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1、名校名 推荐第 19 课时专题复习一、核心概念整合训练 1下列叙述错误的是()A 改变 NaCl 溶液的浓度只能使DNA 溶解而不能使其析出B在沸水浴中，DNA 遇二苯胺试剂会呈现蓝色C用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质训练 2引物的作用是()A 打开 DNA 双链B催化合成DNA 子链C使 DNA 聚合酶能够从引物的3端开始复制D提供模板训练 3 蛋白质提取和分离分为哪几步，依次是 ( ) A 样品处理、凝胶色谱操作、 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳B样品处理、凝胶色谱操作、纯化1名校名 推荐C样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D样品处理、纯
2、化、粗分离、纯度鉴定训练4使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中，相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程，可表示为图中()二、 DNA粗提取与鉴定中方法与目的归纳方法目的 NaCl 溶液浓度为 _时，DNA 溶解，而部分蛋白质发生盐析而生溶于 NaCl 溶液成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl 溶液的杂质中并稀释当 NaCl 溶液稀释至 _时， DNA析出，过滤可除去溶于NaCl中的部分蛋白质和其他杂质加入嫩肉粉嫩肉粉中含 _ ，水解蛋白质加入 _DNA 析出，除去溶于酒精的蛋白质加入二苯胺，并鉴定 DNA_浴特别提醒 哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA ，不适于作 DNA
3、提取的材料， 但却是提取血红蛋白的理想材料。 实验过程中两次用到蒸馏水， 第一次目的是使成熟鸡血细胞吸水涨破释放出DNA ，第二次目的是稀释 NaCl 溶液。训练 5下表是关于 DNA 粗提取与鉴定实验中所用的材料、操作及其作用的表述，正确的是 (多选 )()试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA 的 NaCl 中析出 DNA 丝状物D冷却的酒精加入到过滤后含DNA 的 NaCl 中产生特 定的颜色反应训练 6在 DNA 的粗提取过程中，先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是()A 稀释血液；冲洗样品B使血细胞破裂；降低Na
4、Cl 浓度使 DNA 析出C使血细胞破裂；增大DNA 溶解量D使血细胞破裂；提取含杂质较少的DNA一、选择题1关于凝胶色谱柱的装填，不正确的是()A 交联葡聚糖凝胶 (G 75)中 “ G”示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，表75 表示凝胶得水值B色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装C用 300 mL 的物质的量浓度为20 mmol/L 的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 hD凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液2洗涤红细胞时，离心所采用的方法是()A 低速长时间离心B低速短时间离心C高速长时间离心D高速短时间离心3在除去杂质时，为什么要将滤液放在60 75的恒温水浴箱中保温1
5、0 15min()A 使 DNA 变性B使蛋白质变性2名校名 推荐C使 DNA 和蛋白质变性D分解蛋白质4PCR 一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物延伸而成的DNA 单链做模板时将 ()A 仍与引物结合进行DNA 子链的延伸B无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链C同时与引物和引物结合进行子链延伸D与引物结合进行 DNA 子链的延伸5关于 PCR 技术的应用，错误的一项是 ()A 古生物学、刑侦破案、DNA 序列测定B诊断遗传病、基因克隆、古生物学CDNA 序列测定、基因克隆、刑侦破案D诊断遗传病、合成核苷酸、 DNA 序列测定6下面说法不正
6、确的是 ()A 在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH 的影响，维持pH 基本不变B缓冲溶液通常由 1 2 种缓冲剂溶 解于水中配制而成C电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内7下列各项中，一般不影响在凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是()A 层析柱高B层析柱的直径C缓冲溶液D样品的分布8做 DNA 粗提取和鉴定实验时，实验材料用鸡血而不用猪血的原因是()A 鸡血的价格比猪血的价格低B猪的成熟的红细胞中没有细胞核，不易提取到DNAC鸡血不会凝固，猪血会凝固D用鸡血提取DNA 比用猪血提取操作简便二、简答题9 DNA 在 NaC
7、l 溶液中溶解度有二重性，随着NaCl 溶液的浓度变化而变化。(1)请在下列NaCl 溶液浓度中选出能使DNA 析出最彻底的一种_和溶解度较高的一种 _。A 0.14 mol /LB2 mol/ LC0.15 mol /LD 0.3 mol/ L(2)DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以 _ ， 可 以 推 测 溶 于 酒 精 中 的 物 质 可 能 有_ _。(3)利用 DNA 遇 _呈蓝色的特性， 将该物质作为鉴定_的试剂。 其实验过程要点是向放有_的试管中加入4 mL 的 _ 。混合均匀后，将试管置于_5 min ，待试管 _，观察试管中溶液颜色
8、的变化，这个实验也说明DNA耐_温。10随着分子生物学的发展，人们越来越重视对蛋白质的研究。测定蛋白质的相对分子质量是研究蛋白质的一项重要技术，常用的测定方法是凝胶(由多孔性网状物质构成的颗粒，其孔能让小分子物质进出)过滤法，即在一根垂直的玻璃柱中装满凝胶，然后在其上端加入蛋白质混合液并用缓冲液进行洗脱。根据各种蛋白质洗脱的先后顺序可以比较它们的相对分子质量大小。不同蛋白质相对分子质量大小与洗脱体积的关系如下图所示。请回答下列问题：(1)蛋白质的基本单位是_ _，其结构通式为_。3名校名 推荐(2)把含有肌红蛋白(相对分子质量为16 900)、血清蛋白 (相对分子质量为68 500)、牛乳球蛋
9、白 (相对分子质量为35 000) 、牛胰岛素 (相对分子质量为5 700)的蛋白质混合液进行凝胶过滤，最先洗脱出来的是_。(3)某人欲用凝胶过滤法比较A 、 B 两种蛋白质的分子量大小，请你选择需要的材料，帮助其设计实验步骤，并预测实验结果，以得出相关结论。实验步骤： _ 。实验结果： _ 。(4)若由凝胶过滤法测得某一由2 条肽链构成的蛋白质的相对分子质量为m，且已知氨基酸的平均相对分子质量为n。则该蛋白质是由_个氨基酸经脱水缩合而成的。第 19 课时专题复习专题整合一、 0.14 mlo/L二苯胺蓝色 TaqDNA 聚合酶子 链 5 3溶胀固定装填相对分子质量大小训练 1ADNA 在物质
10、的量浓度为0.14 mol/ L 的 NaCl 溶液中溶解度最低，可以使DNA 析出，所以选A 项。 训练 2CDNA 分子的复制具有方向性，即只能从引物的3端开始，从子链的5端向 3端延伸。引物的作用是促使DNA 聚合酶能够从引物的3端开始复制。训练 3C蛋白质的提取和分离的程序分为：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。 A 项描述的是实验操作过程中的技术。训练 4B本题考查对凝胶色谱法分离蛋白质原理的理解，相对分子质量较大的蛋白质留在颗粒外面， 相对分子质量较小的蛋白质进入颗粒内部；相对分子质量大的通过凝胶间隙先被洗脱，相对分子质量小的进入凝胶内部而后被洗脱。二、 2 mol /L0.1
11、4 mol/ L木瓜蛋白酶冷却酒精 (95%)沸水训练 5AC在 “DNA 粗提取与鉴定实验”中，柠檬酸钠可以防止血液凝固；鸡血中加入蒸馏 水可以使细胞膜破裂；DNA 在不同浓 度的 NaCl 溶液中的溶解度不同，在 0.14 mol/ L时，溶解度最低，有利于DNA 析出； DNA 不溶于酒精，但细胞中的某些物质可以溶于酒精，所以加入酒精，可以获得较纯的DNA ；DNA 遇二苯胺产生蓝色反应(需要水浴加热)。训练 6B第一次加入蒸馏水的作用是使血细胞过度吸水而破裂，使核内物质释放。第二次加入适量蒸馏水，是为了将NaCl 溶液浓度降低到0.14 mol/ L ，使 DNA 因溶解度达到最小而析
12、出。达标测试1 D 本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(G 75)，其中G 表示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75 表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g ；气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，因此，一旦发现有气泡，必须重装；在洗脱过程中，应在约 50 cm 高的操作压下，用300 mL 物质的量浓度为20 mmol/L 的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h，以使凝胶装填紧密；凝胶溶胀时， 应使用蒸馏水将其充分溶胀，制成凝胶悬浮液。 2B高速或长时间离心，会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，而影响后面血红蛋白的提取纯度。3B大多数蛋白质不能耐受60 75
13、的高温， 有利于染色质 (体 )、蛋白质与DNA 分离，这样容易获得较为纯净的DNA 。 4 D PCR 扩增中，从 第二轮循环开始由引物 延伸而成的 DNA 单链做模板时将与引物 结合进行 DNA 子链的延伸；由引物 延伸而成的 DNA 单链做模板时将与引物 结合进行 DNA 子链的延伸。 5DPCR 技术在医学上用于遗传病的基因诊断、基因克隆、DNA 序列测定，法医学上用于刑侦破案，古生物学上用于生物化石样品分析。PCR 技术是以4 种脱氧核苷酸为原料，合成双链DNA 的过程， PCR 技术不能合成核苷酸。4名校名 推荐6D 透析袋一般是用硝酸纤维素 (又叫玻璃纸 )制成的。透析袋能使小分
14、子自由进出，而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中分子量较小的杂质，或用于更换样品的缓冲液。 7B 分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关。样品是否分布均匀也影响分离度，缓冲溶液的pH 影响蛋白质所带的电荷，因此也影响分离度。只有层析柱的直径一般不影响分离度。8BDNA 是生物的遗传物质，主要存在于细胞核中。生物实验材料的选择原则一是容易获得；二是实验现象明显。做DNA 粗提取与鉴定实验的实验材料不选猪血是因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，不易提取到DNA ，而鸟类、爬行类等动物成熟的红细胞中有细胞核，实验现象明显。9 (1)AB(2) 除去杂
15、质某些脂类、蛋白质、糖类或其他大分子物质(3)二苯胺DNADNA二苯胺试剂沸水中水浴加热冷却后高解析 根据实验原理可知 DNA 在 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低，在 2 mol/ L 的 NaCl 溶液中溶解度较高。 DNA 主要存在于染色体上，为了把 DNA 与其他物质分开，采取 DNA 不溶于酒精的方法，目的是除去杂质；利用DNA 遇二苯胺 (沸水浴 )呈蓝色的特性，可以鉴定提取的 DNA 。10 (1)氨基酸(2)血清蛋白(3) 实验步骤：将含有A 、 B 两种蛋白质的混合液加入装满凝胶的玻璃柱上端， 并用缓冲液进行洗脱，检测它们洗脱的先后顺序实验结果：若A 先于 B 洗脱出来，则 A 的相对分子质量大于 B；若 B 先于 A 洗脱出来，则 B 的相对分子质量大 于 A (4)(m 36)/( n 18)解析(2) 相对分子质量不同的蛋白质，通过凝胶色谱柱时，相对分子量大的先洗脱出来。(3) 该题考查了学生对凝胶色谱法分离蛋白质实验的理解和应用。(4) 设该蛋白质是由x 个氨基酸脱水缩合而成，则脱去水分子的相对分子质量 (x 2)18。蛋白质的相对分子质量为m xn( x 2) 18，解方程得 x (m 36)/( n 18)。5