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1、高效液相色谱法的习题和参考答案思考题与练习题1. 高效液相色谱是如何实现高效、快速、灵敏的？解：气相色谱理论和技术上的成就为液相色谱的发展创造条件，从它的高效、高速和高灵敏度得到启发，采用 5- 10m微粒固定相以提高柱效，采用高压泵加快液体流动相的流速；设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测器，提高检测灵敏度，克服经典液相色谱的缺点，从而达到高效、快速、灵敏。2. 简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素，如何减少谱带扩张，提高柱效？解：液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动相传质、停留流动相传质及柱外效应。在液相色谱中要减少谱带扩张，提高柱效，要减少填料颗粒直径，减小填料孔穴深
2、度，提高装填的均匀性，采用低黏度溶剂作流动相，流速尽可能低，同时要尽可能采用死体积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等。3. 色谱柱 A 柱长为 15cm，载体粒度为 5m。另一 B 柱长为 30cm，载体粒度为 10m。两柱的柱效相等吗？解： l=L/dp lA=15/0.0005=30000lB= 30/0.0010=30000A 柱的折合柱长为30000，B 柱的折合柱长也为30000，表明组分在两根柱内从柱入口到出口都经过30000 个载体颗粒，两柱的柱效相等。4. 流动相为什么要脱气？常用的脱气方法有拿几种？解：流动相中溶解气体存在以下几个方面的害处（ 1） 气泡进入检测器，引起光
3、吸收或电信号的变化，基线突然跳动，干扰检测；（ 2） 溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时，可能与流动相或固定相发生化学反应；（ 3） 溶解气体还会引起某些样品的氧化降解，对分离和分析结果带来误差。因此，使用前必须进行脱气处理。常用的脱气法有以下几种:（ 1） 加热脱气法；（ 2） 抽吸脱气法（ 3） 吹氦脱气法；（ 4） 超声波振荡脱气法。5. 在液相色谱中。常用作固定相，又可用作键合相基体的物质是A. 分子筛B.硅胶C. 氧化铝D. 活性炭解：B 硅胶要形成化学键合固定相，所用的基质材料应有某种化学反应活性，在四种固体固定相中只有硅胶含有硅醇基，是能进行键合的活性官能团。6. 在 150 2mm
4、硅胶柱流动相为己烷 / 甲醇（ 150:2 ），紫外检测器色谱条件下分离丙烯酰胺，判断以下组分的出峰次序，为什么？A.B.解：在给定的色谱条件下，组分 B 先出峰，组分 A 后出峰。以硅胶为固定相，己烷 / 甲醇（ 150:2 ）为流动相，该体系为正相色谱，样品的极性 AB，在正相色谱体系极性小的组分先出峰，极性大的组分后出峰，所以出峰次序为B 先出，A 后出。7. 在硅胶柱上，用甲苯为流动相，某组分的保留时间为30min ，如果改用四氯化碳或乙醚为流动相，试指出选用哪中溶剂能减少该组分的保留时间？为什么？解：该体系为正向色谱体系。在该体系中流动相的极性增大保留值减少。流动相甲苯、四氯化碳及乙
5、醚的溶剂强度参数分别是0.29 、0.18 、0.38 ，因此选用溶剂强度参数大于甲苯的乙醚，可缩短该化合物的保留时间。8. 为什么体积排阻色谱中任何组分的分配系数必须符合0K1？如果K1 说明什么问题 ?解：因为组分的分配系数为K=Cs/Cm,Cs与 Cm分别为组分在固定相和流动相中的浓度, 当分子直径大于孔径时, 此时 Cm=0,K=0.当分子直径小于固定相孔径时, 组分向空隙内流动相扩散, 达到平衡时 , 一半组分在空隙内, 一半组分在空隙外, 此时 K=1.0, 若分子直径介于以上两种极限情况之间,K 一定介于 0 与 1 之间 , 可见体积排阻色谱中, 任何祖父呢的分配系数为0K1,
6、 如果 K1 说明此时的分离方式已不是纯粹的体积排阻色谱,其分离过程受到其他作用力( 如吸附 ) 的支配 .9. 为了测定邻氨基苯酚中微量杂质苯胺 , 现有下列固定相 : 硅胶 ,ODS 键合相 , 流动相有 : 水 - 甲醇 , 异丙醚 - 己烷 , 应选用哪种固定相 , 流动相 ?为什么 ?解：邻氨基苯酚中微量杂质苯胺测定 , 为了良好分离 , 应让苯胺先出峰 , 由于苯胺的极性小于邻氨基苯酚 , 因此应采用正相色谱法 , 选用硅胶为固定相 , 异丙醚 - 己烷为流动相.10. 在 ODS键合相固定相 , 甲醇 - 水为流动相时试判断四种苯并二氮杂苯的出现峰顺序. 为什么 ?1.2.3.4
7、.解：色谱条件为反相键合相色谱体系 , 在反相色谱体系中极性大的组分 k 小 , 首先出峰 , 按四种苯并二氮杂苯的结构 , 出峰顺序为 4-3-2-1.自测题1. 在 GC和 LC中 , 影响柱选择性的不同的因素是A.C流动相固定相的种类；B. 柱温；的种类；D分配比。2. 在液相色谱中 , 范氏方程中的哪一项对柱效能的影响可以忽略不计?A涡流扩散项；B分子扩散项；C固定相传质阻力项；D流动相中的传质阻力。3. 在液相色谱中 , 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力？A组分与流动相；B组分与固定相；C组分与流动相和固定相；D组分与组分。4. 在液 - 固色谱法中 , 以硅胶为固
8、定相 , 对以下四组分 , 最后流出色谱柱的组分可能是A.C邻D对苯酚；B.苯胺；羟基苯胺；羟基苯胺。5. 在液 - 固色谱法中 , 以硅胶为固定相 , 对以下四组分 , 最后流出色谱柱的组分可能是A.C邻D对苯酚； B. 苯胺； 6. 用液相色谱法分离长链饱和烷烃的混合物,羟基苯胺；应采用下述哪一种检测器?羟基苯胺。A紫外吸收检测器；B示差折光检测器；C荧光检测器；D电化学检测器。7. 液液色谱法中的反相液相色谱法，其固定相、流动相和分离化合物的性质分别为：A非极性、极性和非极性；B极性、非极性和非极性；C极性、非极性和极性；D非极性、极性和离子化合物。8. 若在一个 1m 长的色谱柱上测得
9、两组分的分离度为0.68 ，若要使它们完全分离，则柱长 (m)至少应为：A.B.CD0.5 ；2；5； 9。9. 在液相色谱中，梯度洗脱最宜于分离：A几何异构体；B沸点相近，官能团相同的试样；C沸点相差大的试样；D分配比变化范围宽的试样。10. 液液色谱法中的反相液相色谱法，其固定相、流动相和分离化合物的性质分别为：B. 极性、非极性和非极A. 非极性、极性和非极性；性；D. 非极性、极性和离子化合C. 极性、非极性和极性；物。正确答案：1： (C) 、 2： (B) 、 3： (C) 、 4：(D) 、 5：（ D）6：(B) 、 7：(A) 、 8： (C) 、 9： (D) 、 10：（ A）!（注：专业文档是经验性极强的领域，无法思考和涵盖全面，素材和资料部分来自网络，供参考。可复制、编制，期待你的好评与关注）