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1、空气细菌总数测定中自然沉降法和撞击法的应用与比较浙江兴达安全科技有限公司 311200摘要：目的：对自然沉降法和撞击法在空气细菌总数测 定中的应用效果进行探究。方法：选择酒店室内和室外以及 万级实验室作为研究对象，分别使用自然沉降法与撞击法来 获得三个环境中空气细菌总数情况，对测定结果进行对比分 析。结果：空气细菌总数的自然沉降发和撞击法测定结果存 在正的线性相关关系，在测定灵敏度上，撞击法优于自然沉 降法（P<0.05）,差异有统计学意义。结论：撞击法具有较高 的灵敏度，能够较为准确的反映空气中细菌含量情况，但当 采样时间较长时，其准确度会下降。关键词：自然沉降法；撞击法；空气细菌总数
2、；应用效 果比较随着人们保护意识的不断增强，对空气环境的质量提出 了更高的要求，细菌等空气微生物的危害得到人们的充分重 视，加强空气细菌的检测，对于提高控制质量水平十分重要 1 。本文就对分别选择了酒店室内和室外以及公司无菌实验 室空气环境为研究对象，探讨自然沉降法和撞击法在空气细 菌总数测定中的效果，以提高空气细菌检测工作水平，现报 道如下：1 材料和方法1.1 实验材料仪器准备，空气微生物采样器，型号 TYK-6 型；营养琼脂培养基， 批号 20131125-00 ；培养皿，直径 9cm。1.2 空气环境采样对象：某酒店室内和室外以及公司万 级实验室。1.3 空气细菌总数测定方法自然沉降法
3、测定131.1根据现场大小，选择 35个采样点（室内面积 不足50m2，设置3个采样点；50m2以上的设置5个采样点； 采样点按均匀布点原则布置，室内 3 个采样点设置在室内对 角线四等分的 3 个等分点上， 5 个采样点的按梅花布点。）采样高度为1.21.5m，距离墙壁不小于1m，避开通 风口、通风道等。1 . 3 . 1 . 2将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，分别 自然暴露在空气中， 时间为 5min 和 10min ，盖上皿盖， 采样 完成。将平板倒置放入 35 C37 C恒温培养箱中，培养 48h 后取出，进行菌落计数 4 。撞击法采样测定根据现场大小， 选择采样点（室内面积不足
4、 50m2， 设置 1 个采样点； 50m2200m2 的设置 2个采样点， 200m2 以上的设置 35个采样点；采样点按均匀布点原则布置，室内 1 个采样点的设置在中央， 2 个采样点的设置在室内对 称点上， 3 个采样点设置在室内对角线四等分的3 个等分点上，5个采样点的按梅花布点。）采样高度为1.21.5m，距 离墙壁不小于 1m ，避开通风口、通风道等。132.2使用TYK-6型空气微生物采样器，分别采集5min、 10min 空气细菌样本，采样器参数设定为 28.3L/min ，并将采 样后的平皿倒置于 37 C恒温箱中培养 48h小时4。1.3.3 空气采样质量控制， 为确保采样
5、结果的准确性与可 比性，需要对采样质量采取必要的控制措施，具体包括以下 几方面：1.3.3.1 保证采样条件的一致，两种检测方法必须保证室 内面积的一致、采样高度的一致以及采样点位置的一致，才 能保证采样样品的可靠性。1.3.3.2 测量玻璃平皿的面积，随机抽取本试验中所使用 的玻璃平皿，对其内直径进行测量，并计算平皿的平均面积 和实际面积。1.3.3.3 校正自然沉降法测定数据，自然沉降法测定的细 菌总数，对其误差进行校正时，要以玻璃器皿平均面积与标 准面积的比例作为基础。1.3.3.4 消除检测仪器的误差干扰 在使用撞击法采样时， 要保证不同采样点空气微生物采样器所处高度、所在平面的 相同
6、，并对采样时间进行控制。1.4 空气细菌总数计算，空气细菌总数测定值表示单位是 cfu/? ，也就是每立方米内菌落数量多少。1.4.1 自然沉降法细菌总数计算方法，空气菌落总数=所有平皿菌落数量x 5000/ (平皿面积X平皿暴露时间)。1.4.2 撞击法细菌总数计算方法，空气菌落总数=所有平皿菌落数量x 1000/ (微生物采样器速率x采样时间)。1.5统计学处理 使用统计学软件 SPSS18.0寸本组研究数 据进行分析和处理， P<0.05 表示差异显著，有统计学意义。2 结果2.1 两种检测方法的相关性比较 在本组研究中，以 5min 为标准，自然沉降法和撞击法 测定的空气细菌总数
7、之间，存在着明显的线性正相关关系(r=0.683，P<0.05)。2.2 两种检测方法的测定效果比较 在本组研究当中，在取样 5min 钟时，统计所有样品数据，分别得到三处检测地点的空气细菌总数测定平均值，比 较可知，撞击法比自然沉降法的测定结果更为灵敏 (P<0.05)， 具有统计学意义，详细结果见表 1 。表 1 ：采样 5min 两种检测方法测定结果平均值比较( cfu/? )检测地点 自然沉降法 撞击法 P 值酒店室内 9 47 <0.05酒店室外 35 200 <0.05万级实验室 2 25 <0.053 讨论3.1 空气中细菌总数测定监测目标 有关研究表明，空气 中细菌等微生物的危险程度，会与带菌颗粒物的大小成反向 相关的关系，也就是说，带菌颗粒越小， 其危害程度越大 2。 通常而言，当带菌颗粒直径在 50?m 以上时，基本不会被吸 入人体之内； 当带菌颗粒直径在 10?m-50?m 之间时， 虽然会 被人体吸入， 但会呼吸道所阻挡； 当带菌颗粒直径小于 10um ， 大于 5?m 时，其会被停留在气管和支气管中；只有直径