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1、.WORD完美格式.叶片荧光测量实验报告1. 实验目的2. 实验方法利用PAM100荧光成像系统测量叶绿素荧光3. 实验原理及一些参数的意义荧光的变化反映光合与热耗散的变化。光化学淬灭(Photochemical Quenching ):由于光合作用引起的荧光下降，反映了光合活性的高低。qP=(Fm -Fs)/Fv ' =1-(Fs-Fo ' )/(Fm ' -Fo')(基于“沼泽模型”)qL=(Fm ' -F)/(Fm ' -Fo' ) Fo' /F=qP Fo' /F(基于“湖泊模型”)非光化学淬灭(Non-Photo
2、chemical Quenching):由于热耗散引起的 荧光下降。qN=(Fv-Fv' )/Fv=1-(Fm ' -Fo' )/(Fm-Fo)NPQ=(Fm-Fm' )/Fm'二Fm/Frfi -1，不需测定 Fo',适合野外调查qN 或NPQ反映了植物耗散过剩光能转化为热的能力，反映了植 物的光保护能力。Fv/Fm =(Fm-Fo)/Fm : PS II的最大量子效率，反映植物潜在最大光合能力，高等植物一般在0.8 0.84之间，当植物受到胁迫(Stress ) 时，Fv/Fm显著下降。 PS II = Yield = (Fm ' -
3、Fs)/Fm ' = F/Fm = qP Fv' /Fm' 任一光照状态下PSII的实际量子产量(实际光合能力、实际光合效 率)不需暗适应，不需测定 Fo'，适合野外调查。Y(NPQ)=1-Y(ll)-1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1):调节性能量耗散，PS II 处调节性能量耗散的量子产量。若 Y (NPQ较高，一方面表明植物接 受的光强过剩，另一方面则说明植物仍可以通过调节 (如将过剩光能 耗散为热)来保护自身。Y (NPQ是光保护的重要指标。Y(NO)=1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1):非调节性能量耗散PS II处非调节性能量耗散的量子产量。
4、若 Y(NO较高，则表明 光化学能量转换和保护性的调节机制 (如热耗散)不足以将植物吸收 的光能完全消耗掉。也就是说，入射光强超过了植物能接受的程度。 这时，植物可能已经受到损伤，或者(尽管还未受到损伤)继续照光 的话植物将要受到损伤。Y (NO是光损伤的重要指标。P:光合速率，即相对电子传递速率 rETRPm:最大光合速率，即最大相对电子传递速率rETRmax-初始斜率，反映了光能的利用效率-:光抑制参数Ik二Pm/> ：半饱和光强，反映了样品对强光的耐受能力。测量参数光源配置参数意文测量光作用光饱和脉冲光远红光暗适应Fo7初始荧光土 PSI1反应中心£经过 充分完全昭适应以
5、后）处于完全开 放状态时的茨光产量参数FmVV最大荧光：阳II反应中心处于完 全关闭状态吋的黄光产呈（通常叶 片缠诃酣mitt晴适应以后测得）光适应Fm,7VV光适应下的最犬荧光参数FsJVJ稳态荧光；光照条件于，光届反 应达到衲态稳定时的荧光产量V光适应下最小荧光图4 i叶绿素荧光分析方法示意图.AL:作用光ML:检测光 SP/P+Fsp:饱和脉冲光注：光化学淬灭可以被一种短饱和脉冲光（0.2 1 s ）暂时完全 抑制，剩余的荧光淬灭就是非光化学淬灭。（叶绿素a荧光理论及 其应用 张西斌）4. 实验步骤4.1 Dual-Pam100的操作步骤4.1.1参数调整4.1.1.1 打开Dual-P
6、am100的界面，更改下面参数：Mode:fluo+P700;Mea ns light:fiuo-i nt=1OP700-i nt=5Act light:Act.red.right-int=17Far red light=5Width=40s Sat pulse: P+F+sp-i nt=1O;4.1.1.2点Light，进入界面，再点edit进行下面参数的编辑：Intense 1，4,8,12,14,16,18,19,20Time 2,2,2,2,2,2,2,22之后的全部设置为0；4.1.2进入测定界面开始测定4.1.2.1 回到 slow kinetics 界面点击F0, FH确定Y （
7、II ）值0.8-0.85之间）-点Bal（平衡光系统I , II ）-点Pm待回复灰色）-点start（过4s后）-点Al作用光（过 3min半）-点P+F+sp饱和光（此时一般会观察到红色曲线达到平 衡）过30s左右关掉Al（曲线会下降）再过1min左右（曲线平 稳）点stop 在当前界面点击曲线保存按钮保存曲线。4.1.2.2 回到 light curve 界面点 Bal 点 start （出现对话框 new F0,Fm and Pmdetermindtion 点NC）等曲线绘成后点report保存数据数据保存后手动清空 当前界面数据。4.2荧光成像系统的操作先打开荧光成像仪再打开电脑对
8、应系统将叶片按要求放在叶室；4.2.1 进入setting 界面如下调整参数：Meas.Light- in t=1Freque nce=1;Act.light-i nt=19 widths=O;Image Correctio n=MAXI;Battery=16.3V;Image Tran sformati on 二Rotate 180Gain=1 Damp in g=2Sat.Pulse-i nt=1O No=1 In tervals=30;Slow In ductio n-Delays=40 clocks=20 Duratio ns=315;Absorptivity-RedGai n=30r
9、edInten sity=3NIRInten sity=23:Display二Color Go Speed-PSLimit=50 ;（其他的参数基本不变）4.2.2 Imagi ng 界面点Resets点Add（增加测量部位，可多个添加）宀点Measure Abs（吸 光度点F0，Fm点Report（将该界面右侧荧光参数值全部勾选） t保存相应的数值；4.2.3 回到 Light curve 界面或 kinetics 界面点Start （等到20s）t点Al （过3min半）宀点SAT-Pu/se（打饱 和光）t在当前界面保存图像t在 Report界面保存相关数据；4.测量结果5. 数据分析.技术资料.专业整理.