《中西医结合(中医师承制)专业毕业论文[精品论文]中药补骨脂素在自体骨髓移植中的应用——黄世林教授治疗急性粒细胞白血病的经验总结.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《中西医结合(中医师承制)专业毕业论文[精品论文]中药补骨脂素在自体骨髓移植中的应用——黄世林教授治疗急性粒细胞白血病的经验总结.doc（43页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、中西医结合(中医师承制)专业毕业论文 精品论文 中药补骨脂素在自体骨髓移植中的应用黄世林教授治疗急性粒细胞白血病的经验总结关键词：骨髓移植 细胞凋亡 中药补骨脂素 白血病摘要：目的：导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fruits)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultraviolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植
2、(autologous bone marrow transplantation，ABMT)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我单位接受PUVA体外净化ABMT的28例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cyto
3、metry，FCM)测定PUVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、FasL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Caspase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的统计分析。 结果： 1、28例患者净化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.93109个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例
4、获得造血重建，中性粒细胞恢复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至40109/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57，1年复发概率为22.22，2、3、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.39)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年
5、生存率均为71.43；1年生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。 9、ICC检测结果示PUVA可促进细胞Caspase8、Caspas
6、e3蛋白表达。 结论： 1、依据PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在国内外率先将PSO应用于ABMT临床治疗AGL，具有创新性。 2、PUVA体外净化ABMT治疗AGL，对骨髓正常造血细胞损伤较小，可降低复发率，延长无病生存期。 3、PUVA可激活白血病细胞凋亡及与其相关功能基因。 4、PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一是作用于Fas/FasL系统，激活下游的Caspase-8、3，线粒体跨膜电位参与了凋亡的过程。正文内容 目的：导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。
7、他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fruits)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultraviolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植(autologous bone marrow transplantation，ABMT)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我
8、单位接受PUVA体外净化ABMT的28例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cytometry，FCM)测定PUVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、FasL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Caspase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的
9、统计分析。 结果： 1、28例患者净化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.93109个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例获得造血重建，中性粒细胞恢复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至40109/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57
10、，1年复发概率为22.22，2、3、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.39)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年生存率均为71.43；1年生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60
11、、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。 9、ICC检测结果示PUVA可促进细胞Caspase8、Caspase3蛋白表达。 结论： 1、依据PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在国内外率先将PSO应用于ABMT临床治疗AGL，具有创新性。 2、PUVA体外净化ABMT治疗AGL，对骨髓正常造血细胞损伤较小，可降低复发率，延长无病生存期。 3、PUVA可激活白血病细胞凋亡及与其相关功能基因。 4、PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一是作用
12、于Fas/FasL系统，激活下游的Caspase-8、3，线粒体跨膜电位参与了凋亡的过程。目的：导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fruits)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultraviolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植(autologous bone marrow transplantation，ABM
13、T)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我单位接受PUVA体外净化ABMT的28例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cytometry，FCM)测定PUVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、Fa
14、sL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Caspase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的统计分析。 结果： 1、28例患者净化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.93109个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例获得造血重建，中性粒细胞恢复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至401
15、09/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57，1年复发概率为22.22，2、3、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.39)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年生存率均为71.43；1年生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、
16、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。 9、ICC检测结果示PUVA可促进细胞Caspase8、Caspase3蛋白表达。 结论： 1、依据PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在国内外率先
17、将PSO应用于ABMT临床治疗AGL，具有创新性。 2、PUVA体外净化ABMT治疗AGL，对骨髓正常造血细胞损伤较小，可降低复发率，延长无病生存期。 3、PUVA可激活白血病细胞凋亡及与其相关功能基因。 4、PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一是作用于Fas/FasL系统，激活下游的Caspase-8、3，线粒体跨膜电位参与了凋亡的过程。目的：导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fru
18、its)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultraviolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植(autologous bone marrow transplantation，ABMT)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我单位接受PUVA体外净化ABMT的28例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、
19、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cytometry，FCM)测定PUVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、FasL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Caspase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的统计分析。 结果： 1、28例患者净化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.9310
20、9个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例获得造血重建，中性粒细胞恢复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至40109/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57，1年复发概率为22.22，2、3、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52
21、.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.39)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年生存率均为71.43；1年生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、
22、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。 9、ICC检测结果示PUVA可促进细胞Caspase8、Caspase3蛋白表达。 结论： 1、依据PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在国内外率先将PSO应用于ABMT临床治疗AGL，具有创新性。 2、PUVA体外净化ABMT治疗AGL，对骨髓正常造血细胞损伤较小，可降低复发率，延长无病生存期。 3、PUVA可激活白血病细胞凋亡及与其相关功能基因。 4、PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一是作用于Fas/FasL系统，激活下游的Caspase-8、3，线粒体跨膜电位参与了凋亡的过程。目的：
23、导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fruits)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultraviolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植(autologous bone marrow transplantation，ABMT)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研
24、究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我单位接受PUVA体外净化ABMT的28例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cytometry，FCM)测定PUVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、FasL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表
25、达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Caspase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的统计分析。 结果： 1、28例患者净化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.93109个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例获得造血重建，中性粒细胞恢复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至40109/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11
26、例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57，1年复发概率为22.22，2、3、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.39)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年生存率均为71.43；1年生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关
27、的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。 9、ICC检测结果示PUVA可促进细胞Caspase8、Caspase3蛋白表达。 结论： 1、依据PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在国内外率先将PSO应用于ABMT临床治疗AGL，具有创新性。 2、PUVA体外净化ABMT治疗AGL，对骨
28、髓正常造血细胞损伤较小，可降低复发率，延长无病生存期。 3、PUVA可激活白血病细胞凋亡及与其相关功能基因。 4、PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一是作用于Fas/FasL系统，激活下游的Caspase-8、3，线粒体跨膜电位参与了凋亡的过程。目的：导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fruits)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultrav
29、iolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植(autologous bone marrow transplantation，ABMT)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我单位接受PUVA体外净化ABMT的28例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检
30、测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cytometry，FCM)测定PUVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、FasL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Caspase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的统计分析。 结果： 1、28例患者净化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.93109个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为
31、1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例获得造血重建，中性粒细胞恢复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至40109/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57，1年复发概率为22.22，2、3、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.3
32、9)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年生存率均为71.43；1年生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。
33、 9、ICC检测结果示PUVA可促进细胞Caspase8、Caspase3蛋白表达。 结论： 1、依据PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在国内外率先将PSO应用于ABMT临床治疗AGL，具有创新性。 2、PUVA体外净化ABMT治疗AGL，对骨髓正常造血细胞损伤较小，可降低复发率，延长无病生存期。 3、PUVA可激活白血病细胞凋亡及与其相关功能基因。 4、PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一是作用于Fas/FasL系统，激活下游的Caspase-8、3，线粒体跨膜电位参与了凋亡的过程。目的：导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学
34、养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fruits)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultraviolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植(autologous bone marrow transplantation，ABMT)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制
35、。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我单位接受PUVA体外净化ABMT的28例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cytometry，FCM)测定PUVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、FasL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Cas
36、pase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的统计分析。 结果： 1、28例患者净化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.93109个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例获得造血重建，中性粒细胞恢复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至40109/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者
37、中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57，1年复发概率为22.22，2、3、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.39)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年生存率均为71.43；1年生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能
38、基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。 9、ICC检测结果示PUVA可促进细胞Caspase8、Caspase3蛋白表达。 结论： 1、依据PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在国内外率先将PSO应用于ABMT临床治疗AGL，具有创新性。 2、PUVA体外净化ABMT治疗AGL，对骨髓正常造血细胞损伤较小，可降低复发率，延长无病生存期。 3、PUVA可激活白血病细胞凋亡及与其相
39、关功能基因。 4、PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一是作用于Fas/FasL系统，激活下游的Caspase-8、3，线粒体跨膜电位参与了凋亡的过程。目的：导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fruits)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultraviolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植(autologous b
40、one marrow transplantation，ABMT)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我单位接受PUVA体外净化ABMT的28例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cytometry，FCM)测定P
41、UVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、FasL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Caspase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的统计分析。 结果： 1、28例患者净化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.93109个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例获得造血重建，中性粒细胞恢
42、复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至40109/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57，1年复发概率为22.22，2、3、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.39)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年生存率均为71.43；1年
43、生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。 9、ICC检测结果示PUVA可促进细胞Caspase8、Caspase3蛋白表达。 结论： 1
44、、依据PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在国内外率先将PSO应用于ABMT临床治疗AGL，具有创新性。 2、PUVA体外净化ABMT治疗AGL，对骨髓正常造血细胞损伤较小，可降低复发率，延长无病生存期。 3、PUVA可激活白血病细胞凋亡及与其相关功能基因。 4、PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一是作用于Fas/FasL系统，激活下游的Caspase-8、3，线粒体跨膜电位参与了凋亡的过程。目的：导师黄世林教授从军从医60余年，他埋首岐黄，勤求故训，不断地继承发扬，博采众长，至今中西合璧，学养精深，在中医，中西医药结合治疗血液系统疾病等方面造诣颇深。他提出以“驱邪复正”为治则治疗急性白
45、血病，率先在临床中应用纯中药补骨脂(psoralea fruits)提取物补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线(long wave ultraviolet A，UVA)，又称PUVA，体外净化骨髓，采用自体骨髓移植(autologous bone marrow transplantation，ABMT)治疗急性粒细胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面总结临床疗效、系统整理老师可贵的临床经验，并探讨PUVA法抗白血病的部分作用机制。 方法：临床研究分析1991年10月至2005年11月于我单位接受PUVA体外净化ABMT的2
46、8例AGL病例的临床资料。实验研究选择人类白血病HL-60、NB4和K562细胞为研究对象，Affymetrix Human U1332.0基因表达谱芯片检测PUVA对人白血病细胞基因表达的影响；流式细胞仪(flow cytometry，FCM)测定PUVA后24小时细胞线粒体膜电位水平的变化、细胞Fas、FasL蛋白表达情况；荧光定量RT-PCR技术检测PUVA后4小时细胞Fas、FasL mRNA的表达；免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)检测Caspase8、Caspase3蛋白的表达情况。应用SPSS11.5软件进行数据的统计分析。 结果： 1、28例患者净
47、化前后骨髓单个核细胞中位数分别为8.65109和9.93109个(p=0.4180.05)。其中25例净化前后骨髓单个核细胞中CD34+细胞中位百分数分别为1.96和1.77(p=0.5430.05)。 2、28例患者有27例获得造血重建，中性粒细胞恢复至0.5109/L的中位时间为+13天；血小板恢复至40109/L的中位时间为+16天。 3、在预处理过程中，28例患者均有不同程度的胃肠道反应，其中11例患者出现呕吐；在ABMT恢复过程中，3例患者合并感染而出现发热，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位时间7个月复发，总复发率为28.57，1年复发概率为22.22，2、3、
48、5，7、10年复发概率均为29.63。 5、随访中位时间52.5月，28例患者平均生存期为143.7515.63月，95可信区间为(113.11，174.39)；实际1年生存率为82.14，2年生存率为75，3、5、7、10年生存率均为71.43；1年生存概率为81.74，2年生存概率为73.22，3、5、7、10年生存概率均为71.43。 6、基因芯片结果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及与细胞凋亡有关的蛋白代谢、蛋白质结构的折叠与修饰以及细胞表面受体介导的信号转导途径，细胞体现出凋亡及其相关功能基因的激活 7、FCM结果示PUVA作用后24小时HL-60、NB4和K562细胞线粒体膜电位水平、FasL蛋白表达明显下降，Fas蛋白表达明显升高。 8、荧光定量PCR检测结果示PUVA作用后4小时Fas mRNA表达升高，FasLmRNA表达下降。 9、ICC检测