(完整word版)RNA提取及反转录合成cDNA具体实验步骤.docx

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一、RNA 提取前的准备分解和防止所用器具及试剂中的RNA分解酶的污染。因此,在实验中必须采取以下措施:1、戴一次性手套;通过以上办法可以防止实验者的汗液、唾液中的二、使用器具、然后在 下高温灭菌120以除去残留的 DEPC,30minRNA三、 试剂配制用于实验用的一次性塑料容器),使用的无菌水需用四、实验操作作台上,打开紫外灯照射20-30min 杀菌。 的收率和质量)。(研磨好的后,静置5min,离心转移上清,避免未破碎的杂蛋白 离心10min。一般在离心后,试管底部会出现沉淀。室温干燥沉淀2-5min(不可以离心或加热干燥,否则中的相关说明),加入适量的RNA水溶解沉淀,必要时可以用移液抢轻轻吹打沉淀,待立即进行反转录,确保RNARNA在的变性以及反转录引物和模板 Total Volume仪上按下列条件进行反转录反应(5) PCR42-50 15-30min95 5min4附件

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