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1、兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂检测试剂盒仅供研究使用实验原理：试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后， 加入亲和素标记过的。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物、，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（保存）孔配置孔配置配制人份酶标板块板（）半块板（）即用型塑料膜板盖块半块即用型标准品：瓶（）瓶（）按说明书进行稀稀空白对照瓶（）瓶（）即用型标准品稀释缓冲液瓶（）瓶（）即用型生物素标记的抗抗体瓶（）瓶（）即用型亲和链酶素瓶（）瓶（）即
2、用型洗涤缓冲液瓶（）瓶（）按说明书进行稀释底物瓶（）瓶（）即用型底物瓶（）瓶（）即用型终止液瓶（）瓶（）即用型标本稀释液瓶（）瓶（）即用型自备材料蒸馏水。加样器：、。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物、。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂检测试剂盒操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染， 吸
3、取终止液和底物、 液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物应挥发，避免长时间打开盖子。底物对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法、血清操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，离心分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。、血浆、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。离心分钟去除颗粒。、细
4、胞上清液离心分钟去除颗粒和聚合物。、组织匀浆将组织加入适量生理盐水捣碎。离心分钟，取上清液、保存如果样品不立即使用，应将其分成小部分保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：（号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入。（号标准品）的原倍标准品加入的标准品稀释液（号标准品）的号标准品加入的标准品稀释液（号标准品）的号标准品加入的标准品稀释液（号标准品）的号标准品加入的标准品稀释液（
5、号标准品）的号标准品加入的标准品稀释液（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入。洗涤缓冲液（）的稀释：蒸馏水倍稀释。兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂检测试剂盒操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。 不要使液体产生大量的泡沫， 以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。 每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定， 能使用复孔的尽量做复孔。 标本用标本稀释液： 稀释后加入于反应孔内。加入稀释好后的标准品于反应孔、 加入待测样品于反应孔内。 立即加入的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，温育小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡秒，甩去洗涤
6、液，用吸水纸拍干。重复此操作次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入的亲和链酶素，轻轻振荡混匀，温育分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物、各，轻轻振荡混匀，温育分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入终止液，加入终止液后应立即测定结果。在波长处测定各孔的值。建议使用的实验方案标准品浓度（）样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。试剂盒性能. 灵敏度：最小的检测浓度小于号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数值为。. 特异性：不与其它细胞因子反应。. 重复性：板内、板间变异系数均小于。兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂检测试剂盒结果判断与分析、仪器值：于波长的酶标仪上读取各孔的值、以吸光度值为纵坐标（） ，相应的标准品浓度为横坐标（），做得相应的曲线，样品的含量可根据其值由标准曲线换算出相应的浓度。、检测值范围：、敏感度：