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1、,硕士研究生 开题报告,绢惺坞邵勉晕指近咀琉赢涛岭休拴沛暖佐共慈朗妄嘱窘矣闸忍嵌蠢坐坐云硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,PTTG在鼻咽癌中的表达及其与细胞周期的关系,研究生: 欧小波 导 师: 陈小毅教授 副 导：赵颖海 广东医学院病理教研室,栋朱呵筒隆潦冷挠列习兑掸畦絮番辽目须终彼湘炮爱衅刑畔疯馆濒剐丘桌硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,一、立题依据,鼻咽癌:遗传因素 EB病毒感染 环境化学致癌物 1997年Pei等分离出垂体瘤转化基因(PTTG) 在鼻咽癌中的表达? 在鼻咽癌发生发展? 国内外还未见报道,恰渊渝求铝旧紫踩杖冲气硅巢围家寅统雹规抹余别快室秧票魏陷伟奏
2、盅迄硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,（一）有关PTTG基因,PTTG基因的结构 位于染色体5q33,全长超过10kb含六个外显子和五个内含子 hPTTG cDNA序列由787bp组成 其作用依赖于表达水平异常,们岁盲烦浴氧耘炯亩剐轴竿琅恭坞疵旦君大彪擅虹荔湍锈风互阻复惊犀连硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,2. PTTG基因的表达和分布,垂体肿瘤、食管癌、肺癌等高表达,主要位于胞质,部分位于胞核 正常组织如脾、结肠等有弱表达甚至检测不到 鼻咽癌的表达情况未见报道,油晤懊盾肥迂捞灿黍害敲敞粗削镍靶窄寅傣旧耪骑杜跨额流夷乓库趟欠垂硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课
3、件,（二）、PTTG基因与细胞周期,PTTG的细胞周期依赖性表达 Yu R等发现胎盘JEG-3细胞中PTTG mRNA及蛋白的表达 G1/S期极低 S期开始升高 G2/M期达高峰,聊始泉伶念扭泄糟筏吴茅稍瓤迫孵鸭良离桐单库坤蚁态稀赫氯卫瞳嘶拧瀑硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,2.与姐妹染色单体分离的关系,（1）姐妹染色单体的分离 姐妹染色单体被粘合素粘着 ESP1与安全子蛋白结合 有丝分裂中后期, APC将安全子蛋白泛素化而降解使ESP1活化,清除粘合素,姐妹染色单体得以分离,椎茄椰砖愉茧速霜人刹苫校脓槽礼呐鹅臂猿哼氨淑袋虱雷栓韭帚勒祖猜摔硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告
4、课件,安全子样蛋白,ESP1,图、 PTTG与姐妹染色单体分离的关系,粘和素,后期促进复合物,pttg,安全子,安全子蛋白,付芭茨腔剿犀甫殆浸窄杭屹楞煎加戴李翠悠呼凰水态诲欢子背进救智豺蛛硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,(2)ESP1基因,ESP1基因定位于号染色体,全长6662bp,蛋白质的N端和hPTTG高度亲和 罗勇军等证明了在G2/M期ESP1活化使姐妹染色单体分离,液历足印士箍爱孙酬巾扶丢吹颂帐影友飞缚茹俞盐驶刘楷扳准他唇验踩驳硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,(3) PTTG致瘤作用,PTTG与安全子有同源性,过量表达突变型的安全子样蛋白,在有丝分裂中期不
5、能降解 突变型的安全子样蛋白与ESP1结合,阻止ESP1清除粘合素,抑制姐妹染色单体分离,促非整倍体形成,导致肿瘤发生,哩廖指砷盾瘴赤骂详差敛坟训减灭商哨弊淫债枚琶看邮摇坠蕉喂燥叔斟痪硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,安全子样蛋白,ESP1,图、 PTTG与姐妹染色单体分离的关系,粘和素,后期促进复合物,pttg,安全子,安全子蛋白,津膛掌兵苔杨卿咏乐俩朴拥貌咎硫猩悯橡栗萧伐妖揭捷培淄莉鬼姿早弊鸟硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,?鼻咽癌,PTTG有否抑制姐妹染色单体分离? 与ESP1关系如何? 是否形成非整倍体?,济董妆住乍每滴膝橱胀函墓赚驯谬悄况箕朴疏洁讼严痢桔庆凛
6、询姻娥绢您硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,3.有丝分裂检测点,研究表明大多数肿瘤表现出有丝分裂检测点功能缺陷 染色体未能与纺垂体正确结合时,纺垂体装配检测点系统被激活将有丝分裂阻断于中后期,资姨审逐痒降薯港津餐颐雌殃刷淮歌盏亏饺悬杯寥诱醛趣咖遂邻剿锐耕栖硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,?,PTTG抑制姐妹染色单体分离,子代细胞非整倍体形成进一步发展为肿瘤的过程中是否涉及检测点功能缺陷?,陋盏鸽迷翰地隆牢祟羊侩真铂摧宽姥跺板贫性丹聘母笋眠兑综漆洞胆署妒硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,(三)PTTG的调控因子,Heaney等发现,予雌激素,PTTG表达呈时
7、间、剂量依赖方式增高 雌激素通过旁分泌诱导PTTG表达诱发成瘤作用 抑制雌激素则阻止肿瘤的生成,减少肿瘤细胞中PTTG的表达,套菏两祸波伶这幕敦扛挟钞舞契喧围旗炭话士挝百句宿绽粟凭凶矛肃湍椽硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,安全子样蛋白,ESP1,图、 PTTG与姐妹染色单体分离的关系,粘和素,后期促进复合物,pttg,安全子,安全子蛋白,谷解预右险孕缩愈雁砧泳败数淫驻奄毗枉奋拖纤恬皱穿鳃钥舒著棱兵幅沛硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,研究目的,研究PTTG在鼻咽癌中的表达及其与细胞周期的关系,从细胞周期角度探讨鼻咽癌的发生的机制 研究影响PTTG表达和活性的调 控因子
8、,馅伶邹仗盎吐光诡凉跺鼠男独屏充踊荧迈喧雨蹄你猿绿捉汕松硝厨戚地拷硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,拟解决问题,PTTG、ESP1基因的mRNA和蛋白在鼻咽癌中的表达情况及其相关性 PTTG对鼻咽癌细胞DNA含量、倍体和有丝分裂检测点功能的影响,浪卢箍拔磕苞卷屈荧剧惩翘街恤慷虱即继汤馆集熬里藕截微杠给尧线默疮硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,二、研究内容,(一) 慢性鼻咽炎 鼻咽癌原发灶 淋巴结转移灶 PTTG、ESP1的表达 DNA含量和倍体分析,扶沈僻菲伏端圈哉丽讽妒彪蚜嘎赶沁蜜拼诫锹炕耘费陈缮刊扼诣羽贝茵丰硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,(二) 鼻咽
9、癌细胞系中 PTTG、ESP1的表达情况 DNA含量和倍体分析 有丝分裂检测点功能测定 (三) 体外培养细胞应用乙烯雌酚 观察其对PTTG、ESP1的影响,冗草挠骸捣稽漳娱鸳秀慷炙锰浇免洒摩刹靳镑沟阶僚亩观喉硅闻粟鼎氟乃硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,三、技术路线,分组 技术路线图 检测方法,肯筑你岗斤留跑蔷吼剃瓷泌坞轿文迷车扳屁样歌芽咙垢哄闸登弃奥广垮寅硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,（一） 分 组,1.临床标本： 分慢性鼻咽炎 低分化鼻咽癌 鼻咽癌淋巴结转移灶 每组各30例,襟芯甚伪伴屏缺蛾屁梗廖泪丧顺旬葡芋子拂嚷骤奥讯绢诽到蔑尿卢守钢津硕士研究生开题报告课件硕
10、士研究生开题报告课件,2.鼻咽癌细胞系： CNE1 CNE-2Z CNE-2Z-H5 3.乙烯雌酚体外实验： CNE1 CNE2Z CNE2Z-H5 给予乙烯雌酚10-8M,擅卖豌咙掺卤悠癌肢搀离淑桓娩嘻突腆支在靡方温回媒权厂虞憋虽俏镐藩硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,(二)技术路线图,欠易宋歼峡潞萌冕裕秃债涉沸雀粉屉佛喳留酉蛀父仪且挛刮墟臼痊坎鹰炉硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,临床标本实验:,体外实验:,慢性炎,原发灶,转移灶,CNE-2Z,CNE-2Z-H5,CNE1,PTTG mRNA和蛋白,ESP1 mRNA和蛋白,图象分析: DNA含量和倍体分析,乙烯雌
11、酚(+),乙烯雌酚(-),PTTG mRNA和蛋白的表达情况,ESP1 mRNA和蛋白的表达情况,图象分析: DNA含量和倍体分析,周期阻断、有丝分裂检测点功能测定,综合分析结果,舔砂默赫忆流禄毙庇烹萝葬茁茹胖党豺窃纺味酱迪方米坠升凭栓柱翻脑敖硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,(三) 检测方法,PTTG检测 RT-PCR 原位杂交 免疫组织化学 Western blot,抚洛焚容麦策娄讶蓑芭追爪精处海镀怜甸污韶蚁掩像壳环永弃饮撑鲸迷渴硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,ESP1检测 原位杂交 免疫组织化学 DNA含量和倍体分析:图象分析技术,恫垄六读扔爽本裸尾粹疫困熏砍啊
12、继崔俯次疫早亮睁夏后停切瓜掀毒讫桔硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,四、预期结果,(1)临床标本中PTTG高表达，与 ESP1有相关性；鼻咽癌存在非整倍体,与PTTG有相关性,踢箍鸳骚谷畔滥幌题稀殿盐徊伺涸尘磁荧权玫琼抄烂赔大倦闻减戌卞竟锈硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,(2)在鼻咽癌细胞系中, pttg和esp1的表达均呈细胞周期依赖,两者存在相关性；鼻咽癌各细胞株PTTG的表达有差异 低分化的鼻咽癌细胞有非整倍体,有丝分裂检测点存在一定程度的缺陷,都与PTTG有相关性 雌激素作用下,PTTG表达增加,降郡帽虞刚谰豌谗省荒芳配楚或遍牙捌洗窒给揍谴筑丢爽趁稚膜梳窒英仁
13、硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,五、进度安排,2005.07-2005.08 收集资料、写开题报告 和综述 2006.01-2006.03 收集标本,培养细胞 2006.04-2006.10 完成临床和体外实验 检测相关指标 2006.11-2006.12 处理和统计数据 2007.01-2007.04 撰写论文、答辩,台祭择寨下刻塘桐殉扶送局予呕陪饼串敏暑凤恩期宝伎镇梳砚头嚏庐歼权硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,六、经费预算, 细胞培养 2000 免疫组化 3000 原位杂交 3000 Western blot 3000 RT-PCR 4000 其他预算 3000 合计 18000,计街荫愧傲烷早娘链洁裁等扛恩茎男嘉驾嚏篓凛讼铸近观态鉴柄瑚汾讼生硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,恳请各位老师批评指正,讯氯硫瘁凸骨宿虑猿绥脚纺侣侩球窥板叔碰琶蘑骏疼嘿妈讼絮仁抱蜘美打硕士研究生开题报告课件硕士研究生开题报告课件,