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1、名校名 推荐微生物的实验室培养一、选择题1关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是()A 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C待培养基冷却至50左右时进行倒平板D待平板冷却凝固约510 min 后，将平板倒过来放置2金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是()A 对接种环进行灼烧处理B带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C带菌培养基必须经加热后才能倒掉D接种后双手必须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭3防止杂菌入侵， 获得纯净的培养物， 是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是()
2、A 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染D使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境4下列叙述错误的是()A 右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞，为避免污染需放在酒精灯火焰附近B倒平板整个过程应在火焰旁进行C打开培养皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖1名校名 推荐D为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置5有关稀释涂布平板法的说法中，错误的是()A 用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡
3、皮头，吹吸三次，目的是使菌液与水充分混匀B移液管需经过灭菌C试管口与移液管应在离火焰1 2 cm 处D涂布时可转动涂布器，使菌液涂布均匀6以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序正确的是()A 计算 称量 倒平板 溶化 灭菌B计算 称量 溶化 倒平板 灭菌C计算 称量 溶化 灭菌 倒平板D计算 称量 灭菌 溶化 倒平板7为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是()A 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4保藏的方法8有关平板划线操作的叙述，正确
4、的是()A 使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C把皿盖打开，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D最后将平板倒置，放入培养箱中培养2名校名 推荐二、简答题9某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：(1) 对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备牛肉膏蛋白胨固体培养基所需的原料： _、_、 _、_、_。其中提供氮源的是_；提供碳源的主要物质是_。(2)
5、 微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，故配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_，防止 _ 。(3) 将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入 _ 中灭菌，压力 _kPa，温度 _，时间 _ 。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0 时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管_。(4) 使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入 _，把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5) 从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯_( 内“”或 “外”)焰灭菌，并且待接种环_ 后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，
6、将接种的试管放入_冰箱中保藏。10下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏蛋白胨培养基的配方。请回答：试剂用量牛肉膏5.0 g蛋白胨10.0 g3名校名 推荐NaCl5.0 g琼脂20.0 g水1 000 mL(1) 培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是_和 _。培养基配制完成以后，一般还要调节pH 并对培养基进行 _ 处理。(2) 分离纯化微生物最常使用的接种方法是_ 和 _两种。在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是_。(3) 假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片，可能的原因是什么？_ 。参考答案1 A 制备牛肉膏蛋白
7、胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。待培养基冷却至 50，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时，进行倒平板。平板冷却510 min 后还需倒置。 2 C金黄色葡萄球菌有很强的致病力，所以在操作时一定要做到安全防范，接种后双手用肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭，以起到杀菌的作用；对接种环进行灼烧也可以杀灭细菌， 防止污染环境； 高压蒸汽灭菌也可杀死培养基中的金黄色葡萄球菌；如果只对带菌培养基进行加热，杀不尽其中的致病菌，因为此菌的耐高温能力很强，会污染环境。3 B对接种环等金属用具进行灼
8、烧灭菌，应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处。4 C5.D6.C7D对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3 mL 甘油瓶中加入1 mL 甘油4名校名 推荐后灭菌，将1 mL 培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20的冷冻箱中保存。 8 D 平板划线操作时要时刻注意两个问题：一是防止杂菌污染；二是要尽可能地将菌种分离。 9(1)牛肉膏蛋白胨水无机盐琼脂蛋白胨牛肉膏(2)比例搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3) 高压蒸汽灭菌锅10012115 30 min废弃(4)适量水(5) 外冷却410 (1) 牛肉膏蛋白胨灭菌(2) 平板划线法稀释涂布平板法蘸取酒精；引燃灭菌(3) 菌液浓度过高；培养过程中被杂菌污染；利用接种针划线时，划下一个区域前没有对接种针进行灭菌处理解析牛肉膏和蛋白胨都是从天然物质中提取出来的，都含有丰富的有机物，可以为微生物提供碳源和氮源。平板划线法和稀释涂布平板法都能使菌体分散开，但如果操作不当，会使分离效果不理想。5