《实验5细菌培养基的制作.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验5细菌培养基的制作.ppt（16页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、 （一）实验目的要求 l1、掌握培养基的制作程序； l2、熟悉常用培养基的种类及用途； l3、掌握培养基的消毒灭菌技术。 （二）培养基的成分、种类和用途 l1、培养基的概念：是指人工配制的适合细 菌生长繁殖的综合营养基质。 l2、培养基的营养物质：蛋白胨、肉浸液、 牛肉膏、糖醇类、血液、鸡蛋和动物血清 、生长因子、无机盐类、水 l3、培养基的其它成分：凝固剂、抑制剂、 指示剂 4、培养基的种类和用途 l基础培养基：培养营养要求不高的细菌，如普通平板 l营养培养基：能满足营养需求较高细菌的生长，如血平板 l鉴别培养基：含有某些特定的底物，用于鉴别细菌，如克 氏双糖培养基（KIA） l选择培养基：
2、具有选择性抑制作用，用于选择性的培养目 的菌，如SS平板； l增菌培养基：促进目的菌的生长，适用于含菌量较少的标 本，如葡萄糖肉汤； l厌氧培养基：用于培养厌氧菌 （1 1）按用途分类：）按用途分类： （2）按物理性状分类： l液体培养基：不含凝固剂，用于增菌和接 种纯种细菌。 l半固体培养基：含0.30.5琼脂，用于 观察细菌的动力。 l固体培养基：含22.5琼脂，多用于细 菌的分离培养。 （三）实验器材 l常用玻璃器材：培养皿、试管、烧杯、三角 烧瓶、玻棒等。 l培养基的成分：普通琼脂培养基、蛋白胨、 牛肉浸膏、NaCl、琼脂粉等。 l称量工具：普通天平、电子天平。 l灭菌器材：高压蒸汽灭
3、菌锅等。 l培养基的制作：无菌室、超净工作台。 高压蒸汽灭菌锅（高压蒸汽灭菌锅（121.3 15-20min121.3 15-20min） 干烤箱干烤箱 用途：用途： 1 1、适用于玻璃器、适用于玻璃器 皿、粉剂等的灭皿、粉剂等的灭 菌；菌； 温度温度160170160170， 时间时间2h2h。 2 2、用作烘干。、用作烘干。 高压蒸汽灭菌后高压蒸汽灭菌后 的某些物品如平的某些物品如平 板的烘干板的烘干 温度温度 60 60 超净工作台超净工作台 （四）实验方法 l玻璃器材的清洗 新购置的玻璃器材：12盐酸浸泡清水清 洗 用过的无污染器皿：洗涤剂洗刷清水清洗 l细菌污染的器材：消毒灭菌后再洗
4、刷 盛培养基试管和平皿：高压灭菌趁热倒出洗 涤剂洗刷清水冲洗； 吸管：3来苏浸泡清水冲洗； 玻片和盖玻片：3来苏和清洁液浸泡清水冲洗 ；染色后的玻片，应肥皂水煮沸10min再洗涤； 含油脂的器皿：单独灭菌。 1、常用玻璃器材的准备 玻璃器皿灭菌前的准备 l玻璃器皿在清洗、干燥后必须经正确的 包裹和加塞后才能进行灭菌处理。 l灭菌方法：干烤灭菌法 2、培养基制备的一般程序 称量称量 溶化溶化 分装分装 灭菌灭菌 倒平板倒平板 培养基灭菌方法培养基灭菌方法 基础培养基：基础培养基：121.3121.3高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌1515分钟分钟 含糖培养基：含糖培养基：113 113 灭菌灭菌1515
5、分钟分钟 鸡蛋、血清培养基：间歇灭菌鸡蛋、血清培养基：间歇灭菌3 3天天3 3次次 不耐高温的液体成分：滤过除菌不耐高温的液体成分：滤过除菌保存保存 l成分: 牛肉浸膏（0.2g） 蛋白胨（0.5g） 氯化钠（0.25g） 50mldH2O等。 l程序： 称量;熔化;分装(试管);灭菌;保存 （1）液体培养基的制作 2.半固体培养基：在肉汤中加入0.2% 0.5%的琼脂即成。25ml肉汤中0.1g 琼脂粉。 程序：称量；熔化；分装程序：称量；熔化；分装( (试管试管) )；灭菌；保存；灭菌；保存 3.3.固体培养基：固体培养基： 在肉汤中加入在肉汤中加入2%2%3%3%的的 琼脂即成；或直接用营养琼脂粉配置。琼脂即成；或直接用营养琼脂粉配置。 平板制作程序：称量3.5g营养琼脂粉配100ml固体培养基。 称量；熔化；分装(三角烧瓶)；灭菌；倒平板；保存 试管斜面制作程序： 称量；熔化；分装(试管)；灭菌；斜置；保存 要求配置的培养基量（每组） l6人一小组,每组需配培养基: l液体培养基：30ml/2人,溶解,试管6根 l半固体培养基：30ml/2人,溶解,试管6根 l固体培养基：120ml/2人,溶解, 试管6根制 备斜面,余下灭菌后倒平板(6个) l（中午1点10分，来几位同学倒平板） l完成实验报告一份