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1、实验：培养液中酵母菌种群数量的变化,实验原理： 探究问题： 提出假设：,酵母菌可以用液体培养基来培养, 培养液成分、空间、pH、温度等因素 会影响酵母菌种群的增长,培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？,在资源和空间有限的环境中，酵母菌的种群呈“S”型增长,需要准备的材料及用具,探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血细胞计数板、滴管、显微镜等，都是由老师提供,目的要求 1、学习使用血细胞计数板进行微生物计数 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、体会影响种群数量变化的因素,血细胞计数板,血细胞计数板的结构,血细胞计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器
2、，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。,大方格,中方格,小方格,方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。,大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，即1mm1mm0.1mm，其容积为0.1mm3； 大方格的长和宽各为2mm，深度为0.1mm，即2mm2mm0.1mm，其容积为0.4mm3,计数室通常也有两种规格,1625型： 即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格,2516型： 即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。,不管计数室是哪一种
3、构造，其每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。,2、计数,1625型： 一般取四角的四个中方格（100个小方格）计数,2516型： 一般计数四个角和中央的五个中方格（80个小方格）的细胞数。,盖玻片下的培养液厚度为0.1mm，请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数，换算成10ml培养液中酵母菌总数的公式。（大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，即1mm1mm0.1mm，其容积为0.1mm3；) （ 1ml =1cm3=1000mm3） 每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式,（1）16格25格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数 4 106（稀释
4、倍数）,（2）25格x16格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数 4 106（稀释倍数）,大方格的长和宽各为2mm，深度为0.1mm，其容积为0.4mm3。则：每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式（2mm 2mm ） ：,（1）16格25格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数106（稀释倍数）,（2）25格x16格的血细胞计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数106（稀释倍数）,1.通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm1mm0.1mm方格，由400个小方格组成，若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有
5、5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。,540010000102108,2、检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1mm3。,现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻多少个。,n/ 8040010000105n105,怎样进行酵母菌的计数？ 提示：对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖
6、玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数 量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。,注意事项,从试管中吸出培养液进行计数之前，建议将试管震荡几次，目的是什么？ 本实验需要设置对照吗？ 本实验需要做重复实验吗？,目的：使培养液中酵母菌分布均匀，以保证 估算准确，减少误差,不需要，因为本实验在时间上形成自身前后对照,需要，提高实验数据的准确性,注意事项,如果计数时，一个小方格中酵母菌过多，难以计数，应该采取什么措施？ 对于压在小方格界线上的酵母菌，应
7、当怎样计数？,可将培养液稀释一定倍数后再计数。目的是方便计数,计相邻两边及其夹角上的酵母菌,计数方法：方格内部及相邻两边及其夹角上的酵母菌,血细胞计数板的如何清洁？,血细胞计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。,怎样记录结果？怎样表怎样设计？,首先通过显微镜观察，估算出10ml培养液中酵母菌的初始数量（N0）,在此之后，每天同一时间，取出各组试管，用血细胞计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。,（4）计数 计数：首先取样，每 天取样时间大体一致，并要遵守无菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀，正确地使用1mL刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入1支干净的试管里，然后用滴
8、管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后，再放在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中。如 记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应当稀释。 参考1：一次实验数据记录表 参考2：出A、B、C各个处理的曲线图,酵母菌的种群数量在资源和空间有限的情况下是呈S型增长。但之后会下降。,1、探究酵母菌的种群数量实验中，某学生的部分操作过程如下：（1）把酵母菌培养液放置于冰箱中培养，（2）从静置试管中吸取酵母菌培养液计数，（3）到第七天取样计数，请纠正其错误： （1）_ （2）_ （3）_.该同学用25格x16格,其中长和宽各为2mm,深度为0.1mm的血球计数板计数,取五个中格读取酵母菌有40个,其中稀释了10倍,则1ml菌液中所含的酵母菌个数为_,将静置改为轻轻振荡几次.,放在适宜温度下培养.,连续七天取样计数.,5 106,