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1、DNA 的粗提取与鉴定实验教学设计年级高二班级高二 1 班审阅组别教师李建荣授课时间2014 年 6 月 20 日课题DNA 的粗提取和鉴定实验课型新授课课标要求掌握 DNA 提取和鉴定的原理和实验操作教学目标知识与能力过程与方法情感、态度与价值观能够说出 DNA 的提取、纯化与鉴定的实验原理通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力通过实验的学习，让学生了解到生物世界的奥秘教学重点教学难点教学方法提取和鉴定 DNA 的原理与实验操作提取和鉴定 DNA 的实验原理与实验操作 讲授法、小组合作法、边讲边练教学程序设计教环节一明标自学学过程及方法过程设计【学习目标】1、 能够说出 DNA 的提取、
2、纯化与鉴定的实验原理2、 通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力3、 通过实验的学习，让学生了解到生物世界的奥秘【新课导入】【自学指导】根据导学案自主阅读选修一内容，归纳提取 DNA 的原理 1、实验原理【自学效果展示】一、DNA 的提取1、提取 DNA 的原理：1二次备课1)、 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度，是随着 NaCl 的浓度的变化而改 变的。当 NaCl 的物质的量浓度为 0.14 molL 时,DNA 的溶解度最低。 利用这一原理，可以使溶解在 NaCl 溶液中的 DNA 析出。1)、 DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶 液。利用这一原理，可以
3、进一步提取出含杂质较少的 DNA。鉴定 DNA 的原理：DNA 遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。2、实验过程：师生共同学习以鸡血为实验材料进行 DNA 的粗提取鸡血细胞做实验材料的原因1 鸡血细胞核的 DNA 含量丰富，材料易得2 鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀 浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长柠檬酸钠作用及作用机理防止血液凝固。柠檬酸钠能与血浆中的 Ca2+发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中 游离的 Ca2+大大减少，血液就不会凝固注意事项鸡血细胞破碎以后释放出的 DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取 过程中
4、为了减少 DNA 的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细 胞液讨论：提取鸡血中的 DNA 时，为什么除去血液中的上清液？ 答：血液分为两部分，一部分是血浆，一部分是血细胞，离心后除去 的上清液是血浆3、过程（结合导学案边做边学）1 提取鸡血细胞的细胞核物质2 溶解细胞核内的 DNA【合作释疑一】（1）为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞会有什么变化？ 答：让细胞内浓度大于周围溶液的浓度，细胞会吸水以至胀破 （2）用玻璃棒搅拌有什么意义？答：用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。注意应沿一个方 向快速搅拌，但也不能太快太猛，防止打碎 DNA（3）滤去的是什么物质？得到的是什么？答：过滤将
5、滤去的是细胞膜和核膜等物质；得到的是与蛋白质等物质 结合在一起的 DNA23 析出含 DNA 的粘稠物4 滤取含 DNA 的粘稠物5 将 DNA 的粘稠物再溶解6 过滤含有 DNA 的氯化钠溶液7 提取含杂质较少的 DNA【合作释疑二】（1）为什么要加 50mL 的冷酒精？答：因为 DNA 不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂 质较少的 DNA 丝状物可以析出,悬浮于溶液中（2）观察丝状物呈什么颜色？答：白色环节二合作释疑环节三点拨拓展过程设计二、DNA 的鉴定【讨论：】（1）比较两个试管中溶液的颜色有什么不同？ 答：有丝状物的试管变成蓝色，另一试管还是原来颜色二次备课教学过程及方
6、法（2）这一鉴定结果说明什么问题？答：提取出的丝状物是 DNA（3）DNA 的直径约为 2010-10 m，实验中出现的丝状物的粗细是否 表示 1 个 DNA 分子直径的大小？答： DNA 分子直径只有 2 nm。丝状物是多个 DNA 子聚在一起形成 的【点拨拓展：】（1）此实验过程中有几次使用蒸馏水？几次过滤，几次析出，几次搅 拌？分别在哪一步？答：整个实验共“两次蒸馏水，三次过滤，两次析出，六次搅拌” 两次蒸馏水第一次：细胞吸水胀破 第一步第二次：使 DNA 黏稠物析出 第三步三次过滤第一次： DNA 存在于滤液里 第一步第二次： DNA 被留在纱布上 第四步第三次： DNA 存在于滤液里
7、 第六步过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出 的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液， 使用的纱布为 12 层两次析出第一次：用 0.14 molL 的 NaCI 溶液含杂质多 第三步第二次：用冷却的 95的第七步六次搅拌：第一、二、三、五、七步其中除第八步外，其余均要朝一个方向搅拌，在第三、五步搅动还要 轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，这样才能保证得到完整的 DNA （2）为什么反复地溶解与析出 DNA，能够去除杂质？答：用高盐浓度的溶液溶解 DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；3教学过程及方法用低盐浓度使 DNA 析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通 过反复溶解与析出 DNA，就能够除去与 DNA 溶解度不同的多种杂质 达标检测 评价指南 3环节四 检测1、 为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞会有什么变化？2、 为什么要加 50mL 的冷酒精？3、 为什么反复地溶解与析出 DNA，能够去除杂质？二次备课课堂小结课后作业板书设计课后反思提取 DNA 的实验中实验原理、实验材料以及实验的注意事项是重点，要求大家必须掌握在 操作中多次用到玻璃棒以及搅拌、加蒸馏水的目的。除此之外导与练习 P52-53 课堂练习4.1.2 提取和鉴定 DNA一、提取 DNA1、原理 2、步骤 3、注意事项二、鉴定 DNA1、原理 2、现象4