《最新08.12.30高二生物《1.2 基因工程的基本操作程序》.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《最新08.12.30高二生物《1.2 基因工程的基本操作程序》.ppt（75页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
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2、非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,补：原核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,补：原核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,启动子,补：原核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,与RNA聚酶结合位点,启动子,补：原核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,与RNA聚酶结合位点,启动子,终止子,补：原核
3、细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,与RNA聚酶结合位点,启动子,终止子,编码区,非编码区,补：原核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,与RNA聚酶结合位点,启动子,终止子,编码区,非编码区,编码蛋白质 ,连续不间断,补：原核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,与RNA聚酶结合位点,启动子,终止子,编码区,非编码区,编码蛋白质 ,连续不间断,不编码蛋白质，有调控作用,补：真核细胞的
4、基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,非编码区,非编码区,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,非编码区,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,非编码区,编码区上游,与RNA聚合酶 结合位点,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,非编码区,启动子,编码区上游,与RNA聚合酶 结合位点,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,非编码区,启动子,终止子,编码区
5、上游,编码区下游,与RNA聚合酶 结合位点,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,非编码区,启动子,终止子,编码区上游,编码区下游,外显子,与RNA聚合酶 结合位点,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,非编码区,启动子,终止子,编码区上游,编码区下游,外显子,内含子,与RNA聚合酶 结合位点,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,编码区,非编码区,非编码区,启动子,终止子,编码区上游,编码区下游,外显子,内含子,与RNA聚合酶 结合位点,IMN,补：真核细胞的基
6、因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,外显子：能编码蛋白质的序列 内含子：不能编码蛋白质的序列,编码区,非编码区,非编码区,启动子,终止子,编码区上游,编码区下游,外显子,内含子,与RNA聚合酶 结合位点,IMN,补：真核细胞的基因结构,1.2 基因工程的基本操作程序,编码区,非编码区,外显子：能编码蛋白质的序列 内含子：不能编码蛋白质的序列,不编码蛋白质，有调控作用,编码区,非编码区,非编码区,启动子,终止子,编码区上游,编码区下游,外显子,内含子,与RNA聚合酶 结合位点,IMN,1.2 基因工程的基本操作程序,一 目的基因的获取,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN
7、,一 目的基因的获取,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,(一)目的基因：,一 目的基因的获取,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,(一)目的基因：,主要指的是编码蛋白质的结构基因；,一 目的基因的获取,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,(一)目的基因：,主要指的是编码蛋白质的结构基因；,也可以是一些具有调控作用的因子。,一 目的基因的获取,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,(一)目的基因：,主要指的是编码蛋白质的结构基因；,也可以是一些具有调控作用的因子。,(二)获取目的基因的常用方法,一 目的基因的获取,1.2 基因工程的基本操作程序,IMN,(一)目的基因：,主要指的
8、是编码蛋白质的结构基因；,也可以是一些具有调控作用的因子。,(二)获取目的基因的常用方法,从自然界已有的物种中分离,用人工的方法合成,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)基因文库的概念,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)基因文库的概念,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)基因文库的概念,将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入 受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种 生物的不同的基因,称为基因文库。,一 目的基因的获取,IMN,1. 从
9、基因文库中获取目的基因,(1)基因文库的概念,将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入 受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种 生物的不同的基因,称为基因文库。,(2)基因组文库和部分基因文库,一 目的基因的获取,IMN,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(2)基因组文库和部分基因文库,包含了一种生物所有的基因的基因文库叫做基 因组文库。,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(2)基因组文库和部分基因文库,包含了一种生物所有的基因的基因文库叫做基 因组文库。 包含了一种生物的一部分基因的基因文库叫做 部分基因文库。,IMN,(3)基因文
10、库的构建,IMN,(3)基因文库的构建,直接分离法,IMN,(3)基因文库的构建,直接分离法,IMN,(3)基因文库的构建,直接分离法,基因组文库的构建,IMN,(3)基因文库的构建,反转录法：,IMN,(3)基因文库的构建,反转录法：,IMN,(3)基因文库的构建,反转录法：,mRNA,cDNA (互补DNA),双链DNA,反转录,DNA聚合酶,IMN,(3)基因文库的构建,反转录法：,mRNA,cDNA (互补DNA),双链DNA,cDNA文库的构建,反转录,DNA聚合酶,IMN,基因组DNA文库与cDNA文库的比较,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(2)如何从
11、基因文库中得到所需要的基因,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(2)如何从基因文库中得到所需要的基因,依据：目的基因的有关信息。,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(2)如何从基因文库中得到所需要的基因,依据：目的基因的有关信息。,如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性。,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,2. 利用PCR技术扩增目的基因,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1) PCR聚合酶链式反应,2. 利用PCR技术
12、扩增目的基因,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1) PCR聚合酶链式反应,是一项生物体外复制特定DNA片段的核酸合成 技术。通过此技术，可在短时间内获取大量的 目的基因。,2. 利用PCR技术扩增目的基因,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)PCR聚合酶链式反应,2. 利用PCR技术扩增目的基因,(2)原理：,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)PCR聚合酶链式反应,2. 利用PCR技术扩增目的基因,(2)原理：,DNA双链复制,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)PCR聚合
13、酶链式反应,2. 利用PCR技术扩增目的基因,(2)原理：,DNA双链复制,(3)前提：,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)PCR聚合酶链式反应,2. 利用PCR技术扩增目的基因,(2)原理：,DNA双链复制,(3)前提：,一段已知目的基因的核苷酸序列,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)PCR聚合酶链式反应,2. 利用PCR技术扩增目的基因,(2)原理：,DNA双链复制,(3)前提：,一段已知目的基因的核苷酸序列,(4)条件：,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,(1)PCR聚合酶链式反应,模板DNA；DN
14、A引物（做启动子）； 四种脱氧核苷酸；DNA聚合酶等。,2. 利用PCR技术扩增目的基因,(2)原理：,DNA双链复制,(3)前提：,一段已知目的基因的核苷酸序列,(4)条件：,IMN,利用PCR技术扩增,IMN,(5) 过程：,变性、退火、延伸三步曲,IMN,(5) 过程：,变性、退火、延伸三步曲,IMN,(5) 过程：,变性、退火、延伸三步曲,变性,IMN,(5) 过程：,变性、退火、延伸三步曲,变性,退火,IMN,(5) 过程：,变性、退火、延伸三步曲,变性,退火,延伸,IMN,(6)方式：,以_方式扩增， 即_（n为扩增循环的次数）,IMN,(6)方式：,以_方式扩增， 即_（n为扩增循环的次数）,指数,IMN,(6)方式：,以_方式扩增， 即_（n为扩增循环的次数）,指数,2n,IMN,(6)方式：,PCR扩增仪,以_方式扩增， 即_（n为扩增循环的次数）,指数,2n,一 目的基因的获取,IMN,1. 从基因文库中获取目的基因,2. 利用PCR技术扩增目的基因,3. 通过DNA合成仪用化学的方法直接人工合成,Thanks!,