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1、第3 1 卷第7 期 2 0 0 3 年7 月华南理工大学学报( 自然科学版) Joum a 】o fS o u mC b i n aU n i v e r s i t yo fT e c h n 0 1 0 9 y (NaturalS c i e n c eE d i t i o n )Vol_31 N o7 J u l v2 0 0 3 筻章编号：1000565x(200j)07删78104 红发夫酵母原生质体形成的影响因素4 田小群朱明军梁世中 ( 华南理工大学食品与生物工程学院，广东- 州5 1 l 】6 4 0 ) 摘要：研究了制备红发夫酵母原生质体的影响因素茵体的培养时间二量蔫羹掣
2、：嚣藉 嚣蘑；萎选E 譬靠篱；薰F 国，妻藓幽。海，i 爱囊；摹谨豸哺油囊雾F 型喜酆驯犁黧嚣 尊召善塑犁饕汪毫塞鼍，蹩蕈羹蕈一堪隧萋攀塑暨嚣；事一馨薹薹墨墼l 女矗雩；C 羹羹 j i i 毫垂= 痧霉率i 荤j 牙毒，鼍妻，? 譬i ；善誊蠢嚣i 羹垂醮篓翻器= 旃辛烯毫囊化 中图分类号：Ts2 3 6文献标识码：A 近几年来，变性淀粉在我国发展迅猛传统变性 淀粉大都只具有单一的亲水性质，而辛烯基琥珀酸 淀粉酯则具有亲水亲油的两性性质，是国内变性淀 粉研究开发的热点它可通过辛烯基琥珀酸酐与淀 粉进行酯化、降解而得其产品性能良好、附加值高， 可广泛用于微胶囊、食品和医药等行业作为乳化剂、 稳
3、定剂、增稠剂”。“本研究以蜡质玉米淀粉为原 料，对辛烯基琥珀酸淀粉酯的制备工艺及其应用进 行丁研究和探讨 1 材料与方法 l1 主要试剂与实验设备 主要试剂与实验设备见表1 1 2 实验方法 12 1 辛烯基琥珀酸淀粉酯的制备 淀粉与水的质量比为l ：1 5 一l ：2 0 ，漏成淀粉 乳，并保持不断搅拌，反应罐置于超级恒温水浴器 中，温度控制在3 0 4 5 之间；以w = 3 的氢氧化 钠控制p H 在8 O 1 00 之问，2h 内缓慢加入3g 辛烯基琥珀酸酐( 相对1 0 0g 淀粉干基的量) ，反应 收稿口期：2 0 0 2 一l O 1 0 t 基金项目：华南理工大学自然科学基金资
4、助项目( E 5 3 2 l1 6 8 ) 作者简介：罗发兴L 1 9 5 5 一) ，男，剐教授，主要从事淀粉化 学与工程的研究 3 1 2h ；用p = 3 的盐酸调p H = 7 0 ，过滤，用蒸 馏水洗涤数次，再用丙酮洗涤，低温干燥，粉碎，过筛 得产品辛烯基琥珀酸淀粉酯，同时测量产品的取代 度” 表l 主要试剂与实验设备 T a b l elM a i nr e a g e n t sa n de x p e d m e n t 8 l 。q u i p m e n t s 名称规格产地 蜡质玉米淀粉特级 葬塞奢凄墓器 辛烯基琥珀酸酐工业级s T a M A 公司产铺 a 淀粉酶工业级
5、N o v o N o r d l 娃公可 超级恒温水浴器c s 5 0 I 型上海实验仪器厂 酸度计 p H 一2 5 型上海虹益仪器，一 强力电动搅拌器 J B 9 0 一D 型 杭州仪表I 乜机厂 电子分析天平 d = 01 m g 德国s t a n o n u s 公司 移动式高建离Q z 一5 到江苏省无锡县 心喷雾干燥机规格8 0 0 一5喷雾干燥机厂 高速分散器x H F I 上海金进生化仪器厂 辛烯基琥珀酸淀粉酯与水质量比为l ：3 1 ：5 ， 室温诵淀粉乳，加入适量的a 一淀粉酶( 活力1 2 0 k N u g ) ，调p H = 5 5 6 5 ，升温到1 0 0 左
6、右使 淀粉一边糊化一边酶解，通过作用时间来控制酶解 终点用妒= 3 的盐酸调p H = 40 左右进行灭酶 淀粉开始糊化时开始计时，控制不同的作用时间得 到不同流度的系列产品，并测产品的D E 值 在进口温度2 5 0 ，出口温度6 5 ，离心喷头转 速70 0 0r m i n 条件下进行喷雾干燥，最后得产品 12 2 斐林试剂( 碱性酒石酸铜溶液) 的制备 万方数据 万方数据 万方数据 万方数据 红发夫酵母原生质体形成的影响因素红发夫酵母原生质体形成的影响因素 作者：田小群， 朱明军， 梁世中 作者单位：华南理工大学食品与生物工程学院,广东,广州,510640 刊名： 华南理工大学学报(自
7、然科学版) 英文刊名：JOURNAL OF SOUTH CHINA UNIVERSITY OF TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2003，31(7) 被引用次数：0次 参考文献(7条)参考文献(7条) 1.刘子贻.沈奇桂 虾青素的生物活性及开发应用 1997(03) 2.吕玉华.金征宇.徐学明 虾青素高产突变株的选育期刊论文-生物技术 1999(05) 3.Chun S B.Chin J E.Bai S Strain improvement of Phaf fia rhodozyma by protoplast fusion 1992 4.
8、杜连祥 工业微生物学实验技术 1992 5.Hermosilla G.Leon R.Martinez C Formation and regen eration of Phaffia rhodozyma protoplasts 1995 6.Miller M W.Yoneyama M.Soneda M Phaffia,a new yeast genus in the Deuteromycotina (Biastomycetes) 1976(26) 7.Licia M Pera.Rubinstein Laura Influence of manganese on cell morphology,
9、protoplasts formation and-D-glu cosidase activity in Phaffia rhodozyma 1999 相似文献(1条)相似文献(1条) 1.学位论文 华艳艳 红发夫酵母发酵法生物合成虾青素的研究 2005 虾青素是一种类胡萝卜素，因其具有着色性能及特殊的生物学功能而在饲料、食品、化妆品和医药等行业具有广阔的应用前景。 该文以红发夫酵母(Phaffiarhodozyma)AS2.1557为出发菌株，通过摇瓶分批发酵，对其细胞生长及虾青素合成进行了系统的研究，以期为发酵法生 物合成虾青素的代谢调控奠定基础。同时，通过原生质体紫外线诱变和细胞的DES
10、诱变，对红发夫酵母高产虾青素菌株进行了选育。研究结果如下： 1.培养种子的适宜条件为：斜面菌种在25培养4天；以2环斜面种子接种于25mL/250mL、初始pH6.0的YM液体培养基中在22摇瓶培养36h。 2.高浓度葡萄糖抑制细胞生长和虾青素合成，适宜初始葡萄糖浓度为20g/L。在相同碳源浓度下，蔗糖与葡萄糖的发酵水平相近，与木糖的发酵存在 较大差异。发酵至48h时，木糖的细胞浓度较低，仅为葡萄糖发酵时细胞产量的约4/7；但其细胞虾青素含量可达最高值1.37mg/g，是葡萄糖发酵时细胞 虾青素含量的2.5倍。 3.蛋白胨、硫酸铵、硝酸钾和硝酸钠均可作为虾青素发酵的氮源，在相同氮含量条件下，蛋
11、白胨最有利于细胞生长和虾青素合成。硫酸铵的适宜浓 度为7.0g/L。硝酸钾浓度对红发夫酵母生长及其虾青素合成有显著影响；低浓度硝酸钾比高浓度硝酸钾更有利于细胞生长和虾青素合成。以较低浓度硝 酸钾(0.3g/L)为氮源，比硫酸铵的发酵周期约长48h，细胞生长及虾青素合成分别出现二次生长及二次合成现象，其细胞产量及虾青素产量均比以蛋白胨 为氮源提高约20。 4.Mn2+显著影响生物量及虾青素产量，当发酵培养基中含0.1g/LMn2+、0.7g/LMg2+、0.2g/LCa2+时，细胞生长速度快、发酵周期可缩短约15h，细胞 虾青素含量在发酵57h时达最高值，为0.827mg/g，是不添加实验离子时
12、的1.3倍。 5.适宜的摇瓶发酵条件为：发酵培养基初始pH6.0、发酵温度(2022)、接种量8、摇瓶装液量25mL/250mL三角瓶，并且发酵培养基中K2HPO4适 宜浓度为(1.02.0)g/L。6.适量Mn2+可提高细胞的溶壁酶-D-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21)的活性，并明显改变细胞形态。在初始发酵培养基中添加 0.1g/LMn2+可促进细胞生长及虾青素合成。 7.在发酵24h时添加橙汁、菠菜汁和番茄汁，可分别使虾青素最高产量提高71.1、14.6和62.6。其中，以添加橙汁的效果最好。 8.制备原生质体的出发菌株预培养时间为16h，添加Mn2+的适宜浓度为0.8g/L时，可使原生质体形成率达到(62.573.6)；通过原生质体紫外线作 用20s，或细胞DES处理30min进行菌种诱变，经初筛及摇瓶复筛获得有明显改进性状的突变株共26株。采用紫外线诱变原生质体可较大幅度提高虾青素产 量，但高产稳定性较差；DES诱变细胞所获得的菌株虾青素高产稳定性较好，但菌体的生长能力明显减弱。 本文链接： 授权使用：吉林农业大学发展学院(jlnydxfzxy)，授权号：8f2c2130-d70a-4529-958a-9e4c00bb37aa 下载时间：2010年12月14日