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1、微生物临床送检标本的接种,张 瑞 君,微生物检验的质量保证,临床标本的微生物学检验，与临床标本的其它实验室检验是一样的，质量保证工作必须贯穿于实验室工作的整个过程,包括分析前（标本的正确采集、运送）、分析中（培养、分离、鉴定和药敏试验等）和分析后（结果报告、解释、临床反馈）的质量管理。 在这三个阶段对我们实验起到至关重要作用的分析前质量，它是由临床医护人员来进行控制的，标本留取的正确与否、时机是否恰当都是由他们来监控的。但是，我们完全可以在我们实验之前，标本接收的时候对所接收的标本进行初步的质量控制，如从留取标本的容器、所留标本的外观质量、等项目进行检查。再一个非常重要的环节就是我们工作人员对
2、标本的接种，这将影响到检验结果的准确性、及时性、合理性，今天我将主要介绍一下我们微生物实验室对临床不同标本的初次接种。,分析后,一、微生物检验的质量控制,分析中,分析前,分析前阶段按时间顺序，该阶段始于来自临床医师的申请，包括检验要求、患者准备、原始样本采集、运送到实验室并在实验室内部的传递，至检验分析过程开始时结束。,保证检验项目申请的科学、合理性；根据临床医师的检验要求，患者的病情正确准备；原始样本的正确采集及运送。,1.检验结果的正确发布；2.咨询服务；3.检验样品的保存及处理。,包括授权者应系统性的评审检验结果，评价其与可利用的患者有关临床信息的符合程度，并授权发布；结果、原始样品与其
3、它实验室样品的保存应符合经批准的政策；不再用于检验样品的安全处置应符合当地关于医疗废物处置法规和有关废物管理的建议。,主要是指实验室接到标本后检验分析开始到出具结果前的整个实验过程。,定 义：,主要内容：,所有过程：,主要工作：,1. 取样容器,二、微生物检验的相关用品,2.接种工具,接种环,接种针,无菌拭子,酒精灯,二、微生物检验的相关用品,3.培养基,二、微生物检验的相关用品,（1）,（2）,分析中的质量控制,A、外 观,C、容器的选择,B、标 示,D、留取的标本量,A、正确的接种时间,B、选择正确的培养基,C、选择正确的接种方法,D、选择正确的培养环境,E、正确的放置培养基,三、微生物检
4、验的接种要求,科别 姓名 床号 采样时间,8/4 16:20,8/4 16:20,N 5-18 王xx,8/4 16:20,N 5-18 王xx,标 示,标 示,标本的标示 培养皿：急诊不需编号，但一定要在培养皿上做标示，包括：科别、患者姓名、接种时间（日、时、分）； 化验单：完整填写样本接收时间（日、时、分）,接 种 时 间,分离培养基,血琼脂平板：,巧克力平板：,麦康凯平板：,SS琼脂平板：,血液培养瓶：,适于给类细菌生长，一般细菌检验标本的分离，都应接种此平板。,其中含有和因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌的标本。,有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选 择性过强，可影响检出率，
5、所以，使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。,用于血液、骨髓中分离常见病原菌。,具中等强度选择性，抑菌力略强，有少数革兰阴性菌不生长。在麦康凯平板上能否生长，是非发酵菌鉴定的一个依据。,接种方法,本法主要用于杂菌量较多的标本。 先将标本均匀涂布于平板表面边缘一小区（第一区）内，约占平板1/5面积，再在二、三、.区依次连续划线。每划完一个区，均将接种环灭菌一次。每一小区的划线均接触上一区的接种线12次，使菌量逐渐减少，以获得单个菌落。,平板划线分离法,斜面接种法,液体接种法,穿刺接种法,倾注平板法,涂布接种法,连续划线分离法,分区划线分离法,本法主要用于杂菌不多多的标本。 用接种环取标本少许，于
6、平板平板1/5处密集涂布，然后来回做曲线连续划线接种，线与线间有一定距离，划满平板为止。,常用于纸片法药物敏感性测定,用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性,多用于一些液体生化试验管的接种,测定牛乳、饮水和尿液等标本细菌数,主要用于半固体培养基、明胶及双糖管的接种,图 示,正确的涂布结果,第一区： 各种细菌密集涂布，形成菌苔； 在后几区 可见有所分离所有细菌的单个菌落。,错误涂法,正确的放置培养基,1、加盖、倒置（底朝上） 3、放置于合适的培养环境 2、不可叠加太高（不超过4个）,四、各种标本的接种,1、痰、咽拭子,接种培养基,接种方法,注意事项,血琼脂平板、巧克力琼脂平板、麦康凯
7、琼脂平板,培养环境,35，5%10%CO2，1824h,分区划线接种法,不可用棉拭子直接分区划线； 不可不分区而连续划线； 初始划线一定要密涂；,尽快送检 立即接种,四、各种标本的接种,2、尿液,接种培养基,接种方法,注意事项,血琼脂平板、麦康凯琼脂平板,培养环境,35，1824h,连续划线一次完成 定量接种法。标准接种环法。10ul，结果乘以100,不可用棉拭子直接划线； 可不分区而连续划线； 初始划线一定要密涂；,尽快送检 立即接种,四、各种标本的接种,3、分泌物,接种培养基,接种方法,注意事项,血琼脂平板、麦康凯琼脂平板,培养环境,35，1824h,分区划线接种法,不可用棉拭子直接分区划
8、线； 不可不分区而连续划线； 初始划线一定要密涂；,尽快送检 立即接种,四、各种标本的接种,4、粪便,接种培养基,接种方法,注意事项,血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、ss琼脂平板 不同的检查目的，可选用不同的培养基,培养环境,35，1824h,分区划线接种法,一般不作涂片检查。杂菌多 不可用棉拭子直接分区划线； 不可不分区而连续划线； 初始划线一定要密涂；,尽快送检 立即接种,四、各种标本的接种,5、血液、骨髓,接种培养基,接种方法,注意事项,双相血培养瓶,培养环境,35，5%10%CO2，7天后方可报告阴性,液体接种法,每日观察血培养瓶的变化； 每日对血培养瓶进行颠倒混匀。,尽快送检 立即接种,
9、四、各种标本的接种,6、脑脊液,接种培养基,接种方法,注意事项,血琼脂平板、巧克力琼脂平板、麦康凯琼脂平板,培养环境,35，5%10%CO2，1824h,分区划线接种法,不可冷藏 不可用棉拭子直接分区划线； 不可不分区而连续划线； 初始划线一定要密涂；,尽快送检 立即接种,四、各种标本的接种,7、胸水、腹水、心包液、关节腔积液等,接种培养基,接种方法,注意事项,血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、可选择血培养瓶,培养环境,35，5%10%CO2，1824h,分区划线接种法,不可冷藏 不可用棉拭子直接分区划线； 不可不分区而连续划线； 初始划线一定要密涂；,尽快送检 立即接种,四、各种标本的接种,8、皮屑、甲屑等,接种培养基,接种方法,注意事项,真菌培养管,培养环境,22-25， 7天后方可报告阴性,每日观察真菌培养管的变化；,尽快送检 立即接种,谢 谢！,