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2、,自杀载体构建 阳性菌电转化（不同菌培养条件、电转化程序、电击缓冲液、恢复培养条件不同，需要摸索） 第一次同源重组及筛选 第二次同源重组及筛选 基因缺失株鉴定,电转化仪,电击缓冲液,细菌基因敲除技术资料,五、本公司细菌基因敲除服务优势,独特的供体菌，可以不要求靶细菌具有抗生素抗性。 高效的供体菌接合系统，保证自杀质粒具有高的接合转移效率。 自杀载体为T线性化载体，可直接与纯化PCR产物连接，不需要考虑酶切位点，大大节省客户时间。 优化的自杀载体序列，最大化减少冗余区，从而提高接合转移效率，减少非特异重组的概率。 自杀载体具有自主开发的反向筛选基因vmt，用于替换常规的sacB基因，从而大大增加
3、基于自杀载体基因敲除技术的适用范围，大大减少第二次重组后缺失突变克隆的筛选工作。,细菌基因敲除技术资料,细菌送样前请鉴定确认好菌株的种类，以免基因扩增不能匹配靶基因。 细菌送样前请先测试菌株是否具有氨苄青霉素（Ap）、卡那霉素（Kn）、氯霉素（Cm）、四环素（Tc）抗性，并保证至少不具有其中一种抗性。如需委托抗性测试，另需收费300元单个抗性测试。 请按附件1要求标识需要敲除的基因，以及上下游500bp左右的序列 。 细菌样品以液体或平板划线形式寄出。 在样品寄出前请以电子邮件形式提供培养条件。,六、送样要求,细菌基因敲除技术资料,七、本公司可以提供的其它实验服务,细菌、真菌的多位点分子鉴定 细菌API、Biolog生化鉴定 基因克隆及原核表达 荧光定量PCR分析 DNA侧翼未知序列克隆,细菌基因敲除技术资料,此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！,