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1、1,分光光度法测铁,化学实验教学中心,2,一、 实验目的,掌握用磺基水杨酸显色法测铁的原理和方法。 掌握分光光度计的使用方法。,3,二、实验原理,在 pH=911.5 的 NH3.H2O-NH4Cl 溶液中，Fe3+与磺基水杨酸反应生成组成比1:3的黄色稳定配合物。,该配合物在碱性溶液中的最大吸收波长为 420 nm，可在此波长下测量吸光度，由朗伯-比耳定律计算铁含量。,4,（1）分光光度计仪器结构,功能显示器,样品室,波长刻度窗,三、分光光度计的使用方法,波长调节旋钮,操作键,5,（2）分光光度计使用方法,通电-仪器自检-预热20 min；,6,用键设置测试模式为透射比（T）,7,波长选择：
2、用波长调节旋钮设置所需的波长,8,调零,打开样品室盖，在“Transmittance”方式下按“0%”键，此时仪器自动校正后显示“000.0”。,9,调满,在比色皿槽中，依次放入参比液，样品液1和样品液2等，盖上样品室盖(注意透光截面垂直于光路方向)。,10,将参比液拉入光路中，按“100%T”键调T为100%，此时仪器显示“BLA”，表示仪器正在自动校正，校正完毕后显示“100.0”。,11,样品测定： 将MODE转换为“ABSORBANCE”，显色屏读数为0.000，然后将样品液分别拉入光路中，此时显示测得的样品吸光度。,12,分光光度计的使用注意事项：,(1) 比色皿的清洁程度，直接影响
3、实验结果。因此，特别要将比色皿清洗干净。装样前处理：自来水反复冲洗蒸馏水漂洗2次待装溶液漂洗2次。必要时，需用浓硝酸或铬酸洗液短时间浸泡。 用完后用自来水和蒸馏水洗净并用檫镜纸檫干放回比色皿盒中。,13,(2) 拿放比色皿时，应持其“毛面”，不要接触“光面”。,（3）若比色皿外表面有液体，应用擦镜纸朝同一方向拭干，以保证吸光度测量不受影响。,14,(4) 比色皿内盛液应为其容量的2/3，过少会影响实验结果，过多易在测量过程中外溢，污染仪器。,15,四、实验步骤,取系列50 mL容量瓶并编号，按下表配制系列溶液。以试剂空白作参比溶液，在420 nm波长下测定各溶液的吸光度。,16,以吸光度为纵坐标, 铁含量为横坐标, 绘制工作曲线。由工作曲线确定待测溶液的含量。,17,五、注意事项,在用磺基水杨酸测定Fe3+ 时，在pH=911.5 范围形成稳定的3:1黄色配合物，且不容易受干扰。本实验以NH3-NH4Cl缓冲溶液控制。 待测溶液的浓度一定要在工作曲线线性范围内，如果浓度超出直线的线性范围，则有可能偏离朗伯-比耳定律，导致测量误差较大。 用移液管移取试剂，注意顺序，不要混用移液管。,