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1、酒精对生长中果蝇体重的影响 刘红英 (德州学院生物系, 山东德州 253023) 摘要 目的 研究酒精对果蝇生长发育过程中体重的影响。方法 通过在培养基中加入不同浓度的酒精, 并统计 F1代的前 5 d成蛹 数目, 前 5 d羽化数目, 平均体重以及性别比例, 研究不同浓度的酒精对果蝇生长发育过程中体重的影响。 结果 在一定范围内, 随着 酒精浓度的提高, 雄果蝇的体重有逐渐减少的趋势, 雌果蝇的体重亦随酒精浓度的增高而减少。酒精对果蝇生长发育有一定的影响, 它 能够抑制果蝇幼虫和蛹的发育, 减轻果蝇的体重, 使果蝇的雌雄比例失调。结论 该研究为酒精对人类的危害提供了参考数据, 为孕 妇杜绝饮
2、酒和优生优育提供了科学指导。 关键词 酒精; 果蝇; 生长发育; 体重 中图分类号 Q963 文献标识码 A 文章编号 0517- 6611(2009) 23- 11027- 02 Influence ofA lcohol on theD rosophilaWeight during Growth LIU Hong-ying (Depart m ent ofB iology , Dezhou College ,Dezhou, Shandong 253023) Abstract Ob jective The am i was to study the influence of alcoholon
3、 drosophilaweight during gro w th process .M ethod Differentconcn . of alcoholwere added into the med ium. The pupae number ,e m ergence number ,average body w eight and sex ratio ofF1in the first5 days were investigated and the influence ofd ifferent concn.ofalcoholon drosophilaweight during gro w
4、th processwere studied.Resu lt Them ale drosophilaw eightw ere decreased w ith the increasing ofalcoholconcn .in a certain extent and the fe male drosoph ilaw eightwere also decreased w ith the increasing ofalcoholconcn . Alcoholhad certain influence on the grow th ofdrosoph ila .Itcou ld inh ibitde
5、velopmentofdrosoph ila larva and pupae ,reduce drosoph ila weight andm ake drosoph ila sex m i balance .Conclusion The research provided reference data for da mage of alcohol to humans and provided scientific guidance for eradicating drinking ofpregnantwo m en and prepotency . Key words Alcoho;l Dro
6、soph ila ; Grow th; Weight 基金项目 山东省自然科学基金项目 ( Q2007D02 , Y2007D55); 山东省 教育厅资助项目 ( J07 W J50); 德州学院人才引进项目 ( 06rc012 , 07rc007)。 作者简介 刘红英 ( 1955- ), 女, 山东宁津人, 教授, 从事动物生物技术 研究。 收稿日期 2009-04 -10 酒精可影响人类的生长发育及健康, 因此研究酒精对一 些模式生物的影响, 以进一步了解酒精对人体的危害有重要 意义。而黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中 最重要的模式生物之一, 20
7、世纪初,Morgan选择黑腹果蝇作 为研究对象,通过简单的杂交及子代表型计数的方法,建立 了遗传的染色体理论, 奠定经典遗传学的基础并开创利用果 蝇作为模式生物的先河 1。1927 年, Morgan的学生 Muller 发现放射线可以导致遗传损伤和突变, 从而可以进行人工诱 变。20世纪 30年代, Painter和 Bridges发表了果蝇的多线染 色体图,为基因组的物理图谱奠定了基础。Le w is 、 Nusslein- Volhard与 W iesschaus由于在胚胎早期发育遗传机制的重大 发现而获得了 1995年的诺贝尔医学或生理学奖。这些成就 也反映了模式生物果蝇在生命科学研究
8、中的重要地位。该 研究通过观察不同浓度酒精对果蝇体重的影响,从而为酒精 对人类的危害提供参考数据。 1 材料与方法 1. 1 试验材料 1. 1 . 1 果蝇。野生型黑腹果蝇,由遗传实验室保存。 1. 1 . 2 试剂。常规试剂玉米粉、 无水乙醇、 酵母粉、 琼脂 (日 本进口)、 蔗糖、 乙醚、 丙酸、 蒸馏水均为德州学院遗传学实验 室保存。 1. 2 试验方法 1. 2 . 1 培养基的制备。玉米培养基配方及配料: 水 750 m l 煮开,加琼脂 6 . 2 g ,待琼脂溶解后加红糖 62. 5 g ,搅拌溶解后 再加调成糊状的玉米糊 (玉米粉 82. 5 g ,用冷水调成糊状 )煮 开
9、 2 3m in, 加酵母粉 79 . 0 g ,加热 1 2m in,同时搅拌均匀, 移去火源,加丙酸 5m l 2。培养基稍稍冷却后, 倒入已灭菌 的培养瓶中, 塞好棉塞, 放入 80 e 的干燥箱中 30 m in。接种 时消毒。 1 . 2 . 2 果蝇的麻醉。在麻醉瓶的棉塞上滴加 9滴乙醚, 然 后迅速拔去装有果蝇的三角瓶的棉塞,使三角瓶和麻醉瓶口 相对, 拍打三角瓶和麻醉瓶。使果蝇全都倒入麻醉瓶。然后 迅速塞上麻醉瓶棉塞。麻醉到一定程度把果蝇倒在白磁板 上。当果蝇翅膀上翘 45b 时, 表示已经死亡,不可再用。鉴别 并统计果蝇雌雄果蝇数目 2。 1 . 2 . 3 不同浓度酒精的滴
10、加及亲本果蝇的接入。所用酒精 浓度分别为 2%、 4%、 6%、 8%、 10 %、 12% 。每个浓度取 3个 培养瓶, 贴上标签并注明浓度的大小, 用滴管滴加不同浓度 酒精,以湿润培养基表面为标准, 并加入已灭菌的滤纸条, 将 麻醉的果蝇用毛笔接入培养瓶, 每个培养瓶各 3对果蝇。在 对照组中加入蒸馏水, 将接入果蝇的培养瓶放入 25 e 的恒 温培养箱中培养,酒精及蒸馏水自放入果蝇之日起每天都要 滴加, 滴加量以刚好湿润培养基表面为限。 1 . 2 . 4 培养过程。每天观察培养瓶中的变化, 并做相应的 记录。如果在培养过程中发现有的培养基发生霉变, 应立即 将其倒掉,以免影响整个试验的
11、最终结果。倒掉之后, 应立 即重新配制培养基, 并严格对培养瓶以及棉塞进行灭菌, 尽 量避免霉菌的感染。统计数据包括: 开始出现蛹的时间、 每 天出现的蛹数、 开始出现成虫的时间、 每天出现的成虫数(连 续统计 5 d)、 雌雄数目、 雌雄体重。 2 结果与分析 2 . 1 酒精对雄果蝇体重的影响 表 1显示, 随着酒精浓度 的提高,雄果蝇的体重有逐渐减少的趋势, 其中 8%酒精浓度 的雄果蝇体重比 6 %的要高, 可能是在称量果蝇体重时,操作 失误引起的。但从总体上仍能说明酒精可以使雄果蝇的体 重减轻。 安徽农业科学, Jour nal ofAnhuiAgr.i Sc. i 2009 , 3
12、7( 23): 11027- 11028责任编辑 罗芸 责任校对 况玲玲 表 1 酒精对果蝇体重的影响 Table1 The effects of alcohol on the body weight of drosophila 酒精浓度M% A lcohol concentration 雄果蝇体重Mmg Bodyweight of maledrosophila 雌果蝇体重Mmg Bodyweight of female drosophila 对照 Control0 . 875 01 . 280 20 . 850 01 . 273 40 . 835 01 . 242 60 . 800 01 .
13、 221 80 . 806 51 . 205 100 . 782 91 . 190 120 . 750 01 . 133 注: 数据为所有雄、 雌果蝇的平均体重。 Note : The data are the average bodyweight of all drosophilae. 2. 2 酒精对雌果蝇体重的影响 表 1显示, 雌果蝇的体重 亦随酒精浓度的增高而减少。因此可以得出这样的结论: 酒 精可以影响果蝇的体重, 而且在一定范围内,随酒精浓度的 升高,其体重有逐渐递减的趋势。 3 结论与讨论 3. 1 培养过程中应注意的问题 3. 1 . 1 如何防止培养基长霉。当外界温度不适应
14、果蝇生长 时 (温度低于 18 e ), 培养基接种后 7 d内, 特别容易长霉。 要避免长霉, 应注意: 培养果蝇用的器皿要严格消毒。培 养瓶洗干净后, 自然晾干,再与棉塞一起进行高温干燥灭菌 (121 e , 20m in); 培养基营养要全面; 接种时消好毒。 在无菌室内接种,如没有无菌室,在接种前用 5%酒精棉球擦 双手 1遍。接种后, 放入适宜果蝇生长温度 ( 20 25 e )的 培养箱中培养果蝇, 一旦下一代成蝇孵出后,培养基就不易 长霉。 3. 1 . 2 长霉后的处理方法。若培养基长霉后, 由于霉菌孢 子漂浮于培养瓶的整个空间, 包括果蝇身上,如将此果蝇接 种到新的培养基中,
15、 约经过 4 5 d,培养基将会重新长出霉 菌来,遇到该问题, 解决的方法只有 2种: 一是不再接种这种 长霉菌果蝇,重新接种未长霉的果蝇; 二是采取措施杀死果 蝇身上的霉菌孢子。杀霉菌方法为: 将带有霉菌孢子的成蝇 倒入空培养瓶中,棉塞上倒适量的 75%酒精, 再将瓶口塞紧, 挥发后的酒精充满整个瓶内, 从而将果蝇身上的霉孢子杀 死。在操作上应注意 2点: 一是倒在棉塞上的酒精量要合 适, 过多果蝇易醉昏,过少杀死不了霉菌孢子; 二是果蝇呆在 空瓶内的时间要恰当,以 2 d为好 3。 3 . 1 . 3 培养的温度。温度对果蝇的生长发育繁殖至关重 要。果蝇生活的最适温度为 20 25 e 。
16、当温度降至 10 e 以下时,生活周期延至 57 d以上, 生活力明显降低, 而高于 30 e 时可引起不育和死亡。因此,选培养箱培养最为妥当。 3 . 1 . 4 酵母菌的选择。以往常常使用干酵母片, 但其菌体 活力较差,难以大量繁殖。现在改用发酵面包专用活性酵母 粉来制备酵母菌液,效果较好。 3 . 2 酒精对果蝇生长发育的影响 试验结果表明, 酒精对 果蝇生长发育有影响, 它能够抑制幼虫和蛹的发育, 减轻果 蝇的体重,使果蝇的雌雄比例失调, 从而反映出酒精对人体 的巨大伤害作用, 为孕妇杜绝饮酒和优生优育提供科学指 导。近一个世纪以来,果蝇在生物学研究的舞台上占有举足 轻重的地位, 是一
17、种理想的模式生物 4。随着技术的发展, 果蝇还将继续成为重要的模式生物, 广泛应用于生命科学的 各个研究领域, 以探索生命的奥秘和阐明疾病的机制 5。近 年来, 我国以果蝇为模式生物的科研队伍在不断壮大。可以 预见, 小小的果蝇将会在我国建立创新型国家的过程中作出 更大的贡献。 参考文献 1 RUBI N G M, LEW I S E B. A brief history of Drosophila. scontributions to genome research J. Science , 2000 , 287(5461): 2216- 2218 . 2 刘祖洞,江绍慧.遗传学实验 M .
18、 北京:高等教育出版社, 1987 . 3 龚慧明.果蝇培养基长霉的处理措施 J.生物学教学, 2007 , 32( 4): 52 . 4 MANEV H, DI M I TRIJEVICN. Fruit flies for ant- i pain drugdiscovery J. LifeSc, i 2005 , 76( 21): 2403- 2407 . 5 MANEV H, DI M I TR IJEVI C N, DZI TOYEVA S. Techniques : fruit flies as models forneurophar macological research J. T
19、rends Phar macol Sc,i 2003 , 24( 1): 41- 43 . (上接第 11022页) 种时机 9。对活疫苗而言,免疫反应随着活疫苗毒力的增加 而增强,毒力越强, 免疫反应越明显或者突破母源抗体的能 力也越强, 免疫效果越好。但是,以中强毒力毒株生产的疫 苗容易引起免疫鸡呼吸道粘膜上皮细胞的损伤,继发细菌等 其他病原体的感染。因此, 在养鸡生产的不同阶段, 应使用 不同毒力的新城疫疫苗。 参考文献 1 甘孟侯. 中国禽病学M .北京: 中国农业出版社, 1997 : 8- 23 . 2 徐秀臣, 王丽男, 邓彦莉. 鸡新城疫活疫苗的研究 J. 中国预防兽医学 报,
20、 2003 , 25( 6): 455- 457 . 3 中国兽药典委员会. 中华人民共和国兽药典 ( 2005年版)三部: 红细胞 凝集试验法 M . 北京:中国农业出版社, 2006 :附录 28- 30 . 4 中国兽药典委员会. 中华人民共和国兽药典 ( 2005年版)三部: 鸡新城 疫活疫苗M .北京: 中国农业出版社, 2006 : 72 . 5 王永坤,严维巍,周继宏, 等. 鸡副粘病毒病的病毒特性和基因型研究 及疫病防制 J. 扬州大学学报, 2000 , 3( 1): 27- 29 . 6 刘华雷,王志亮,吴延功,等. 2002- 2007年 355株中国新城疫病毒分子 流行病学分析 C.中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨 会论文集, 2008 : 135 . 7 陈晓玲.控制鸡新城疫的关键问题分析 J.农技服务, 2008 , 25 ( 9): 91 . 8 张佰娣,刘锐. 商品肉鸡新城疫不同免疫程序效果比较研究 J. 吉林 畜牧兽医, 2008 , 29( 12): 4- 5 . 9 隋慧, 郑艳军. 新城疫免疫失败的原因及机理 J. 吉林畜牧兽医, 2004 (1): 43- 44 . 11028 安徽农业科学 2009年