南方红豆杉叶中活性多糖的分离与纯化.pdf

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1、第4 1 卷第4 期 2 0 0 7 年4 月 浙 江大 学学 报( 工学版) J o u r n a lo fZ h e j i a n gU n i v e r s i t y ( E n g i n e e r i n gS c i e n c e ) V 0 1 4 lN O 4 A p r 2 0 0 7 南方红豆杉叶中活性多糖的分离与纯化 吴绵斌，郑宝华 ( 浙江大学生物工程研究所，浙江杭州3 1 0 0 2 7 ) 摘要：采用水提醇沉方法从南方红豆杉枝叶中得到红豆杉总多糖，经D E A E S e p h a r o s eF F 阴离子交换色谱分离 得到3 种酸性多糖，分别命名

2、为红豆杉多糖一1 ( P T M 一1 ) 、红豆杉多糖一2 ( P T M 一3 ) 和红豆杉多糖一3 ( P T M 一3 ) ，条件为： 色谱柱先用p H 值为8 5 的H C l 一T r i s 缓冲液平衡，然后用0 1 、0 3 、0 5 、0 7 和0 9m o l I 。的N a C l 溶液阶跃洗 脱P T M 一3 进一步采用凝胶过滤色谱纯化、脱盐和冻干后，用高压凝胶渗透色谱、紫外、红外和薄层色谱分析其结 构，发现P T M 一3 不含蛋白和核酸，重均相对分子质量M w 为1 2 3k D ，单糖组成含有I 。一阿拉伯糖、n 半乳糖、n 葡 萄糖醛酸和L 一鼠李糖，以D 一

3、( 1 ，3 ) 糖苷键连接 关键词：多糖；红豆杉；分离；纯化 中图分类号：Q 8 1文献标识码：A 文章编号：1 0 0 8 9 7 3 X ( 2 0 0 7 ) 0 4 0 6 9 6 0 4 I s o l a t i o na n dp u r i f i c a t i o no fb i o a c t i v ep o l y s a c c h a r i d e sf r o m l e a v e so f 乳X U $ m a i r e i W UM i a n b i n 。Z H E N GB a o h u a ( I n s t i t u t eo fB i

4、 o 已行g i 竹已e r i 起g ，Z h e j i a n gU n i v e r s i t y ，H a n g z h o u3 1 0 0 2 7 ，C h i n a ) A b s t r a c t ：C r u d e ，b i o a c t i v ew a t e r s o l u b l ep o l y s a c c h a r i d e sw e r ei s o l a t e df r o mt h e 1 e a v e so fT a X U Sm a i r e i u s i n gh o tw a t e re x t r a c t

5、 i o nf o l l o w e db ye t h a n o lp r e c i p i t a t i o n T h r e ep o l y s a c c h a r i d e sn a m e dP T M 一1 ，P T M 一 2a n dP T M - 3w e r ef r a c t i o n a t e db yD E A E S e p h a r o s eF Fa n i o ni o n e x c h a n g ec h r o m a t o g r a p h T h ec o l u m n w a sp r e e q u i l i

6、b r a t e du s i n gH C l 一T r i sb u f f e rw i t ht h ep Hv a l u eb e i n g8 5 ，a n dw a sw a s h e dw i t hd e i o n i z e d w a t e rf o l l o w e db ys u c c e s s i v ee l u t i o nw i t hs o d i u mc h l o r i d es o l u t i o n so fi n c r e a s i n gc o n c e n t r a t i o n ( 0 1 ，0 3 ， 0

7、 5 ，0 7a n d0 9m o l L ) i nas t e p w i s em a n n e r A f t e rf u r t h e rp u r i f i e db ys i z ee x c l u s i o nc h r o m a t o g r a p hf o l l o w e db yd e s a l t e da n df r e e z e - d r i e d ，P T M 一3w a sa n a l y z e dw i t hg e lp e r m e a t i o nc h r o m a t o g r a p h ( G P C

8、 ) ，u l t r a v i o l e ts p e c t r o s c o p y ( U V ) ，i n f r a r e ds p e c t r o s c o p y ( I R ) a n dt h i nl a y e rc h r o m a t o g r a p h ( T L C ) T h er e s u l t si n d i c a t e dt h a tt h eP T M 一3i sah o m o g e n e o u sp u r ep 0 1 y s a c c h a r i d ew h i c hi sc o m p o s

9、e do fG a l 、G l c V A 、 R h aa n dA r aw i t h8 一( 1 ，3 ) 一l i n k a g e s ，a n dt h a tt h ew e i g h t a v e r a g em o l e c u l a rw e i g h t ( M 。) i s1 2 3k D K e yw o r d s ：p o l y s a c c h a r i d e s ；T a x u sm a i r e i ；s e p a r a t i o n ；p u r i f i c a t i o n 目前关于红豆杉抗肿瘤的研究主要集中在紫

10、杉 烷类化合物特别是紫杉醇方面提取紫杉醇的主要 原料红豆杉目前主要依靠人工种植，而红豆杉 在被提取紫杉醇后基本被废弃，既浪费了资源又污 染了环境红豆杉中除含紫杉醇等小分子活性物质 外，最近发现红豆杉枝叶中含有的活性多糖还具有 提高免疫、保护肝脏等功效，对肿瘤也有一定的辅助 治疗作用，而目前关于红豆杉多糖的研究还未见有 其他文献报道 本文通过水提醇沉，结合离子交换色谱和凝胶 过滤色谱从红豆杉枝叶中发现3 种不同相对分子质 量的酸性多糖，并对其中一种主要的多糖进行了进 一步的分离纯化和结构鉴定，为进一步综合利用红 豆杉资源打下坚实的基础 收稿日期：2 0 0 6 一0 1 1 8 浙江大学学报I

11、工学版) 网址：W W W j o u r n a l s z j u e d u c n e n g 基金项目：浙江省科技厅重点科研资助项目( 2 0 0 4 c 2 1 0 3 6 ) 作者简介：吴绵斌( 1 9 6 9 一) ，男，浙江宁波人，副教授，从事生物活性物质的发酵与分离研究E m a i l ：w u m b z j u e d u c n 万方数据 第4 期 吴绵斌，等：南方红豆杉叶中活性多糖的分离与纯化 1 材料与方法 1 1 材料与仪器 红豆杉粗多糖由本实验室自制，D E A E S e p h a r o s e F F 、S e p h a c r y lS 一3 0

12、 0H R 、S e p h a d e xG 一2 5 为 G EH e a l t h c a r e 公司产品，其他试剂均为分析纯 U N I C 0U V V I S2 8 0 2 P C 分光光度计， C H R I S TA L P H A1 2D 冷冻干燥机，S a r t o r i u s P P 一2 0E 全自动电化学分析仪 1 2 实验与分析方法 1 2 1 实验方法红豆杉枝叶粉碎至4 0 目后，经 石油醚脱脂阴干，按照1 0m L g 的比例加入去离子 水，于1 0 0 水煮2h ，取液体，减压蒸馏浓缩，加入 乙醇至质量分数为8 5 后沉淀，得固体，重溶，过滤 后透析

13、，脱色，冻干得粗多糖 将粗多糖溶于去离子水中，离心除杂，上清液， 过D E A E S e p h a r o s eF F ( 2 6c m 6 0c m ) 层析柱 分离，先用缓冲液冲洗，再用N a C l 洗脱，部分收集 器收集，各管取样，硫酸一蒽酮法显色，6 2 0n m 处吸 光度检测多糖，收集各管的含糖收集的组分旋蒸浓 缩后，过S e p h a c r y lS 一3 0 0 ( 1 6c m 8 0c m ) 进一步 纯化，S e p h a d e xG 一2 5 ( 中1 6c I n 8 0c m ) 脱盐，冻 干，用高效液相( H P L C ) 、紫外、红外和薄层分析

14、 1 2 2 分析方法多糖检测：采用硫酸一蒽酮法 】 N a C l 的检测：N a C l 浓度根据电导率计算在相 同温度下测量不同浓度的高纯度标准N a C l 溶液的 电导率) ，制作标准曲线收集待测溶液，稀释至原 浓度的1 1 0 ，测定电导率，根据标准曲线计算浓度 相对分子质量测定：采用高压凝胶渗透色谱 法口。分析将不同相对分子质量的标准葡聚糖上柱 制取标准曲线，根据标准曲线计算相对分子质量 T L C 分析：用1 0m L 安瓿管将2 0m g 精制单 组分多糖溶于4m I 。去离子水中，加入1m o l L 的 三氟乙酸4m L 用酒精喷灯将安瓿瓶封口，1 0 0 水解4h 水解

15、完毕后打开安瓿瓶，将溶液在4 0 下 蒸干，加乙醇除去三氟乙酸，再次蒸干，然后加入 1 0 2 0m L 去离子水，即可点样点样后用展开剂 展开，喷上显色剂，1 0 0 。C 下将硅胶板烘干，分析结 果1 ， 紫外光谱检测：取精多糖1 5m g ，适量去离子 水溶解，进行紫外扫描( 波长为2 0 0 4 0 0n m ) ，去离 子水为对照 红外光谱检i 贝0 ：取精多糖1m g ，与适量干燥 K B r 粉末混合研磨至极细，压片后测定口 2 结果与讨论 2 1 多糖的离子交换色谱分离 目前已有较多关于采用离子交换色谱分离生物 多糖的报道 3 _ 6 本文将红豆杉粗多糖溶液用离子交 换色谱进一

16、步分离，缓冲液为p H 一8 5 的H C l 一 T r i s ，洗脱剂为N a C l 溶液，阶跃浓度分别为0 1 、 0 3 、0 5 、0 7 和0 9m o l L ，体积流量q v 为1m L r a i n ，洗脱液用硫酸一蒽酮法检测多糖 从图1 中可以发现0 1 和0 3m o l L 的N a C l 溶液进行洗脱的交界处出了很宽的峰A ，而在0 5 m o l L 的N a C l 溶液洗脱时则出现了一个比较对称 的峰B 经H P L C 分析，峰A 中含有2 种不同的多 糖图中V 。为洗脱体积 越 禁 督 1 0， 一 o 暑 0 U 矗 Z 图1红豆杉粗多糖离子交换的

17、阶跃洗脱曲线 F i g 1 G r a d i e n te l u t i o nc u r v eo fc r u d ep 0 1 y s a c c h a r i d e s p u r i f i e db yD E A E S p h a r o s eF F 2 2P T M - 1 与P T M - 2 的分离 2 2 1 p H 值的影响调节p H 值，洗脱峰A 可分 为2 个峰A ，和A 。，分别命名为红豆杉多糖一l ( P T M 一1 ) 和红豆杉多糖一2 ( P T M 一2 ) 从图2 中发现， 随着p H 值的增大，P T M 一1 和P T M 一2 的出峰

18、时间 及出峰时间间隔都增大，2 峰峰形变化较小这是由 于随p H 值的增大，糖的解离度增大，其保留值增 大，出峰时间变长但糖是部分解离的，由于其碳链 的长短不同，p H 值的影响不同口 ，使得2 个峰的出 峰时间增加幅度不同故可以通过改变p H 值，实现 P T M 一1 和P T M 一2 的分离从图可知，在p H 一8 5 时P T M 一1 和P T M 一2 已基本分离，考虑到多糖在高 p H 时不稳定，选择p H 一8 5 为最佳条件 2 2 2 体积流量的影响图3 表明，当p H - - - - 8 5 时， 体积流量增大，峰A 1 和A ：的保留体积与峰形变化 不大，洗脱时间大大

19、减少当洗脱体积流量大于4 m L m i n 时，柱压显著升高，对操作条件要求较高考 虑操作条件，最佳分离体积流量为4m L m i n 万方数据 6 9 8浙 江大 学学报( 工学版)第4 1 卷 驻 熟 O 0 0 5 捧 Ol O O 0 萋i ： K m L 【b ) p H = 8 0 K m L ( c ) p H = 85 O 图2p H 值对红豆杉多糖离子交换分离的影响 F i g 2 E f f e c to fp Hv a l u eo ni o n - e x c h a n g ep u r i f i c a t i o n o fp o l y s a c c h

20、a r i d e sf r o ml e a v e so fT a x u sm a i r e i 0 5 臻 0 0 O 5 篓嬲 螫0 2 01 O O 0 5 葵：三 螫0 2 0l 0 0 形m L ( a ) 吼= 1m L m i n 彤m L ( b ) q ；，2 2m L m i n V 。I m L ( c ) g 。，。4m L m i n 图3 体积流量对红豆杉多糖离子交换分离的影响 F i g 3 E f f e c to fv o l u m ef l o wr a t eo ni o n - e x c h a n g ep u r i f i c a t

21、i o no fp o l y s a c c h a r i d e sf r o ml e a v e so fT a x u sm a i r e i 2 3P T M - 3 的分析 2 3 1 S e p h a c r y lS 一3 0 0 凝胶过滤将粗多糖经 D E A E S p h a r o s eF F 分离收集0 5m o l L 的N a C l 溶液的洗脱峰B ，减压浓缩后上S e p h a c r y lS 一3 0 0 凝 胶过滤，用0 1m o l I 。的N a C l 溶液洗脱，体积流量 为1m L m i n ，分离曲线如图4 所示初步可以判断 洗脱

22、峰B 是单一多糖 2 3 2 S e p h a d e xG - 2 5 凝胶过滤脱盐将S e p h a c r y l S r - 3 0 0 凝胶过滤得到的多糖浓缩后，上S e p h a d e xG - - 2 5 柱脱盐，流动相为去离子水，q v 为0 2m I 。r a i n 图5 表明糖和盐得到有效分离，收集该多糖组分，冻干，命 名为红豆杉多糖一3 ( P T M _ 3 ) 2 3 3 紫外光谱分析将得到的P T M 一3 在1 8 0 4 0 0n m 紫外波长范围内进行扫描由图6 可见 P T M 一3 在2 6 0 和2 8 0n m 波长处均无显著吸收峰， 说明样

23、品中无蛋白质( 多肽) 和核酸类杂质 2 3 4P T M 一3 的G P C 分析 高效液相图谱( 图7 ) 表明P T M - 3 中不含其他杂质，为单一组分多糖，以标 准相对分子质量葡聚糖为标样建立G P C 标准曲线， 表明该组分的重均相对分子质量为1 2 3k D 2 3 5 多糖组成分析样品水解物与标准单糖的 薄层层析图谱( 图8 ) 表明P T M 一3 中单糖组成含有 L 一阿拉伯糖( L A r a ) 、D 一半乳糖( I 。一G a l ) 、D 一葡萄糖 醛酸( L G l c V A ) 和L 一鼠李糖( L R h a ) 2 3 6 红外光谱分析P T M 一3

24、的红外光谱如图9 所示结果表明：在8 9 7c m “处的吸收峰表示该糖 的糖苷键为B 构型；13 3 3 和29 2 7c m 叫处的吸收峰 3 O 2 5 似2 0 耋- s 1 0 O 5 0 0 V J m L 图4P T M 一3 的S e p h a c r y lS - 3 0 0 洗脱图谱 F i g 4 G e lf i l t r a t i o n c h r o m a t o g r a p h yo fP T M 一3 o n S e p h a c r y lS 一3 0 0 07 O 6 0 5 篓叫 螫0 3 0 2 0 l 0 O 0246 心m L 25

25、0 0 20 0 0 一 l5 0 0u 10 0 0 未 k 5 0 0 0 图5 P T M 一3S e p h a d e xG - 2 5 凝胶过滤脱盐图谱 F i g 5D e s a l t i n go fP T M 一3o nS e p h a d e xG 一2 5 万方数据 第4 期 吴绵斌，等：南方红豆杉叶中活性多糖的分离与纯化 6 9 9 越 芸 馨 图6P T M 一3 紫外吸收图谱 F i g 6 U l t r a v i o l e ts p e c t r u mo fP T M3 1 4 1 2 1 0 曼8 耄6 4 2 0 f m l n 图7P T M

26、 - 3 高效液相图谱 F i g 7C h r o m a t o g r a p h yo fP T M 一3o nH P L C 图8T L C 对照图谱 F i g 8T h i nl a y e rc h r o m a t o g r a p ho fP T M 一3 40 0 030 0 020 0 010 0 0 o - c m 一1 图9P T M - 3 红外光谱 F i g 9 I n f r a r e ds p e c t r o g r a mo fP T M 一3 表示该糖糖苷键为t ? - ( 1 ，3 ) 糖苷键；8 7 0c m l 处无特 征峰，证明没有甘

27、露糖存在；16 1 2c m _ 1 处的特征峰 表示该糖中存在酰胺基 3结语 采用水提醇沉法提取红豆杉叶中的多糖，经 D E A E S p h a r o s eF F 上柱层析，N a C l 阶跃洗脱，用 p H 值为8 5 的H C l 一T r i s 缓冲液洗脱获得3 个组分 多糖( 命名为P T M l 、P T M 一2 和P T 胁3 ) 收集含有 P T M 一3 的峰，通过S e p h a c r y lS 一3 0 0 凝胶过滤和 S e p h a d e xG 一2 5 脱盐后冻干，得到多糖P T M 一3 ， H P I 。C 和紫外分析确定其不含蛋白和核酸等

28、杂质， 为单一组分多糖，重均相对分子质量1 2 3k D 经 T L C 分析知，其由I 。一阿拉伯糖、D 一半乳糖、D 一葡萄糖 醛酸和I 。一鼠李糖等单糖组成；红外分析确定单糖间 以t ? - ( 1 ，3 ) 糖苷键为主连接 参考文献( R e f e r e n c e s ) ： 1 张惟杰糖复合物生化研究技术 M 2 版杭州：浙江 大学出版社，2 0 0 3 r 2 M A G D A L E NI ，B ，E L V I R AI ，T ，S U S A N AB I m p r o v e ds i z e - e x c l u s i o nh i g h - p e r

29、f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h i cm e t h o df o rt h es i m p l ea n a l y s i so fg r a p eju i c ea n d w i n ep o l y s a c c h a r i d e sE J J o u r n a lo fC h r o m a t o g r a p h yA ， 1 9 9 8 ( 8 2 3 ) ：3 3 9 3 4 7 3 王莹，赵毅民，张起凤，等黄芪中一种新葡聚糖的分离 J 中草药，2 0 0 1 ，3 2 ( 1 1 )

30、：9 6 2 9 6 4 W A N GY i n ，Z H A 0Y i m i n ，Z H A N GQ i f e n g 。e ta 1 I s o l a t i o na n ds t r u c t u r ee l u c i d a t i o no fn o v e lg l u c a nf o r m A s t r a g a l u sm o n g h o l i c u s J C h i n e s eT r a d i t i o n a la n d H e r b a lD r u g s ，2 0 0 1 3 2 ( 1 1 ) ：9 6 2 9 6

31、 4 4 吴亚林，黄静，潘远江无花果多糖的分离、纯化和鉴定 J 浙江大学学报：理学版，2 0 0 4 ，3 1 ( 2 ) ：1 7 7 1 7 9 W UY a l i n ，H U A N GJ i n g ，P A NY u a n - j i a n g I s o l a t i o n ， p u r i f i c a t i o na n di d e n t i f i c a t i o no fp o l y s a c c h a r i d eo fF i c u s c a r i e a J 3 J o u r n a lo fZ h e j i a n gU n

32、 i v e r s i t y ：S c i e n c eE d i t i o n ，2 0 0 4 ，3 1 ( 2 ) ：1 7 7 1 7 9 5 李志昂，李卫旗，颜邦于，等可德兰多糖的分离纯化和 化学结构分析 J 。浙江大学学报：农业与生命科学版， 2 0 0 4 ，3 0 ( 3 ) ：3 2 6 3 3 0 I 。IZ h i a n g ，I 。IW e i q i ，Y A NB a n g a n ，e ta 1 S t u d yo n s e p a r a t i o n ，p u r i f i c a t i o na n dc h e m i c a ls

33、t r u c t u r eo fC u r d l a np o l y s a c c h a r i d e J J o u r n a lo fZ h e j i a n gU n i v e r s i t y ： A g r i c u l t u r ea n dL i f eS c i e n c e ，2 0 0 4 ，3 0 ( 3 ) ：3 2 6 3 3 0 6 陈海华，许时婴，王璋亚麻籽胶中酸性多糖和中性多糖 的分离纯化 J 食品与发酵工业，2 0 0 4 ，3 0 ( 1 ) ：9 6 1 0 0 C H E NH a i h u a X US h i y i n

34、 g W A N GZ h a n g S e p a r a t i o na n dp u r i f i c a t i o no fa c i d i cp o l y s a c c h a r i d e sa n dn e u t r a l p 0 1 y s a c c h a r i d e sf r o mf l a x s e e dg u mr J F o o da n dF e r m e n t a t i o nI n d u s t r i e s ，2 0 0 4 ，3 0 ( 1 ) ：9 6 1 0 0 7 - 1 丁明玉，田松柏离子色谱原理与应用 M

35、北京：清华 大学出版社，2 0 0 1 万方数据 南方红豆杉叶中活性多糖的分离与纯化南方红豆杉叶中活性多糖的分离与纯化 作者：吴绵斌， 郑宝华， WU Mian-bin， ZHENG Bao-hua 作者单位：浙江大学,生物工程研究所,浙江,杭州,310027 刊名： 浙江大学学报（工学版） 英文刊名：JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(ENGINEERING SCIENCE) 年，卷(期)：2007,41(4) 被引用次数：10次 参考文献(7条)参考文献(7条) 1.张惟杰 糖复合物生化研究技术 2003 2.MAGDALEN L B;ELVIRA L T;SUS

36、ANA B Improved size-exclusion high-performance liquid chromatographic method for the simple analysis of grape juice and wine polysaccharides 1998(823) 3.王莹;赵毅民;张起凤 黄芪中一种新葡聚糖的分离期刊论文-中草药 2001(11) 4.吴亚林;黄静;潘远江 无花果多糖的分离、纯化和鉴定期刊论文-浙江大学学报(理学版) 2004(02) 5.李志昂;李卫旗;颜邦干 可德兰多糖的分离纯化和化学结构分析期刊论文-浙江大学学报(农业与生命科学版)

37、2004(03) 6.陈海华;许时婴;王璋 亚麻籽胶中酸性多糖和中性多糖的分离纯化期刊论文-食品与发酵工业 2004(01) 7.丁明玉;田松柏 离子色谱原理与应用 2001 本文读者也读过(6条)本文读者也读过(6条) 1. 韦正波.谢莹.陈全斌.黄光武 红豆杉种子油的提取和抗肿瘤活性初探期刊论文-广西医科大学学报2009,26(2) 2. 吴彦.刘庆.胡科.许维宏 我国红豆杉资源现状和紫杉醇产业化对策期刊论文-长江流域资源与环境2002,11(6) 3. 王康.杨永.WANG Kang.YANG Yong 红豆杉科白豆杉属植物的分类学研究期刊论文-植物分类学报2007,45(6) 4. 宋

38、保伟.张宗勤.宋西德.刘磊.SONG Bao-wei.ZHANG Zong-qin.SONG Xi-de.LIU Lei 中国红豆杉种内和种间竞争 关系的研究期刊论文-西北林学院学报2009,24(3) 5. 王丽艳.冯欣欣.邢凤兰.徐群.邓启刚.赵冰.安东正義 日本产红豆杉化学成分及细胞毒活性研究期刊论文-安 徽农业科学2010,38(8) 6. 王昌伟.彭少麟.李鸣光.李文建.林发亮.WANG Chang-Wei.PENG Shao-Lin.LI Ming-Guang.LI Wen-Jian.LIN Fa- Liang 红豆杉中紫杉醇及其衍生物含量影响因子研究进展期刊论文-生态学报2006

39、,26(5) 引证文献(10条)引证文献(10条) 1.李立华.张国升 安徽皖南红豆杉中紫杉醇和多糖的提取与含量测定期刊论文-中医药临床杂志 2010(5) 2.刘春兰.杨宇.李转秀.杜宁 红豆杉培养物水溶性多糖的提取及清除自由基活性的研究期刊论文-中央民族大学 学报（自然科学版） 2009(2) 3.于晓辉.万仁玲.欧阳林山.马玉叶.范强 黄芪多糖的分离纯化和含量测定研究进展期刊论文-中国兽药杂志 2008(9) 4.谢清若.郑立文.凌新龙.李克林.黄永春 响应面法优化提取南方红豆杉枝多糖工艺条件期刊论文-时珍国医国药 2011(5) 5.符德欢.李学芳.赵彩肖.张晓南.赵庭周.蒋博谋 三种栽培红豆杉的生药学研究期刊论文-云南中医学院学报 2011(4) 6.谢志慧.杜玲玲.李效贤.熊耀康 南方红豆杉研究新进展期刊论文-中国药业 2009(15) 7.华芳.宋祖荣.张国升.刘金旗 红豆杉多糖的研究进展期刊论文-齐齐哈尔医学院学报 2013(7) 8.王亚飞.王强.阮晓.张莺莺 红豆杉属植物资源的研究现状与开发利用对策期刊论文-林业科学 2012(5) 9.孙启武.王磊.张小平.郝朝运.田胜尼 皖南山区南方红豆杉种群动态研究期刊论文-林业科学研究 2009(4) 10.郑德勇.徐莉.郑月梅.林清霞 红豆杉多糖的提取与结构初探期刊论文-林产化学与工业 2012(2) 本文链接：