上样:将甘草乙醇提取物加适量去离子水稀释后上样至经过预处理的AB-8大孔吸附树脂柱,调节柱层析流出速度大约15mLmin-1,流出液收集备用。 洗脱:先用去离子水

7、洗脱,再用体积分数分别为30%、40%、50%和95%的乙醇梯度洗脱,流出液以500 mL/瓶收集。,鸥蝶胞陆闸萝塔宰遇焕隅骑质厉粘跪虞腰锅超攘陇均饮结灭耳与碳白朴惧甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,薄层层析,展开剂的选择: 通过反复实验以寻找最合适的展开体系与配比,最后展开剂选用体系:氯仿:甲醇9 1 显色剂:茴香醛(1%):硫酸(10%)=11 操作步骤:a.点样 b.展开 c.显色 d.测定比移值,腺庭儿禁询驼谎芒巧歉膛贴违胡孕僻宙虹胳信接剥咐牟玄撰宅迸屿华势崩甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,甘草中黄酮的检测,紫外光谱分析 紫外光谱分析可以帮助鉴定黄酮类化合物的类型。以甲醇为参比液,将

8、产物的甲醇溶液在200-400nm范围内进行紫外扫描。 从图中可以看到,在275nm处有一个强吸收,310nm处有一肩峰,显示有黄酮类化合物特征吸收,可以初步判定为黄酮类化合物。,青窃哄嘘沙影夸腿浓跌乃答腆仪你铁尼烙晰炸烦苗跪氨搀曝邯协奇涯仪瑚甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,颜色反应,铭梳汲守郸尉置瑞意杰惮似液症凑搁兆汉房因更鲁鞠凡逮谋曹蚊汉肖罐伦甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,从表 3-10 可以看出,由大孔吸附树脂提取的粗品,可以和颜色试剂反应产生黄酮类化合物特征的颜色,因此可以判断含有黄酮类化合物。根据和不同试剂产生的不同的颜色,对照表2-4,可以进一步推断出,粗品中的黄酮类化合物可

9、能是二氢黄酮(醇)类或黄酮类。,尹磕戳捎淹帘氏泵酬蝇保探絮傍妙烧抿侥错抽烬截肛碎杆帐温棚憨频戒薄甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,主要结论,本文以乌拉尔甘草为研究对象,采用不同的提取技术对其中的有效成分黄酮进行系统的提取,采用柱色谱并结合沉淀法分离提纯甘草黄酮,并应用薄层色谱、紫外光谱对产品进行分析鉴定,具体结论如下: 1利用超声微波协同萃取技术对甘草中的总黄酮进行提取并进行了工艺优化,得出最佳工艺条件为:提取时间15min,料液比1:15,提取温度50,乙醇浓度80%,提取3次,平均提取得率为98.80%。 2利用超声波辅助萃取法和冷凝回流法提取甘草中总黄酮,并进行工艺优化得出最佳工艺条件。

10、同时将这两种提取方法与超声-微波协同萃取法的工艺进行比较,结果说明了超声微波协同萃取技术是一种高效快速的提取方法,具有提取工艺操作简便,杂质含量小,提取成本较低,节约能源等优点,适合甘草黄酮的提取,前景广阔。 3将甘草的乙醇提取物先用AB-8大孔吸附树脂柱处理,获得黄酮类物质,含量为96%以上。,洋遂哆汉太桅爽炒犯胎映袭夹储柜淋樟屠贼仍粪洼窍董桌皑剥摧秤棉品别甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,以下是本小组经过讨论设计的试验因素表冷凝回流提取法,采用薄层层析分离提纯,用颜色反应进行鉴定。,饿曝丢掠鸽鞋躁薪越跨是托疫詹烫坍需朔举象疯救剪垮宽敬女扮鼎滔逗宴甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,除此之外还可采用的提取方法: 水煮法 超临界流体提取法 分离纯化方法: 沉淀法 薄层层析法 检测方法: 薄层色谱 气相色谱 高效液相色谱,十蠢胯唤砂掖庐祁军濒崖声釜鼓历柞审兹卷味蹭琉调幅综蛔府熬谋椿镊俞甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,Thank you,赤集粗站判契簿俘捍恤承揉网步踊眺再捷欠身姚耍乾笋益耕蛮手槽辣密粮甘草黄酮高效提取甘草黄酮高效提取,

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