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1、交叉配血（凝聚胺法）1. 原 理凝 聚 胺 （ polymatching ） 法 首 先 利 用 低 离 子 介 质 降 低 溶 液 的 离 子 强 度 ， 减 少 红 细 胞 周 围 的 阳 离 子 云 ， 促 进 血 清 （ 浆 ） 中 的 抗 体 与 红 细 胞 相 应 抗 原 结 合 ，再 加 入 带 亚 电 荷 的 高 价 阳 离 子 多 聚 物 - 凝 聚 胺 溶 液 ，中 和 红 细 胞 表 面 的 负 电 荷 ， 缩 短 细 胞 间 距 ， 形 成 可 逆 的 非 特 异 性 聚 集 ， 并 使 IgG 型 抗 体 直 接 凝 集 红 细 胞 。 加 入 中 和 液 后 ， 仅
2、 由 凝 聚 胺 引 起 的 非 特 异 性 聚 集 ， 会 因 电 荷 中 和 而 分 散 ， 而 由 抗 体 介 导 的 特 异 性 凝 集 则 不 会 分 散 。2. 标 本 采 集 ：标 本 种 类 ：抽 取 静 脉 血 3-4ml 待 凝 固 后 分 离 血 清 ，将 细 胞 配 成 5 盐 水 悬 液 将 供 血 者 血 样 以 同 样 方 法 分 离 血 清 ( 浆 ) 和 红 细 胞 悬 液 。标 本 要 求 ： 抗 凝 和 干 燥 管 均 可 ， 如 用 抗 凝 血 主 张 用 EDTAK2 （ mg/dz ） 抗 凝 标 本 应 无 溶 血 ， 切 标 签 齐 全 。3.
3、标 本 储 存 ： 急 诊 标 本 30 分 钟 内 完 成 操 作 ， 标 本 应 至 4 冰 箱 保 存 7 天 。 4. 标 本 运 输 ： 室 温 运 输 。5. 标 本 拒 收 标 准 ： 细 菌 污 染 。 溶 血 标 本 ， 标 签 不 齐 全 不 能 作 测 定 。6. 试 剂 ：试 剂 名 称 ： 凝 聚 胺 试 剂 (polymatching)试 剂 生 产 厂 家 ： ( 台 资 ) 珠 海 贝 索 生 物 技 术 有 限 公 司 。试 剂 组 成 ：试 剂 1. 低 离 子 介 质 (LowLonic Medium ， LIM). 试 剂 打 开 使 用 后 ， 可 置
4、 室 温 贮 存 ， 未 开 封 者 2-25 度 贮 存 ， 有 效 期 为 2 年 。试 剂 2. 凝 聚 胺 溶 液 (PolybreneSolution). 试 剂 3. 重 悬 液 (ResuspendingSolution). 试 剂 4. 生 理 盐 水 。7. 仪 器 ：贮 存 及 有 效 期 同 上 。 贮 存 及 有 效 期 同 上 。血 型 血 清 离 心 机 ： 80-2 型 离 心 机江 苏 金 坛 市 大 地 自 动 仪 器 厂离 心 机 ： 江 苏 金 坛 市 大 地 自 动 仪 器 厂 电 热 恒 温 水 箱 ： 江 苏 金 坛 市 医 疗 器 械 厂 显 微
5、镜 ： XSZ-H3( 中 国 ）8. 操 作 步 骤 及 结 果 判 断 ：供 受 者 红 细 胞 用 生 理 盐 水 配 成 3-5 的 细 胞 悬 液 。 加 样 量 均 为 ： 血 清 2 滴 ， 红 细 胞 悬 液 1 滴 。 主 管 ： 受 血 者 血 清 + 供 者 红 细 胞 悬 液 ; 次 管 ： 受 者 红 细 胞 悬 液 + 供 者 血 清 ;( 阴 阳 对 照 管 另 设 ) 。各 管 分 别 加 低 离 子 介 质 混 匀 置 室 温 1 分 钟 。加 凝 聚 胺 溶 液 2 滴 ，混 匀 ，置 室 温 15 秒 。1000g(3400rpm) ， 离 心 10 秒
6、， 弃 上 清 液 ， 管 底 保 留 约 液 体 。 轻 摇试 管 ， 目 测 红 细 胞 有 无 凝 集 。 如 无 凝 集 ， 则 重 做 前 面 试 验 。加 入 2 滴 重 悬 液 ， 轻 轻 混 合 ， 肉 眼 或 显 微 镜 下 观 察 结 果 。凝 块 在 1 分 钟 内 分 散 ， 试 验 结 果 为 阴 性 ， 供 受 者 血 液 配 合 ; 反 之 ， 如 依 照 为 不 同 强 度 的 凝 块 ， 试 验 结 果 判 为 阳 性 ， 供 受 者 血 液 不 配 合 。 实 验 结 果 必 须 在 3 分 钟 内 判 读 。9. 操 作 性 能 ： 快 速 简 便 ， 特
7、 异 性 强 ， 灵 敏 度 较 高 ， 重 复 性 好 。10. 超 出 范 围 结 果 处 理 ：细 胞 自 凝 ： 在 冬 天 气 温 较 低 时 ， 某 些 病 人 血 清 中 含 有 冷 凝 集 素 而 导 致 交 叉 配 血 假 阳 性 ; 遇 此 现 象 可 用 37 -40 生 理 盐 水 洗 涤 红 细 胞 并 置 37 水 溶 中 轻 轻 摇 动 ， 观 察 结 果 。若 病 人 血 清 ( 血 浆 ) 含 有 肝 素 ， 如 洗 肾 患 者 能 影 响 配 血 ， 须 多 加 4-6 滴polybrene溶 液 以 中 和 肝 素 。红 细 胞 悬 液 为 5 为 宜 ，
8、过 浓 或 过 淡 可 使 抗 原 抗 体 比 例 不 适 当 ，反 应 不 明 显 易 误 判 。各 种 原 因 引 起 的 红 细 胞 溶 解 ，误 判 为 不 凝 集 ，部 分 溶 血 时 ，可 溶 性 血 型 物 质 中 和 了 相 应 的 抗 体 。11. 方 法 局 限 性 ：试 管 ， 滴 管 吸 头 和 玻 片 必 须 清 洁 干 燥 ， 防 止 溶 血 。操 作 方 法 应 按 规 定 ，先 加 血 清 ，然 后 再 加 红 细 胞 悬 液 ，以 便 容 易 核 实 是 否 漏 加 血 清 。离 心 时 间 不 宜 过 长 或 过 短 ，速 度 不 宜 过 快 或 过 慢 ，以 防 假 阳 性 或 假 阴 性 结 果 。 观 察 时 应 注 意 红 细 胞 呈 特 异 性 凝 集 ， 继 发 性 凝 固 及 线 状 排 列 的 区 别 。