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1、临床用血前交叉配血不合50例原因的探讨输血治疗是现在临床上一种不可替代的常用治疗手段，在患者出现大量失血的情况时，常采用输血的方式挽救病人的生命。近些年，随着医疗水平的提高，术中需要输血的手术数量也随之增加，临床对于血液的需求量在与日俱增【1】。但是在输血的过程中，也存在一定的安全隐患，安全输血成为输血关注的首要问题。交叉配血，指体外对于血液相容性实验进行模拟，以了解供体血与受体血之间是否存在抗原抗体反应，此方法是在血型鉴定的基础上发展起来的，是临床上常用于确保临床用血安全的方法。在临床工作中，常出现交叉配血不相符合的情况，即供血者的血清可以使患者的红细胞发生凝集或者患者的血清使供血者的红细胞
2、发生凝集。笔者对2013年1月至2014年12月进行交叉配血出现不合的病例进行回顾性分析，现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料 2013年1月至2014年12月在我院进行交叉配血的患者共15352例，其中有50例出现交叉配血不合的情况。50例患者，年龄1958岁，平均年龄为（45.32±2.43）岁，其中男性25例，女性25例。排除有血液病史的患者。1.2 检测试剂与标本 单克隆抗体A、单克隆抗体B（上海血液生物医药公司，（98）卫药准字（血）S-01号）、微凝胶柱卡、不规则抗体筛选卡长春博迅生物技术有限责任公司生产、抗体筛选细胞、抗人球蛋白试剂（上海血液生物医药公司，a/
3、sAANR002-2002）。可以筛选鉴定抗体的不抗凝血，EDTA-Na2抗凝标本血。1.3 检测仪器 微柱凝胶卡专用离心机、孵育器（中山市生科试剂仪器有限公司），TD-2Y多功能离心机（中山市生科试剂仪器有限公司）1.4 实验方法 按照全国临床检验操作规程【3】进行抗人球蛋白检测、交叉配血、红细胞不规则抗体筛选。采用盐水介质配血和抗人球蛋白卡配血法进行交叉配血。为确保实验准确性，两种检测方法均需进行，操作过程按照试剂的说明书进行。1.5 实验结果评价 对于患者出现交叉配血不合格的情况进行分析，若患者红细胞发生凝集是由于患者自身多发骨髓瘤疾病、静脉注射甘露醇、血小板含量过高、白细胞数量过高、纤
4、维蛋白原含量过高或血液样本发生溶血dyLw.nET所导致的假阳性，应在消除干扰后重新进行血液配型。若患者产生红细胞真凝集或自身产生抗体所导致的凝集，配血不合格则不可进行输血。2 结果进行交叉配血的患者15352例，有50例出现交叉配血不合的情况。其中有27例患者是假阳性的凝集，占总数的54%： 4例是由于患者自身患有多发性骨髓瘤疾病，5例患者静脉注射甘露醇造成的假阳性聚集，2例患者血小板含量过高引起假阳性聚集，6例患者血液中白细胞数量过高引起的假阳性，2例患者含有高纤维蛋白原引发的假阳性，7例患者血液样本发生溶血引发的假阳性溶血；10例患者是由于红细胞凝集引发的凝集；3例是由于具有不规则抗体引
5、发的凝集；2例患者是由于药物过敏引起的红细胞凝集；2例患者是发生冷凝集；2例患者是产生了温自身抗体；1例患者是由于移植引发的凝集；1例患者是由于红细胞多凝集；1例患者是发生红细胞全凝集；1例患者配血过程中是供血者DAT抗人球蛋白试验阳性。3 讨论3.1 红细胞凝集造成的假阳性 很多血液配型实验中出现假阳性对实验结果造成干扰，造成这种情况的发生的原因有很多，如抽血所加抗凝剂剂量不足或抗凝剂没有与血液充分混匀、患者自身血液中含有某种特殊的物质会使血液发生凝集等，下面对原因进行具体分析：3.1.1 患者自身血液中含有某种特殊的物质 有些患者患有高免疫球蛋白血症或静脉注射过高分子药物，患有多发性骨髓瘤
6、或巨球蛋白血症、严重的肝脏疾病及霍奇金病等，此类疾病会增加血清中蛋白的分泌量，使体内白蛋白与球蛋白的比例发生失调，交叉配血过程中会使红细胞表面的ζ点位发生降低，使红细胞发生聚集。当静脉中注入高分子量的药物如右旋糖酐、羟乙基淀粉及甘露醇等时，也会增加血液粘稠度出现假阳性的现象。临床上为避免此类情况的发生，常用盐水法进行配血，配血过程中，主管经离心后弃去血浆，加入23滴的生理盐水进行观察。3.1.2 患者血液中的血小板或白细胞的含量升高 此情况常发生在慢性粒细胞性白血病患者中，血细胞计数结果常显示此具有较高的白细胞数。血液标本经离心处理后，有大量的白细胞混在血浆中。由于白细胞具有较大的细
7、胞形态和极弱的变形能力，在使用微柱凝胶卡进行配血的过程中，白细胞常堵塞微孔导致游离的红细胞不能顺利通过微孔到达底部，造成假阳性的结果。若患者具有较高的血小板计数，在交叉配血前对于样本处理过程中，离心的速度、离心的时间都会对结果有影响【7】。临床上对于此类情况的处理办法是在交叉配血前先使患者的血浆中白细胞和血小板充分沉淀，就可以消除其对配血结果的影响，具体处理办法是在患者血清中加入EDTA-NaZ抗凝标本血，2000r离心10min。3.1.3 高纤维蛋白原对于结果的影响 若患者血浆中的纤维蛋白原含量高，在交叉配血的过程中，患者的纤维蛋白原可能被激活转化为纤维蛋白，进而使凝血酶原被激活产生凝血酶
8、造成血液凝集，对配血结果造成影响。临床dyLw.nET对于此类情况的处理办法有以下几种：采用加温孵育以消除纤维蛋白原对于配血结果造成的干扰，将样本方在37的温箱孵育20min，离心再进行后续的配血实验。通过血清交叉配血也可以消除纤维蛋白原对于实验的干扰。3.1.4 样本发生溶血 若采血过程不当，患者患有溶血性贫血等，样本中大量的红细胞碎片在进行微柱凝胶法时会堵住凝胶微孔，红细胞不能完全到达底部造成假阳性。临床对于此类情况的解决办法是改变配血方法，用凝聚胺法进行配血，对于发生凝集的现象，应在显微镜下观察是否真凝集。3.2 红细胞真凝集3.2.1 不规则抗体 在红细胞血型抗体中，存在除了ABO系统
9、以外的同种抗体，其特异性经谱细胞可以得到鉴定。此种抗体常由于进行同种异体输血、妊娠等发生。在对于无偿献血人血型中不规则抗体的筛查中发现，约有0.3%的人有不规则抗体，且女性不规则抗体的检出率明显高于男性。若供体血中含有与受体血不规则抗体相对应的抗原，在交叉配血中会出现凝集的现象，配血时应注意不规则抗体对检验结果的影响。3.2.2 药物影响 有些无输血史、自身免疫系统疾病等，血浆总蛋白、白细胞、血小板及纤维蛋白原等的含量正常，但在检查过程中，出现DAT阳性，对于此类患者要考虑其是否对于某些药物有过敏史。有些患者红细胞膜受到如头孢菌素等的影响，会对蛋白产生非特异性的吸附，导致DAT结果显阳性。增加
10、了配血的难度。出现此类情况，应使患者停药观察，再进行DAT检测，看实验结果是否是阴性。3.3 自身抗体3.3.1 冷凝集红细胞在寒冷的环境下会出现凝集成团的现象，称为冷凝集。主要由于红细胞的表面物质会随温度改变。低温的环境下会使红细胞膜表面的抗原决定簇发生暴露，与相应的抗体发生抗原抗体反应，在人体温度下，抗原抗体之间的相互作用被细胞膜表面的物质所阻断。冷凝集常发生在04的条件下，凝集现象随温度的升高发生降解。临床上对于此类情况的处理办法常采用采血后立即离心，获得红细胞用37的整理盐水洗涤，聚集现象若未得到缓解，45水浴3min，而且实验交叉配血过程要保持在37进行。3.3.2 患有免疫性疾病的
11、患者 在患者的血清及红细胞有自身抗体，这些抗体会使红细胞发生凝集，造成在交配过程中发生凝集。临床对于此类疾病的处理方式有以下几种：与多人ABO血型相同的血液进行配型实验，选择凝集性较弱的供血者的血液作为供体。患者自身抗体干扰ABO血型的测定，若用于急救，可给予O型洗涤红细胞进行输血。3.4 干细胞移植术后植 移患者接受ABO血型不同的干细胞移植后，由于原有血型红细胞的衰亡，受体者的血型会转为供体者的血型，在受体者完全转变为供血者之前，此过程的输血要十分注意，要根据患者的血型抗体制定合理的输血策略。若受体者体内存在供体ABO血型抗原的相应抗体，红细胞血液制品的血型要与受体dyLw.nET者相同，
12、为了使受体的红细胞血型转变成供体者的血型，应先对红细胞经输血柱洗涤。若供体者体内存在受体者ABO血型抗原的抗体，在移植后3周内应随时监测受体者血型抗体的效价，进行DAT实验。若为阳性结果，可以输O型血。若受体体内存在对抗供体者ABO血型的抗原的抗体，也供体者体内存在对抗受体者ABO血型的抗体，当受体者血清完全转变为供体者血清前输血应输O型血。3.5 红细胞出现多凝集或全部凝集的现象 其出现原因与红细胞被细菌及细菌酶等污染或基因变异等有关，导致细胞膜发生改变，T抗原暴露，产生免疫原性。由于在人血清中，几乎都含有T抗体，所以在此种情况下，交叉配血的结果几乎是与所有的供体者血清发生凝集。全凝集的鉴定
13、方法是与婴儿的脐带血或者6个月以内的婴儿血清进行反应，观察是否有凝集现象的产生，因为T抗体在6个月以内的婴儿体内是不存在的，不会出现全凝集的现象。若全凝集是由于疾病引起的，这种情况一般是暂时性的，主要与疾病的恢复有关。3.6 供体血DAT阳性 有实验研究表明，在正常人群中，约有千分之一的供体血呈DAT阳性【2】，其红细胞应尽量避免输给其他的患者。此类情况极易发生输血危险，临床工作中应引起注意。输血前的交叉配血对于临床输血是十分必要的，准确的血液配型可减少由于输血带来的危险，可以有效的保障患者的健康与生命安全。在配血过程中，存在很多对于实验结果有干扰的因素，临床实际工作中，要注意对各种干扰因素的
14、分析、排查及预防，以确保得到准确有效的筛查结果，对临床输血提供有效的依据。参考文献【1】何子毅，刘赴平，车嘉琳.电子交叉配血的现状和展望.临床输血与检验，2009，11（4）：380-381.【2】胡飘萍.交叉配血不合原因分析及处理.实验与检验医学，2013，31（1）：59-60.【3】吴勇，吴远军，陈宝婵.红细胞血型不规则抗体的检测和分析.临床输血与检验，2010，10（14）：343-346.【4】夏兵，戴书萍，裴宝芹.慢性粒细胞白血病致微柱凝胶法交叉配血假阳性1例.中国输血杂志，2011，24（2）：152-153.【5】邹海虹，甘福生.凝聚胺法在交叉配血试验中的应用价值检验医学与临床
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