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1、流式细胞术,细胞染色，制备单细胞悬液 上机获取数据 数据分析,PMT,PMT,PMT,PMT 4,Dichroic,Filters,Bandpass,Filters,流式细胞检测原理,Laser,1,2,3,4,Flow cell,流式数据表现形式,FS:细胞大小 SS:胞内颗粒性,流式血液肿瘤数据分析步骤,1 、寻找异常细胞 2、 定义异常细胞 -异常细胞是什么细胞？ -异常细胞的量有多少？ 3、结论,如何寻找异常细胞?,正常细胞群的分布,CD45:白细胞共同抗原，表达于所有白细胞,异常细胞群,异常细胞群,异常细胞的量如何计算?,流式如何定义细胞? -以白血病细胞表达的抗原标志作为依据,粒细
2、胞成熟过程,不同阶段粒细胞CD分子的表达情况,单核细胞的成熟过程,不同阶段单核细胞CD分子的表达情况,红系的成熟过程,B淋巴细胞成熟过程,T淋巴细胞的成熟过程,其他血液系统肿瘤的特异性标志 毛细胞性白血病：CD19+，CD103+， CD11c/CD22双阳性高表达 CLL：CD19+/CD5+ CMML：CD14+/CD68+/CD13+CD33+/高SSC MM：CD19+，CD38+,流式报告单的结论如何得出?,病例分析,病例一,异常细胞,髓系？淋系？,流式细胞术检测结果表明骨髓细胞中髓系母细胞（CD34+或/和CD117+）约占骨髓细胞总数32%；同时伴有单核细胞系列分化倾向的细胞约占
3、骨髓细胞总数约70%。结果符合急性髓性白血病伴单核细胞系列分化（AML-M5）。因为原始单核细胞幼稚单核细胞大于等于80为M5a,x小于80为M5b，在分界线上，所以不区分a,b.治疗方法类似。,淋巴细胞-4.2 T细胞占淋巴细胞44.9%，CD4:CD8=0.66，未见明显异常；NK细胞占淋巴细胞3.9%，未见明显异常；成熟B细胞占淋巴细胞40.7%，为多克隆B细胞,未见明显异常。 粒细胞-22.7 相对比例未见明显减少。免疫表型提示粒细胞发育成熟标记物表达紊乱。 单核细胞-37.7 相对比例明显增多，其中约70%为成熟单核细胞，免疫表型为CD14+,CD64+,CD11b+, CD13+,
4、CD33+,HLA-DR+和CD4+。 CD45 Dim-33.0 相对比例明显增多，为髓性原始/幼稚细胞,免疫表型为CD34+，CD117+，CD13+,CD33+和HLA-DR+。 非白细胞-0.2 未见明显异常。,病例二,淋巴细胞-41.5 T细胞占淋巴细胞70.9%，CD4:CD8=1.42，未见明显异常；NK细胞占淋巴细胞4.7%，未见明显异常；成熟B细胞占淋巴细胞17.6%，为多克隆B细胞,未见明显异常。 粒细胞-10.9 其相对比例明显减低，免疫表型未见明显异常。 单核细胞-4.9 未见明显异常。 CD45 Dim-36.1 主要为原始/幼稚B淋巴细胞，其免疫表型为CD34-、CD117-、CD19+、HLA-DR+和CD10+。 非白细胞-6.1 主要为细胞碎片。,流式细胞术检测表明结果原始/幼稚B淋巴细胞约占骨髓细胞白细胞总数30%， 其免疫表型为CD34-、CD117-、CD19+、HLA-DR+和CD10+，提示为前B淋巴细胞。结果符合急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）。,谢谢！,