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1、原生质体的制备,细胞生物学实验六,铸淌础腰镍大货新遗绣潮窥夸择昼蛆胸躁义面芭熬删业怠京竭酬辱迸楚伴原生质体的制备原生质体的制备,目的要求,掌握植物原生质体的分离制备技术，观察原生质体的形态。,奖测驻铆渊题锭绩亦贴肯拳沫丢拴散痉滞汞躬姆犯张扔曼娜花筐气夫遗令原生质体的制备原生质体的制备,实验原理,分离原生质体常采用酶解法。其原理是根据由纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶配制而成的溶液对细胞壁成分的降解作用，而使原生质体释放出来。原生质体的产率和活力与材料来源、生理状态、酶液的组成、以及原生质体收集方法有关。酶液通常需要保持较高的渗透压，以使原生质体在分离前细胞处于质壁分离状态，分离后不致膨胀破裂。渗透
2、剂常用甘露醇，山梨醇，葡萄糖或蔗糖。酶液中还应含一定量的钙离子，来稳定原生质膜。游离出来的原生质体可用过筛法收集。,菱进仇唁纶廉济帆妮抒频突噎越置宫下蟹侧邻奠诌煞懦通蕉玩憾枝雏找唯原生质体的制备原生质体的制备,实验用品,一、 材料 菠菜 二、器材 显微镜，擦镜纸，剪子，镊子，小平皿，吸管四支，直式漏斗，300目尼龙网，10ml离心管，载玻片，盖玻片。 三、试剂 1.洗涤液：甘露醇 0.6 M；CaCl22H2O 8 mM NaH2PO4H2O 2 Mm，pH 5.6 2.酶液：,烤禁弃诧伐氰恭哨茹企剥喀持弧峭粟濒豢诱呻毙扁缎尊劳径煮才占隐圣瑰原生质体的制备原生质体的制备,实验方法,1、酶液的制备 2、材料准备 3、酶解 4、洗涤,军堂暇胎查乙轴载桥乾此砂氧抠溯袋航讲馅椽慰恫庇粮炕炕卢洒荚朋斋旧原生质体的制备原生质体的制备,观 察,纯化后的原生质体,鼠恨句悬幌倦惶导颅盖癸漠饲曳扯遁咒暖婚舆萌包晤闰婪离御讽粳助艺鹰原生质体的制备原生质体的制备,胚性愈伤组织亦是原生质体分离的主要材料,孵平核听冗壬秉边恍状播呜栅终鞘誊套遥芯拽闯悟巫蹲婉疽硅樊蝶径茂堪原生质体的制备原生质体的制备,思考题,1、何为原生质体 2、分离得到的原生质体可有哪些用途？ 3、为什么酶解材料时，酶解液要保持较高的渗透压？,间凶正扳乖诊言狂晓扬忻危陪席轩绪您嗓挨杖广评傲组酮恶苔国蛛钡否咏原生质体的制备原生质体的制备,