药理活性对茶油制备工艺的影响分析.docx

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1、药理活性对茶油制备工艺的影响分析本文是药学论文,参照植物油的相关国家标准测定不同制备工艺茶油的理化性质,结果显示茶油样品的皂化值偏低,颜色较深;采用 GC-MS 甲酯化法测定不同制备工艺茶油的脂肪酸含量,结果表明茶油样品中总不饱和脂肪酸含量均达到 89%以上(89.14589.815%),可作为一种优质的食用油;采用紫外分光光度法测定不同制备工艺茶油中的多酚含量,结果表明石油醚浸提油样中多酚含量最高为10.74±1.95mg/kg(p热榨油石油醚浸提油正己烷浸提油。.第一章 前言目前,我国常用的茶油制备工艺有:冷榨法、热榨法、溶剂浸提法等方法。冷榨法采用直接压榨,对茶油的品质影响

2、较小,保留了茶油原有的大部分活性物质,但出率较低(吴卫国,2010)。热榨法虽提高了出油率,但在蒸料的过程会导致部分成分的丢失,李志晓等(李志晓,2015)对比浸出法、冷榨法、热榨法和水酶法 4 种工艺发现,热榨工艺茶油中角鲨烯、多酚以及总甾醇含量较高。溶剂浸提法利用有机溶剂提取油料中的油脂,其优点是出油率高,生产成本低,缺点就是会有少量的溶剂留在油样中从而威胁人们的健康,因此此法得到的油样要经过精制来改善其安全性(金超,2013)。张泽鑫等(张泽鑫,2013)通过比较 4 种溶剂(丙酮、正己烷、三氯甲烷和石油醚)浸提对茶油品质的影响,得出石油醚可作为一种较好的溶剂。超临界萃取法和水酶法是一种

3、新型的工艺,能较好地保留茶油的活性物质(如:VE、b-胡萝卜素和过氧化值等),但对技术的要求比较高,应用也不是很广泛。其中水酶法是在水代法的基础上发展起来的,与水代法相比提高了出油率,但是在酶的选择上存在一定的盲目性,而且提取过程中易出现乳化现象,目前尚未找到较好的解决方法(吴红军,2009;方学智,2009;李宁,2013)。因此本研究采用常用的压榨法(冷榨法和热榨法)和溶剂浸提法(石油醚浸提法和正己烷浸提法)制备茶油样品。.第二章 不同工艺茶油的理化性质2.1 实验材料及仪器SHB-III 循环水式真空泵(上海亚荣生化仪器厂);DFY-500C 高速粉碎机(温岭市林大机械有限公司);RE-

4、3000 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);UV-5200紫外可见分光光度计(上海元析仪器有限公司);超低温高速离心机(EppendorfAG 22331 Hamburg);BF-2000 氮气吹干仪(北京八方世纪科技有限公司);WH-2微型旋混合仪(上海沪西分析仪器厂有限公司);WAY-Z 自动阿贝折射仪(上海仪电物理光学仪器有限公司)由表 2-1 可知,不同制备工艺对茶油提取率有显著性影响。其中,与冷榨法相比,其它 3 种制备工艺的提取率均具有显著性差异。热榨法的提取率显著性高于冷榨法(p2.2 实验方法茶油样品进行甲酯化:称取样品 50 mg,加入 2 mL2%氢氧化钠的甲醇溶液,置于

5、80 恒温箱中反应 0.5h,然后加入 2 mL15%三氟化硼的甲醇溶液,在 80 恒温箱中继续回流 2min。取出,加入少量水,迅速冷却至室温。准确加入 2 mL正庚烷,振摇,再加入氯化至水溶液饱和,静置,取上层液到进样瓶中,待用(进样体积 2 μL)。GC 检测参数的设定色谱柱 HP-5MS(60m×0.25 mm,0.25 μm)弹性石英毛细管柱,设置初始温度为 120 保持 2 min,以 4 /min 升温至 220 (保持12 min),再以10 /min升温至310 (持14 min),设置运行时间为62 min;汽化室温度为 250 ;载气为高纯 He(

6、99.999%)柱前压 7.65 psi,载气流量1.0 mL/min,分流,分流比 1001,溶剂延迟时间 7 min。.第三章 不同工艺茶油的抗氧化作用. 173.1 实验材料及仪器 . 173.2 实验方法 . 183.3 实验结果 . 19第四章 不同工艺茶油样品的润肠通便作用. 234.1 实验材料及仪器 . 234.2 实验方法 . 244.3 实验结果 . 25第五章 不同工艺茶油样品的抑菌作用. 295.1 实验材料及仪器 . 295.2 实验方法 . 30.第七章 药用茶油及其软胶囊的制备7.1 实验材料及仪器芦荟;冷榨茶油(自制);芦荟苷(标准品,大连美伦生物技术有限公司)

7、;乙酸(分析纯;天津市富宇精细化工有限公司);甲醇(分析纯;天津市富宇精细化工有限公司);蒸馏水(自制);GF254 硅胶薄层板(青岛鼎康硅胶有限公司);ZODBAX-C18 色谱柱(4.6×250mm5mm,美国安捷伦公司);甲醇(色谱纯,天津市科密欧化学试剂有限公司)1260 高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);ZF-20D 三用紫外分析仪(上海予正仪器设备有限公司);SG8200HPT 超声波清理器(上海冠特超声仪器有限公司);WF-A3000 榨汁机(永康市天歌电器有限公司);AE240 型电子天平(中国梅特勒一托利多仪器厂);SZ-93A 自动双重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪

8、器厂);RG0.8-110B 软胶囊机(浙江富昌机械有限公司)7.2 实验方法相对密度的测定参照 2015 版中国药典(四部)通则 0601:精密称量比重瓶,装满茶油(刚好不溢出),放入温度计置于 20的水浴中,待温度计读数为 20时擦去溢出液体,盖上罩,取出比重瓶擦干,精密称量,得到茶油的重量。相同条件下测定水的重量,茶油与水的重量比值即为相对密度。折光率的测定参照 2015 版中国药典(四部)通则 0622:使用折光仪测定茶油的折光率。酸值的测定参照 2015 版中国药典(四部)通则 0713:取 5g 茶油,精密称定,加入乙醇-乙醚混合液 50mL,用 NaOH 标准溶液滴定,记录消耗

9、NaOH溶液的体积,并做空白对照,然后计算酸值。皂化值的测定参照 2015 版中国药典(四部)通则 0713:取 1g 茶油,精密称定,0.5mol/L 氢氧化钾乙醇溶液 25mL,回流 0.5h,冷却加入 1mL 酚酞指示剂,使用盐酸标准溶液(0.5mol/L)滴定至粉红色刚好褪去,并做空白对照,计算皂化值。.第八章 结论采用琼脂扩散法对不同制备工艺茶油的抑菌作用进行研究,结果表明4 种茶油样品对大肠杆菌有较弱的抑制作用,对其他条件性致病菌和益生菌(粪肠球菌)均无抑制作用。同时采用 96 孔板对茶油的 MIC 进行研究,结果表明不同制备工艺的茶油的 MIC 均大于 500mg/m L;茶油与

10、抗生素联合用药时对抗生素的 MIC 并无影响。结果表明 4 种茶油样品对所选的菌株无抑制作用,且与抗生素联用时并不会对抗生素类药物产生影响。采用 MTT 法测试不同制备工艺茶油的抗肿瘤作用,结果表明 4种茶油样品对肺癌细胞 A549、白血病细胞K562 和人前列腺癌细胞 PC-3 这 3 种肿瘤细胞无抑制作用。 因此考虑将茶油制成软胶囊,由于药典规定的茶油是通过压榨法得到的,对比冷榨法和热榨法的理化性质和药理活性,可知冷榨法为较好的制备工艺。进而将精制茶油与芦荟按照一定的比例制成软胶囊,采用薄层色谱法对软胶囊中的芦荟苷进行定性分析以及采用 HPLC 对软胶囊中的芦荟苷的含量进行测定,结果显示软胶囊中芦荟苷的含量为 20.81g/粒,且稳定性较好。参考文献(略)

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