生物制品PPT课件.ppt

1、第九章第九章生物制品生物制品l目的要求：目的要求：掌握生物制品概念和分类，疫苗定义掌握生物制品概念和分类，疫苗定义和制造方法、研制策略；熟悉生物制品的一般制和制造方法、研制策略；熟悉生物制品的一般制造方法、质量要求与检定；了解重要生物制品的造方法、质量要求与检定；了解重要生物制品的制备方法，核酸疫苗的制备方法。制备方法，核酸疫苗的制备方法。l教学重点：教学重点：疫苗定义和制造方法、重要生物制品疫苗定义和制造方法、重要生物制品的制备方法。的制备方法。l教学难点：教学难点：核酸疫苗的制备方法。核酸疫苗的制备方法。l一、生物制品一、生物制品概述概述l二、疫苗研究及其研制策略二、疫苗研究及其研制策略l

2、三、生物制品的一般制造方法、质量要求三、生物制品的一般制造方法、质量要求与检定与检定l四、重要生物制品的制备四、重要生物制品的制备l五、核酸疫苗五、核酸疫苗第一节：生物制品概述第一节：生物制品概述l1概念及发展沿革概念及发展沿革l2生物制品的分类生物制品的分类l3制造生物制品的生物学及免疫学基础制造生物制品的生物学及免疫学基础1概念及发展沿革概念及发展沿革l1.1概念概念l凡是从微生物及其代谢产物、原虫、动物毒素、人或凡是从微生物及其代谢产物、原虫、动物毒素、人或动物的血液或组织直接加工制成，或用现代生物技术、化动物的血液或组织直接加工制成，或用现代生物技术、化学方法制成，作为预防、治疗、诊断

3、特定传染病或其他有学方法制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的关疾病的免疫制剂免疫制剂。l包括各种包括各种疫苗、抗血清、抗毒素、类毒素、免疫调节剂、疫苗、抗血清、抗毒素、类毒素、免疫调节剂、诊断试剂诊断试剂等。等。1.2从疫苗生产看生物制品的发展从疫苗生产看生物制品的发展l12世纪，中国开始用人痘接种预防天花，从症状轻微的天花世纪，中国开始用人痘接种预防天花，从症状轻微的天花病人身上人工接染到健康儿童，使其通过产生轻微症状的感病人身上人工接染到健康儿童，使其通过产生轻微症状的感染获得免疫力，避免天花引起的严重疾病甚至死亡。染获得免疫力，避免天花引起的严重疾病甚至死亡。l1721年

4、年，人痘接种法传入英国，英国医生，人痘接种法传入英国，英国医生琴纳琴纳注意到感染过注意到感染过牛痘的人不会再感染天花。经过多次实验，琴纳于牛痘的人不会再感染天花。经过多次实验，琴纳于1796年从年从一挤奶女工感染的痘疱中，取出疱浆，接种于一挤奶女工感染的痘疱中，取出疱浆，接种于8岁男孩的手臂岁男孩的手臂上，然后让其接种天花脓疱液，结果该男孩并未染上天花，上，然后让其接种天花脓疱液，结果该男孩并未染上天花，证明其对天花确实具有了免疫力。证明其对天花确实具有了免疫力。l最早的弱毒活病毒疫苗。最早的弱毒活病毒疫苗。1.2从疫苗生产看生物制品的发展从疫苗生产看生物制品的发展l1798年年，医学界正式承

5、认，医学界正式承认“疫苗接种确实是一种行之有效疫苗接种确实是一种行之有效的免疫方法的免疫方法”。l经过一百多年的努力，经过一百多年的努力，1980年年世界卫生组织宣布全球世界卫生组织宣布全球消灭消灭了了天花天花。l1870年年，法国科学家，法国科学家巴斯德巴斯德发明了第一个细菌减毒活疫苗发明了第一个细菌减毒活疫苗鸡霍乱疫苗。巴斯德将此归纳为对动物接种什么细菌鸡霍乱疫苗。巴斯德将此归纳为对动物接种什么细菌就可以使其不受该病菌感染的就可以使其不受该病菌感染的免疫接种原理免疫接种原理，从而奠定了，从而奠定了疫苗的理论基础。因此人们把巴斯德称为疫苗之父。疫苗的理论基础。因此人们把巴斯德称为疫苗之父。1

6、2从疫苗生产看生物制品的发展从疫苗生产看生物制品的发展l第二代疫苗第二代疫苗亚基疫苗的出现，克服了第一代疫苗潜在亚基疫苗的出现，克服了第一代疫苗潜在致病性的问题。致病性的问题。天然或重组成分为主。天然或重组成分为主。l第三代疫苗第三代疫苗核酸疫苗，调动细胞免疫和体液免疫两个核酸疫苗，调动细胞免疫和体液免疫两个系统，追求最佳效果。系统，追求最佳效果。持久，广谱，廉价。持久，广谱，廉价。2生物制品的分类生物制品的分类l1.疫苗等预防类生物制品疫苗等预防类生物制品：细菌类疫苗、病毒类疫苗、类：细菌类疫苗、病毒类疫苗、类毒素和联合疫苗。毒素和联合疫苗。l2.抗毒素及免疫血清：抗毒素及免疫血清：由特定

7、抗原免疫动物所得血浆制成由特定抗原免疫动物所得血浆制成的抗毒素或免疫血清，如破伤风抗毒素、抗狂犬病血清等，的抗毒素或免疫血清，如破伤风抗毒素、抗狂犬病血清等，用于治疗或被动免疫预防。用于治疗或被动免疫预防。l3.血液制品：血液制品：如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子（天然或重组的）、红细胞浓缩物等。（天然或重组的）、红细胞浓缩物等。l4.诊断制品：诊断制品：包括体内诊断制品和体外诊断制品。包括体内诊断制品和体外诊断制品。3制造生物制品的生物学及免疫学基础制造生物制品的生物学及免疫学基础l3.1生物学基础生物学基础lA:细菌的代谢产物细菌的代谢产物。l(

8、1)热原质热原质主要是革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖，注主要是革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖，注入体内能引起发热反应。入体内能引起发热反应。l(2)毒素毒素有内毒素和外毒素两种，均有强烈毒性。有内毒素和外毒素两种，均有强烈毒性。l(3)色素色素许多细菌能产生色素，对其鉴别有用。许多细菌能产生色素，对其鉴别有用。lB:外界环境因素对微生物的影响外界环境因素对微生物的影响一方面可创造有利条件，促进它们的生一方面可创造有利条件，促进它们的生长繁殖，以制备生物制品；另一方面也可长繁殖，以制备生物制品；另一方面也可利用对微生物不利的因素使其发生变异或利用对微生物不利的因素使其发生变异或杀灭之，以更好地为制造生物

9、制品服务。杀灭之，以更好地为制造生物制品服务。l常用的几个概念：常用的几个概念：消毒；灭菌；无菌；防腐。消毒；灭菌；无菌；防腐。3.2免疫学基础免疫学基础3.2.1机体的抗感染免疫机体的抗感染免疫l1)先天性免疫先天性免疫（非特异性免疫）（非特异性免疫）包括：包括：体表屏障体表屏障，如皮肤粘膜屏障；，如皮肤粘膜屏障；血脑屏障血脑屏障，防御病原微生物及其毒性产，防御病原微生物及其毒性产物从血流侵入脑组织；物从血流侵入脑组织；细胞吞噬作用细胞吞噬作用；正常体液和组织中的抗菌物质正常体液和组织中的抗菌物质。l2)特异性免疫特异性免疫：个体在生命过程中接受抗原刺激后主动产生或个体在生命过程中接受抗原刺

10、激后主动产生或被动获得的。又称获得性免疫。被动获得的。又称获得性免疫。包括自动免疫和被动免疫。包括自动免疫和被动免疫。人工免疫人工免疫 人为的给机体输入抗原以调动机体的免疫系统，人为的给机体输入抗原以调动机体的免疫系统，或直接输入免疫血清，使获得某种特殊抵抗力，用以预或直接输入免疫血清，使获得某种特殊抵抗力，用以预防或治疗某些疾病者，称防或治疗某些疾病者，称人工免疫人工免疫。人工主动免疫人工主动免疫(artificialactiveimmunization)：是指是指给机体接种给机体接种抗原性物质抗原性物质如疫苗，类毒素等，刺激机体免如疫苗，类毒素等，刺激机体免疫系统产生特异性免疫力的方法。疫

11、系统产生特异性免疫力的方法。3.2.2人工免疫人工免疫人工被动免疫人工被动免疫(artificial passive immunization):是给人体注射含特异性抗体的是给人体注射含特异性抗体的免疫血清免疫血清或细或细胞因子等制剂，使受者迅速获得特异性免疫力胞因子等制剂，使受者迅速获得特异性免疫力的方法。的方法。主动免疫和被动免疫互补性免疫方法主动免疫和被动免疫互补性免疫方法l主动免疫：抗原接种人体产生主动免疫，主动免疫：抗原接种人体产生主动免疫，一般一个月内产生，持续数年。主动免疫一般一个月内产生，持续数年。主动免疫包括体液免疫（抗体）细胞免疫，如麻疹包括体液免疫（抗体）细胞免疫，如麻疹

12、疫苗、脊髓灰质炎疫苗、百白破疫苗等。疫苗、脊髓灰质炎疫苗、百白破疫苗等。l被动免疫：抗体被动免疫：抗体IgG接种人体后，抗体停留接种人体后，抗体停留体内，当日有效。但只可维持体内，当日有效。但只可维持个月。个月。如抗狂犬血清（免疫蛋白）、破伤风抗毒如抗狂犬血清（免疫蛋白）、破伤风抗毒素（素（TAT）、）、丙种球蛋白、乙肝高效价丙球。丙种球蛋白、乙肝高效价丙球。3.3人工自动免疫类生物制品人工自动免疫类生物制品疫苗疫苗（Vaccine）：）：细菌，病毒，螺旋体，立克次体和类毒素细菌，病毒，螺旋体，立克次体和类毒素等抗原性生物制品统称为疫苗。等抗原性生物制品统称为疫苗。安全安全有效有效实用实用分类

13、分类1）死疫苗）死疫苗（deathvaccine）:选用免疫原性强的微生物标准株选用免疫原性强的微生物标准株经大量培养后，用物理或化学方法将其经大量培养后，用物理或化学方法将其杀死或灭活杀死或灭活而制成的而制成的预防制剂。如霍乱、百日咳、伤寒、钩端螺旋体疫苗。预防制剂。如霍乱、百日咳、伤寒、钩端螺旋体疫苗。优点：主要诱导特异性抗体产生，安全优点：主要诱导特异性抗体产生，安全缺点：不能繁殖，需多次刺激，注射局部和全身反应严重缺点：不能繁殖，需多次刺激，注射局部和全身反应严重2）减毒活疫苗）减毒活疫苗（live-attenuatedVaccine）用人工定向变异或从自然界筛选得到的用人工定向变异或

14、从自然界筛选得到的毒力高度减弱或基毒力高度减弱或基本无毒本无毒的病原微生物制成的预防制剂。的病原微生物制成的预防制剂。优点：一次免疫即可获得长久免疫力，类似自然状态下的优点：一次免疫即可获得长久免疫力，类似自然状态下的轻型或隐性感染。诱导体液免疫和细胞免疫。轻型或隐性感染。诱导体液免疫和细胞免疫。缺点：不易保存，存在回复突变的危险缺点：不易保存，存在回复突变的危险如卡介苗如卡介苗牛痘牛痘麻疹等麻疹等3）类毒素（）类毒素（Toxid）细菌外毒素经细菌外毒素经0.3-0.4%甲醛处理，使其毒性减弱而保留甲醛处理，使其毒性减弱而保留其免疫原性。其免疫原性。白百破：白喉类毒素白百破：白喉类毒素+百日咳

15、杆菌死疫苗百日咳杆菌死疫苗+破伤风类毒素破伤风类毒素4）新型疫苗）新型疫苗（1）亚单位疫苗）亚单位疫苗（SubunitVaccine）是去除病原体中与激发保护性免疫无关的甚至有害的成是去除病原体中与激发保护性免疫无关的甚至有害的成分，保留有效免疫原成分制作的疫苗。分，保留有效免疫原成分制作的疫苗。优点：免疫效果高，优点：免疫效果高，不良反应少不良反应少（2）合成肽疫苗）合成肽疫苗(syntheticpeptidevaccine)将具有保护性免疫力的人工合成肽与适当载体结合后，将具有保护性免疫力的人工合成肽与适当载体结合后，再加入佐剂制成的疫苗。再加入佐剂制成的疫苗。乙肝病毒多肽疫苗乙肝病毒多肽

16、疫苗（3）基因工程疫苗）基因工程疫苗DNA疫苗疫苗（DNAVaccine）是用编码病原体有效免疫原的基因与细菌质粒构建的重是用编码病原体有效免疫原的基因与细菌质粒构建的重组体直接免疫机体，转染宿主细胞，使其表达保护性抗原，组体直接免疫机体，转染宿主细胞，使其表达保护性抗原，从而诱导机体产生特异性免疫的疫苗。从而诱导机体产生特异性免疫的疫苗。优点：体内可持续表达，免疫效果好，维持时间长。优点：体内可持续表达，免疫效果好，维持时间长。缺点：其机制和安全性尚不完全清楚，一些问题有待解决。缺点：其机制和安全性尚不完全清楚，一些问题有待解决。重组抗原疫苗重组抗原疫苗(recombinantantigen

17、vaccine)是利用是利用DNA重组技术制备的只含保护性抗原的纯化疫苗。重组技术制备的只含保护性抗原的纯化疫苗。优点：不含活的病原体和病毒核酸，安全有效，成本低廉。优点：不含活的病原体和病毒核酸，安全有效，成本低廉。目前获准使用的有乙型肝炎疫苗。目前获准使用的有乙型肝炎疫苗。重组载体疫苗重组载体疫苗(recombinantvectorvaccine)是将编码病原体有效免疫原的基因插入是将编码病原体有效免疫原的基因插入载体（减毒的病毒载体（减毒的病毒或细菌疫苗株）或细菌疫苗株）基因组中，接种后，随疫苗株在体内的增殖，基因组中，接种后，随疫苗株在体内的增殖，大量所需的抗原得以表达。如果将多种病原

18、体的有关基因插入大量所需的抗原得以表达。如果将多种病原体的有关基因插入载体，则成为可表达多种保护性抗原的多价疫苗。载体，则成为可表达多种保护性抗原的多价疫苗。载体：载体：痘苗病毒痘苗病毒转基因植物疫苗转基因植物疫苗用转基因方法，将编码有效免疫原的基因导入用转基因方法，将编码有效免疫原的基因导入可食用植物可食用植物细胞细胞的基因组中，免疫原即可在植物的可食用部分稳定的表达的基因组中，免疫原即可在植物的可食用部分稳定的表达和积累，人类和动物通过摄食达到免疫接种的目的。常用的植和积累，人类和动物通过摄食达到免疫接种的目的。常用的植物有蕃茄、马铃薯、香蕉等。物有蕃茄、马铃薯、香蕉等。疫苗和其它药物的不

19、同疫苗和其它药物的不同点点l疫苗是药物，有特殊性：疫苗是药物，有特殊性：1用于预防。用于预防。2用于健康人群，尤其是儿童。用于健康人群，尤其是儿童。3用途不是减轻症状而是产生免疫。用途不是减轻症状而是产生免疫。4使用后人群中发病死亡减少，消灭疾病。使用后人群中发病死亡减少，消灭疾病。减毒活疫苗减毒活疫苗l减毒活疫苗是模拟自然感染后免疫过程，减毒活疫苗是模拟自然感染后免疫过程，通过不同方法使病原体的毒力、致病性减通过不同方法使病原体的毒力、致病性减弱或丧失后获得一完整的微生物组成的疫弱或丧失后获得一完整的微生物组成的疫苗制品。苗制品。l它引起机体感染但不发生临床症状。其免它引起机体感染但不发生临

20、床症状。其免疫原性能刺激机体免疫系统产生免疫反应。疫原性能刺激机体免疫系统产生免疫反应。l如牛痘、麻疹苗等。如牛痘、麻疹苗等。灭活疫苗灭活疫苗l优点：安全、有效。优点：安全、有效。l灭活疫苗是将病原体培养繁殖后杀死病原灭活疫苗是将病原体培养繁殖后杀死病原体，再进行纯化处理使之完全失去感染性，体，再进行纯化处理使之完全失去感染性，保留病原体的免疫原性。保留病原体的免疫原性。l如甲肝灭活疫苗、乙脑灭活疫苗、脊髓灰如甲肝灭活疫苗、乙脑灭活疫苗、脊髓灰质炎灭活疫苗等。质炎灭活疫苗等。脊髓灰质炎灭活疫苗脊髓灰质炎灭活疫苗l1953年由美国年由美国Salk制成并在美国欧洲国家应用。制成并在美国欧洲国家应用

21、能产生高的血清中和抗体能产生高的血清中和抗体,但防止野毒株病人发生但防止野毒株病人发生的效果不如活疫苗。的效果不如活疫苗。l20世纪世纪80年代后制成增效脊髓灰质炎灭活疫苗，年代后制成增效脊髓灰质炎灭活疫苗，接种接种3个剂量后中和抗体达个剂量后中和抗体达99-100%。l现在美国已由使用脊灰活疫苗改为脊髓灰质炎灭现在美国已由使用脊灰活疫苗改为脊髓灰质炎灭活疫苗。常规免疫活疫苗。常规免疫3针间隔针间隔6-8周。最后周。最后1针间隔针间隔6-12个月，可加强个月，可加强1、2次。次。甲肝灭活疫苗甲肝灭活疫苗l甲肝病毒分离后用细胞株增殖，再用甲醛甲肝病毒分离后用细胞株增殖，再用甲醛灭活、纯化。灭活

22、纯化。l现有三个外国公司生产，而国内柯兴公司现有三个外国公司生产，而国内柯兴公司也生产了抗体阳转率也生产了抗体阳转率100%的甲肝灭活疫苗。的甲肝灭活疫苗。病毒的变异病毒的变异l由于流感病毒野毒株变异最多，分为甲乙由于流感病毒野毒株变异最多，分为甲乙丙三大型，其中甲和甲型曾造成流感丙三大型，其中甲和甲型曾造成流感大流行。大流行。WHO世界流感监测中心不断分离世界流感监测中心不断分离流感病毒的毒株，每年两次向疫苗的生产流感病毒的毒株，每年两次向疫苗的生产单位提供新的流感病毒株。因此疫苗生产单位提供新的流感病毒株。因此疫苗生产单位已经适应这种情况。单位已经适应这种情况。l麻疹病毒的变异麻疹病毒的

23、变异l至年代一些国家分离的麻疹野毒株与至年代一些国家分离的麻疹野毒株与至年代（用疫苗前）的野毒株相比抗原性至年代（用疫苗前）的野毒株相比抗原性和生物特性上有差异。和生物特性上有差异。l年代病毒野毒株无血凝和吸附特性。年代病毒野毒株无血凝和吸附特性。l年代病毒野毒株不能在年代病毒野毒株不能在VeroBsc-1细胞细胞中培养。中培养。l年代病毒野毒株年代病毒野毒株HN蛋白基因有漂移，其蛋白基因有漂移，其中中H蛋白和疫苗株相比有个核苷酸变异，蛋白和疫苗株相比有个核苷酸变异，N蛋蛋白和疫苗株相比有个核苷酸变异。白和疫苗株相比有个核苷酸变异。l4我国流行的我国流行的H及及A基因组病毒基因组病毒,H1H2

24、为大为大多数。多数。l现行麻疹疫苗免疫血清能中和所有已现行麻疹疫苗免疫血清能中和所有已知的病毒基因型，说明现有麻疹疫苗株仍知的病毒基因型，说明现有麻疹疫苗株仍对所有麻疹病毒基因型具有保护作用。对所有麻疹病毒基因型具有保护作用。（一）特异性免疫治疗剂（一）特异性免疫治疗剂1）抗毒素）抗毒素 利用类病毒注射动物，产生利用类病毒注射动物，产生特异性抗体特异性抗体，经采血、分，经采血、分离、纯化后制成的产品。离、纯化后制成的产品。2）抗病毒血清）抗病毒血清 用病毒作抗原免疫动物制备的含有抗体的用病毒作抗原免疫动物制备的含有抗体的血清血清生物制品。生物制品。3.4人工被动免疫类生物制品人工被动免疫类生物

25、制品还有：抗菌血清、免疫球蛋白、免疫核糖核酸等还有：抗菌血清、免疫球蛋白、免疫核糖核酸等（二）非特异性免疫治疗剂（二）非特异性免疫治疗剂-免疫调节剂免疫调节剂1）转移因子）转移因子2）白细胞介素）白细胞介素6）小棒杆菌）小棒杆菌3）胸腺素）胸腺素4）细胞毒）细胞毒T细胞细胞5）卡介苗）卡介苗7）干扰素）干扰素第二节：疫苗研究及其研制策略第二节：疫苗研究及其研制策略l疫苗疫苗的现代的现代定义定义为：一切通过注射或黏膜为：一切通过注射或黏膜途径接种，可以诱导机体产生针对特定致途径接种，可以诱导机体产生针对特定致病原的特异性抗体或细胞免疫，从而使机病原的特异性抗体或细胞免疫，从而使机体获得体获得保护

26、或消灭该致病原保护或消灭该致病原能力的生物制能力的生物制品统称为疫苗，包括蛋白质、多糖、核酸、品统称为疫苗，包括蛋白质、多糖、核酸、活载体或感染因子。活载体或感染因子。l预防用生物制品按所用材料一般分预防用生物制品按所用材料一般分细菌性细菌性疫苗、病毒性疫苗及类毒素疫苗、病毒性疫苗及类毒素三大类。三大类。1接种目的及作用接种目的及作用l接种目的接种目的防止病原体进入机体防止病原体进入机体建立抗感染免疫建立抗感染免疫l口服或注射疫苗口服或注射疫苗激发宿主产生抗病原体的抗体激发宿主产生抗病原体的抗体暴露于病原体也不会生病暴露于病原体也不会生病进入机体的病原体被抗体失活进入机体的病原体被抗体失活2疫

27、苗的种类疫苗的种类l从疫苗研制技术又可将疫苗分为从疫苗研制技术又可将疫苗分为传统疫苗传统疫苗和和新型疫苗新型疫苗两两大类。大类。l2.1常规疫苗常规疫苗l1）疫苗）疫苗（1）活疫苗：减毒活疫苗（卡介苗）活疫苗：减毒活疫苗（卡介苗）（2）死疫苗（百日咳、霍乱等）死疫苗（百日咳、霍乱等）l2）类毒素）类毒素破伤风类毒素、白喉类毒素破伤风类毒素、白喉类毒素l3）自身疫苗）自身疫苗由病人自身病灶中分离出的病原体制成的死疫苗。由病人自身病灶中分离出的病原体制成的死疫苗。2.2新型疫苗新型疫苗l1）亚单位疫苗）亚单位疫苗一类保留病原体中有效免疫原成分，而除去无效成一类保留病原体中有效免疫原成分，而除去无效

28、成分和有毒成分的化学纯疫苗。分和有毒成分的化学纯疫苗。乙肝亚单位疫苗乙肝亚单位疫苗l2）化学疫苗）化学疫苗用化学方法提取病原体中有效免疫原成分体制成的用化学方法提取病原体中有效免疫原成分体制成的化学纯疫苗，比亚单位疫苗更为简单。化学纯疫苗，比亚单位疫苗更为简单。肺炎链球菌荚膜多糖肺炎链球菌荚膜多糖l3）多肽疫苗）多肽疫苗人工合成的高免疫原性多肽片段制成的疫苗。人工合成的高免疫原性多肽片段制成的疫苗。乙型肝炎表面抗原的各种合成肽段乙型肝炎表面抗原的各种合成肽段l4）基因工程疫苗）基因工程疫苗利用基因工程构建重组基因序列，表达免疫原性强、利用基因工程构建重组基因序列，表达免疫原性强、无毒性的多肽制

29、成的疫苗。无毒性的多肽制成的疫苗。乙型肝炎基因工程疫苗乙型肝炎基因工程疫苗l5）DNA疫苗疫苗用编码抗原基因制成的疫苗。用编码抗原基因制成的疫苗。流感病毒核蛋白流感病毒核蛋白DNA疫苗疫苗l通常也习惯地将通常也习惯地将遗传重组疫苗、合成肽疫苗和抗独特遗传重组疫苗、合成肽疫苗和抗独特型抗体疫苗型抗体疫苗包括在新型疫苗范畴。包括在新型疫苗范畴。抗病血清抗病血清l抗病血清是抗菌，抗病毒、抗毒血清的总称。抗病血清是抗菌，抗病毒、抗毒血清的总称。l凡是用细菌免疫马或其他大动物所取得的免疫血清，称为凡是用细菌免疫马或其他大动物所取得的免疫血清，称为抗菌血清。抗菌血清。l凡是用病毒免疫马或其他大动物，所取得

30、的免疫血清，称凡是用病毒免疫马或其他大动物，所取得的免疫血清，称为抗病毒血清。为抗病毒血清。l凡是用细菌类毒素或毒素免疫马或其他大动物，所取得的凡是用细菌类毒素或毒素免疫马或其他大动物，所取得的免疫血清、称为抗毒素。（或抗毒血清）免疫血清、称为抗毒素。（或抗毒血清）3疫苗的基本成分、性质和特征疫苗的基本成分、性质和特征l3.1疫苗的基本成分疫苗的基本成分疫苗的基本成分疫苗的基本成分包括包括抗原、佐剂、防腐剂、抗原、佐剂、防腐剂、稳定剂、灭活剂稳定剂、灭活剂及其他活性成分。及其他活性成分。抗原抗原，是疫苗最主要的有效活性成分，它，是疫苗最主要的有效活性成分，它决定了疫苗的特异免疫原性。构成抗原的

31、三个决定了疫苗的特异免疫原性。构成抗原的三个基本条件：基本条件：异物性异物性、特异性特异性和一定的和一定的理化特性理化特性。l可用作抗原的生物活性物质可用作抗原的生物活性物质有：有：灭活病毒或细菌、灭活病毒或细菌、活病毒活病毒或细菌通过实验室多次传代得到的或细菌通过实验室多次传代得到的减毒株、减毒株、病毒或菌体提纯物、有效蛋白成分、类毒素、细病毒或菌体提纯物、有效蛋白成分、类毒素、细菌多糖、合成多肽菌多糖、合成多肽以及近年来发展以及近年来发展DNA疫苗所用疫苗所用的的核酸核酸等。等。l佐剂佐剂，能，能增强增强抗原的抗原的特异性免疫应答特异性免疫应答。目前常用。目前常用的有的有铝佐剂铝佐剂和和油

32、制佐剂油制佐剂。l3.2疫苗的基本性质疫苗的基本性质包括包括免疫原性、安全性、稳定性免疫原性、安全性、稳定性。l免疫原性免疫原性：指疫苗接种进入机体后引起机体产生：指疫苗接种进入机体后引起机体产生免疫应答的强度和持续时间。免疫应答的强度和持续时间。l影响的因素影响的因素包括机体的因素和疫苗的因素。从疫包括机体的因素和疫苗的因素。从疫苗的角度看是由疫苗的抗原决定的。包括苗的角度看是由疫苗的抗原决定的。包括抗原的抗原的强弱、大小和稳定性以及抗原的理化性质强弱、大小和稳定性以及抗原的理化性质。4疫苗制备的基本过程疫苗制备的基本过程l疫苗因种类不同，其制备方法也不相同，但总的来疫苗因种类不同，其制备方

33、法也不相同，但总的来说，说，经典疫苗制备经典疫苗制备的基本过程包括：的基本过程包括：选择适宜的培选择适宜的培养基或细胞，进行菌、毒株大量繁殖，收集培养物，养基或细胞，进行菌、毒株大量繁殖，收集培养物，提纯，半成品检定，稀释，分装，成品检定提纯，半成品检定，稀释，分装，成品检定。l基因工程技术使疫苗研制方法发生了革命性的变化。基因工程技术使疫苗研制方法发生了革命性的变化。5疫苗的研制策略疫苗的研制策略l当代疫苗当代疫苗u灭活疫苗灭活疫苗%杀死的病原体杀死的病原体u减活疫苗减活疫苗%活的，无毒力的病原体活的，无毒力的病原体生产过程生产过程u组织培养病原体组织培养病原体u纯化病原体纯化病原体u失活或

34、减活失活或减活%并没失去激发免疫的能力并没失去激发免疫的能力局限性局限性u不是所有的病原体都能用组织培养不是所有的病原体都能用组织培养u细胞培养价格昂贵细胞培养价格昂贵u产量、生产率低产量、生产率低u需要特殊的安全预防措施需要特殊的安全预防措施u失活或减活都必须失活或减活都必须100u保存期限短，需低温保藏保存期限短，需低温保藏u不能预防所有的疾病不能预防所有的疾病rDNA技术对疫苗研究的促进技术对疫苗研究的促进u减活疫苗通过清除致病基因实现减活疫苗通过清除致病基因实现u基因工程疫苗，无致病性载体携带致基因工程疫苗，无致病性载体携带致病病原体的抗原性决定簇病病原体的抗原性决定簇u非组织培养，克

35、隆基因和过量表达蛋非组织培养，克隆基因和过量表达蛋白作为疫苗（亚单位疫苗）白作为疫苗（亚单位疫苗）多种基因工程疫苗研制策略多种基因工程疫苗研制策略u亚单位疫苗亚单位疫苗u肽疫苗肽疫苗u减活疫苗减活疫苗uDNA疫苗疫苗5.1亚单位疫苗亚单位疫苗u通常是整个病原体制备减活或灭活疫苗通常是整个病原体制备减活或灭活疫苗u免疫反应的激发通常是通过病原体的外免疫反应的激发通常是通过病原体的外壳蛋白起作用壳蛋白起作用动物病毒动物病毒？是不是需要完整的病原体亚单位疫苗亚单位疫苗u激发免疫反应仅仅需要病原体外激发免疫反应仅仅需要病原体外壳蛋白壳蛋白u利用病原体的某些成分而不是整利用病原体的某些成分而不是整个病原

36、体是个病原体是“亚基亚基”疫苗。疫苗。亚单位疫苗亚单位疫苗u优点优点%采用纯化蛋白保证疫苗安全性和稳采用纯化蛋白保证疫苗安全性和稳定性定性u缺点缺点%纯化成本高纯化成本高%分离的蛋白不具有与病原体相同的分离的蛋白不具有与病原体相同的构象，因此可能没有相应的抗原性构象，因此可能没有相应的抗原性u单纯疱疹病毒（单纯疱疹病毒（HSV）%性传播疾病性传播疾病%潜在致癌性潜在致癌性%脑炎和严重的眼部感染脑炎和严重的眼部感染u亚单位疫苗可能是最有效的亚单位疫苗可能是最有效的%减活或失活率必须是减活或失活率必须是100，否，否则，人群有感染危险则，人群有感染危险亚单位疫苗（亚单位疫苗（example）5.2

37、减活疫苗减活疫苗（Attenuated）u减活疫苗减活疫苗%通常更有效（较前两种疫苗）通常更有效（较前两种疫苗）%但不能含有任何毒力但不能含有任何毒力我国乙肝疫苗现状及存在的问题我国乙肝疫苗现状及存在的问题乙肝疫苗乙肝疫苗第一代乙肝疫苗，第一代乙肝疫苗，属血源疫苗，由无症状乙型肝炎表面抗原阳性者的属血源疫苗，由无症状乙型肝炎表面抗原阳性者的血浆制备而得。因提取工艺不同，疫苗所含成分也有一定的差别，但血浆制备而得。因提取工艺不同，疫苗所含成分也有一定的差别，但均含有均含有22nm小颗粒乙型肝炎表面抗原。血源疫苗曾对防止乙肝流行发小颗粒乙型肝炎表面抗原。血源疫苗曾对防止乙肝流行发挥了重要作用，但是

38、疫苗的成本高、生产周期长挥了重要作用，但是，疫苗的成本高、生产周期长(65周周)，还存在传，还存在传播艾滋病和肝炎的潜在危险。播艾滋病和肝炎的潜在危险。第二代乙肝疫苗，第二代乙肝疫苗，将编码乙型肝炎表面抗原的基因在哺乳动物细胞或将编码乙型肝炎表面抗原的基因在哺乳动物细胞或酵母菌中高效表达，得到乙肝基因工程疫苗，接种者中约有酵母菌中高效表达，得到乙肝基因工程疫苗，接种者中约有10%不产不产生应答反应；另有生应答反应；另有5%15%接种者属低应答者，低应答者不能获得完接种者属低应答者，低应答者不能获得完全保护作用。全保护作用。第三代乙肝疫苗，第三代乙肝疫苗，乙肝病毒包膜的抗原性主要由乙肝病毒包膜

39、的抗原性主要由S抗原和前抗原和前S1、前、前S2抗抗原组成组成，美国原组成组成，美国Medeva制药公司利用基因重组技术，在哺乳动物细制药公司利用基因重组技术，在哺乳动物细胞成功地表达了包含胞成功地表达了包含S抗原和前抗原和前S1、前、前S2抗原的第三代重组疫苗，抗原的第三代重组疫苗，1998年用于临床，能诱导更高的血清阳转率和抗体应答反应。年用于临床，能诱导更高的血清阳转率和抗体应答反应。新生婴儿，特别是母亲为乙型肝炎表面抗原阳性的新生婴儿，产后应新生婴儿，特别是母亲为乙型肝炎表面抗原阳性的新生婴儿，产后应立即给婴儿接种乙肝疫苗，学龄前和学龄儿童亦应接种。一般人群立即给婴儿接种乙肝疫苗，学龄

40、前和学龄儿童亦应接种。一般人群(包包括新生婴儿括新生婴儿)正常接种：上臂三角肌肌肉注射，全程注射三次，每次注正常接种：上臂三角肌肌肉注射，全程注射三次，每次注射射10g，第一次注射后隔三个月和六个月注射第二次和第三次。，第一次注射后隔三个月和六个月注射第二次和第三次。一、国内乙肝疫苗生产和质量管理概况一、国内乙肝疫苗生产和质量管理概况1预防性疫苗种类和剂量预防性疫苗种类和剂量酿酒酵母酿酒酵母5g/剂剂/0.5ml、10g/剂剂/1.0ml汉逊酵母汉逊酵母10g/剂剂/1.0ml,CHO疫苗疫苗10g/剂剂/1.0ml、20g/剂剂/1.0ml进口疫苗进口疫苗:GSK10g/剂剂/0.5ml、2

41、0g/剂剂/1.0ml联合疫苗：联合疫苗：GSK、北京科兴北京科兴问题：种类多；但缺乏应用于特殊人群的剂型和加免程序（如肾透析病人的剂量等）2、国内上市前疫苗、国内上市前疫苗预防性疫苗：预防性疫苗：1.含前含前-S1CHO乙肝疫苗乙肝疫苗临床前临床前2.汉逊酵母改变工艺疫苗汉逊酵母改变工艺疫苗完成临床完成临床3.进口注册疫苗进口注册疫苗:韩国绿十字公司汉逊酵母疫苗韩国绿十字公司汉逊酵母疫苗临床前临床前治疗性疫苗：治疗性疫苗：免疫复合物疫苗免疫复合物疫苗60g/剂剂/1.0mlII期期多肽疫苗多肽疫苗II期期高剂量疫苗高剂量疫苗60g/剂剂/1.0mlII期期表表我国乙肝疫苗生产厂家一览表我国乙

42、肝疫苗生产厂家一览表名称名称地址地址种类种类北京天坛生物制品股份有限公司北京天坛生物制品股份有限公司酿酒酵母疫苗酿酒酵母疫苗北京市朝阳区北京市朝阳区3间房间房深圳康泰生物制品股份有限公司深圳康泰生物制品股份有限公司酿酒酵母疫苗酿酒酵母疫苗深圳市南头科技工业园区深圳市南头科技工业园区大连高新生物制药有限公司大连高新生物制药有限公司汉逊酵母疫苗汉逊酵母疫苗大连经济技术开发区铁山西路大连经济技术开发区铁山西路17号号长春生物制品研究所长春生物制品研究所CHO疫苗疫苗长春市人民大街长春市人民大街1485号号兰州生物制品研究所兰州生物制品研究所CHO疫苗疫苗兰州市盐场路兰州市盐场路118号号武汉生物制品

43、研究所武汉生物制品研究所CHO疫苗疫苗武汉市临江路武汉市临江路11号号成都生物制品研究所成都生物制品研究所CHO疫苗疫苗成都外东包江桥成都外东包江桥华尔盾生物技术有限公司华尔盾生物技术有限公司CHO疫苗疫苗北京市海淀区上地开拓路北京市海淀区上地开拓路5号号华北制药金坦生物技术股份有限公司华北制药金坦生物技术股份有限公司CHO疫苗疫苗石家庄国家高新技术开发区天山大石家庄国家高新技术开发区天山大街街106号号问题：厂家多、规模小、竞争降价、不利于质量保证3、生产厂家和品种4、乙肝疫苗生产和质量管理、乙肝疫苗生产和质量管理生产生产:2004年度共生产乙肝疫苗年度共生产乙肝疫苗186批，其中酵母疫苗批

44、其中酵母疫苗147批，批，1亿亿568万支；万支；CHO疫苗疫苗39批批1344万支。该年度我国生产的疫苗万支。该年度我国生产的疫苗88.72%为酵母乙肝疫为酵母乙肝疫苗。苗。质量管理：国家一级管理质量管理：国家一级管理疫苗批签发：疫苗批签发：起始时间起始时间:2002年年1月月范围范围:国内及进口注册的每一批乙肝疫苗国内及进口注册的每一批乙肝疫苗(用于上市销售用于上市销售)内容内容:资料审核资料审核+部分检验部分检验监督检验：成品全检监督检验：成品全检二、现有乙肝疫苗存在的问题二、现有乙肝疫苗存在的问题(一一).现有疫苗剂量和免疫策略函待改进现有疫苗剂量和免疫策略函待改进(二二).临床试验

45、不规范临床试验不规范(三三).首针及时率和全程覆盖率急待提高首针及时率和全程覆盖率急待提高(四四).疫苗企业注册标准和说明书存在的问题疫苗企业注册标准和说明书存在的问题(五五).不良反应不良反应(SAE)无有效的报告、无有效的报告、鉴别、处理以及反馈制鉴别、处理以及反馈制度；度；(网络网络)(六六).加强科研加强科研成人与儿童乙肝疫苗免疫持久性比较成人与儿童乙肝疫苗免疫持久性比较乙肝疫苗免疫后抗乙肝疫苗免疫后抗HBs阳转率与年龄的关系阳转率与年龄的关系免后免后儿童儿童成人成人时间时间阳转率（阳转率（%）阳转率（阳转率（%）797.3483.31290.0069.62477.9932.73671

46、4420.84865.696064.54中华计划免疫杂志，2003；9（6）中国公共卫生杂志,2003;19(12)成人乙肝疫苗免疫效果成人乙肝疫苗免疫效果乙肝疫苗免疫后抗乙肝疫苗免疫后抗HBs阳转率与年龄的关系阳转率与年龄的关系免疫后免疫后35岁岁35岁岁时间（月）人数时间（月）人数阳转数（阳转数（%）人数人数阳转数（阳转数（%）3632336.5571933.37615488.5534177.412625283.9542851.9*24542138.9531426.436501428.046613.0中华预防医学杂志，2002；36（6）常用疫苗介绍常用疫苗介绍一、一、冻干卡介苗冻干卡介

47、苗l疫疫苗苗性性质质：减减毒毒活活疫疫苗苗，冻冻干干卡卡介介苗苗外外观观为为白白色色疏疏松松体体或或粉粉末末，按按规规定定量量加加入入稀稀释释液液后后，应于应于3分钟内完全溶解成均匀悬液。分钟内完全溶解成均匀悬液。l规格：规格：5人份人份/安瓿。安瓿。l接接种种对对象象：出出生生3个个月月以以内内的的婴婴儿儿或或用用PPD试试验验阴阴性性的的儿儿童童（PPD试试验验后后72小小时时局局部硬结直径在部硬结直径在5mm以下者为阴性。）以下者为阴性。）二、脊髓灰质炎疫苗二、脊髓灰质炎疫苗l疫苗性质：减毒活疫苗，为三价糖丸。疫苗性质：减毒活疫苗，为三价糖丸。l用法和剂量：口服，每次一粒。用法和剂量：口

48、服，每次一粒。（1）用用消消毒毒的的药药匙匙将将脊脊髓髓灰灰质质炎炎疫疫苗苗送送入入儿儿童口中，用凉开水送服咽下。童口中，用凉开水送服咽下。（2）月月龄龄小小的的儿儿童童，喂喂服服糖糖丸丸疫疫苗苗时时可可将将糖糖丸丸碾碾碎碎，放放入入药药匙匙内内，加加少少许许凉凉开开水水溶溶解解成成糊糊状服用。状服用。（3）口口服服疫疫苗苗时时要要看看服服下下肚肚，如如儿儿童童服服苗苗后后吐出，应先饮少量凉开水，休息片刻后再服。吐出，应先饮少量凉开水，休息片刻后再服。三、麻疹疫苗三、麻疹疫苗l疫疫苗苗性性质质：减减毒毒活活疫疫苗苗，冻冻干干疫疫苗苗为为乳乳酪酪色色疏疏松松体体，溶解后为橘红色澄明液体。溶解后为

49、橘红色澄明液体。l规格：每安瓿为规格：每安瓿为0.6ml。l接接种种对对象象：8月月龄龄初初免免一一针针，1824月月龄龄加加强强（可可以用麻腮风疫苗）。以用麻腮风疫苗）。l用用法法与与剂剂量量：按按瓶瓶签签示示量量加加灭灭菌菌注注射射用用水水，待待完完全全溶溶解解摇摇匀匀后后使使用用。上上臂臂外外侧侧三三角角肌肌附附着着处处皮皮肤肤用用酒精消毒，待干后皮下注射酒精消毒，待干后皮下注射0.5ml。四、吸附百日咳、白喉、破伤风四、吸附百日咳、白喉、破伤风联合疫苗联合疫苗疫疫苗苗性性质质：类类毒毒素素，吸吸附附制制剂剂为为乳乳白白色色悬悬液液，含含防腐剂，放置后佐剂下沉，摇动后即成均匀悬液。防腐剂

50、放置后佐剂下沉，摇动后即成均匀悬液。l规格：每安瓿规格：每安瓿2ml。l接接种种对对象象：初初免免起起始始月月龄龄3足足月月，周周岁岁内内完完成成三三针针，每针间隔不少于每针间隔不少于28天，天，1824月龄加强一针。月龄加强一针。l用法与剂量用法与剂量上上臂臂外外侧侧三三角角肌肌附附着着处处皮皮肤肤经经消消毒毒后后肌肌内内注注射射。每每次注射剂量为次注射剂量为0.5ml。五、甲肝疫苗五、甲肝疫苗l疫疫苗苗性性质质：冻冻干干甲甲肝肝为为减减毒毒活活疫疫苗苗，外外观观为为乳乳酪酪色色疏疏松松体体，溶溶解解后后为为澄澄清清无无异异物物的的浅浅红红色流体。色流体。l规格：重溶后每西林瓶规格：重溶后