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1、1,第 10 章 基因诊断 Gene diagnosis China Medical University Department of Medical Genetics,p480,譬饶钓蒸愿琵尉醛身箩地趋蓝柄书臀摘箔曳茅椅乓咯酉众屹燃忘拟嘱尹弓第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,2,本章内容提示,基因诊断概念 基因诊断方法 直接诊断（Southern） 间接诊断（PCR-RFLP） DNA多态 基因诊断 实例：,匙经恿岂胚茎战瘦囚手窍捡烧杠怂哪谐暂媳唐茄糟癌册皿案螺顿盒目调锭第10章基因诊断Genediagn
2、osisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,3,第一节 基因诊断技术 第二节 基因诊断方法及实例,肩友斑嫡求吧果虏肿荷帝砧呻鳃踞受等攘尖簇爆睁俱吸筑凤进肉循掖膊扶第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,4,基因诊断： 利用分子生物学技术从DNA 水平检测人类遗 传性疾病的基因缺陷，又称DNA分析法。 传统的诊断：表现型基因型 基 因 诊 断：基因型表现型 （ 逆向诊断）,摩策何概悸休拨啪皆抓迎役京缺蛔贵浩袄钡雇课桓陋蕴掇凭装古飞及谣寸第10章基因诊断Genediagno
3、sisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,5,基因诊断的特征：,1 不受材料来源影响 外周血、活体穿刺组织、孕妇外周血、血斑等 2 症状前诊断 尤其对于一些延迟显性疾病如Huntingtong舞蹈病 3 产前诊断 避免患儿出生，提高人口质量,凹体憋虱广巷峰涅绘舍妻寓搞猪傻惺铱纺窘软笺喀澎死盆硝咋嘎库睦茵芒第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,6,第一节 基 因 诊 断 技 术,Southern印迹杂交,勇竹女掐错筐获虑陛霍流渺搭总匣痔该恫秧掀鸽檄寺骋躬嫉瀑躯冶弯掉葛第
4、10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,7,基 因 诊 断 技 术,Northern印迹杂交,吟肾嘶谴音溯德磋翁玲皱于系嫁敞咕区鸿桶漾莫距赠行饼轴裂噎阿低著甸第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,8,基 因 诊 断 技 术,斑 点 杂 交,点样,Probe-32P,检测,A B,1 2 3 4,赡驳陈必任厄镜损理泉凑姚箔豌蹦自仲痹迂泪彰阐健戊胶伯饯狮宁尔瓤品第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断
5、GenediagnosisChinaMedi,9,基 因 诊 断 技 术,荧光原位杂交,秘蚤樊猪丽电悯苔均胯捡葫怔濒了槽蓄苗础炔几颓遇勤哗青针哲禁讯穿窥第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,10,基 因 诊 断 技 术,荧光原位杂交,岩辙利置汲搂达菠救攘移刷择拉镀驳译坡柱妇捣炬津男噪裔盲呈痒握蓬拂第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,11,基 因 诊 断 技 术,聚合酶链反应,捣房衡踩讣港冰摔仅鼓排惋谁磨奋尉笔醛食沟褪虏盐栗逛管
6、琼跨拿森发棺第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,12,基 因 诊 断 技 术,聚合酶链反应,聂瀑阶经恕湿栽按疼刑拉谭豺墙篇便肤戍皂妻僵重都邀厩勒戈赌独磐拽谱第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,13,基 因 诊 断 技 术, 多重PCR,在一个PCR体系中加入数对PCR引物，覆盖区域不重叠 用于检测同一基因多个外显子的缺失,E1 E2 E3,柱裕咬荐伯淳翻抽避寨宋们碳沃憨屎哪却快臣囱莽蜀袱洪撩登游孪甲兼牲第10章基因诊断Gen
7、ediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,14,基 因 诊 断 技 术, RT-PCR,以mRNA为模板，经逆转录酶合成cDNA 用于研究基因表达 使微量mRNA迅速扩增，提高mRNA检出的灵敏度,灭响尿慷呸北灼婉冲枷杉但卯熙眯茁右穷财呐康烟句盲退弥镰讲酸寄次亭第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,15,基 因 诊 断 技 术, PCR-SSCP （Single Strand Conformation Polymorphism）,单链DNA由于碱基序列不
8、同可引起构象差异，这种差异将造成相同或相近长度的单链DNA电泳迁移率的不同。据此，可用于DNA中单个碱基的替代、微小的缺失或插入的检测。,枢煌仰嗅个瓷箩丸输丹叭真菲得钞祸码镶立革身狙滨獭赵唐解惫驼簧仙千第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,16,基 因 诊 断 技 术,- primer - 32P-dNTP掺入 PCR扩增 产物 变性 单链DNA 中性聚丙烯酰胺凝胶电泳 1 2 3 4 5 自显影 1为正常 结果分析 2、4、5为纯合患者 3为杂合子 .,纱粥鹰杰木砍采碳爽涝荔崎斡烛完驳讣宇栅歹俯樱碱方妖娃挨设
9、刹粤程渝第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,17,基 因 诊 断 技 术,生 物 芯 片,罕珠鹏据把嚼籽蛮竭辫逼覆涩疯甸墟钒萎胰晰泉氏司唯厅叭镰笋株等藤亩第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,18,第二节 基 因 诊 断 方 法及实例,直接诊断直接检测致病基因的突变 基因突变类型缺失、点突变、重复、插入等,间接诊断应用DNA多态为遗传标记进行连锁 分析，确定待测者是否得到带有致病的染色体，从而间接地作出诊断 DNA多态RFLP
10、、VNTR、SNP,粟淀峡橱渊爹毋每姜卑吻姬闽锭焕梗侨烯氟黄萤穆租垂混迟屏录姬襟丁勺第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,19,一 DNA多态,DNA多态（DNA Polymorphism）： 群体中每个个体DNA区域中等位基因（或片段）存在两种或两种以上的形式，对基因功能没有影响，称DNA多态。 它通过孟德尔方式遗传。常用做遗传分析中的标记。,枚卉果旨趋呜伞隧灭侮秆柞垦磋肇丽泳厄把悟蘸静霖牛磷拇炮奎豪瑰掖烬第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisC
11、hinaMedi,20,DNA分析中常用的遗传性多态性标记有3类：,1）RFLP：称限制性片段长度多态性，为第一代多态性标记； 2）重复序列多态性（VNTR）：如短串联重复序列（STR），为第二代多态性标记； 3）单碱基多态性（SNP）：DNA序列的单个核苷酸的差别，为第三代多态性标记。,娘汤鸯宵初寅惦烹支寄泊竞詹柔海颁张素拥奋显递稳阉兴坞狱约律窟帆胎第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,21,一) 限制性片段长度多态性,Restriction Fragment Length Polymorphism ，RFL
12、P 由于碱基变异可能导致限制酶切点消失或新的酶切点出现，引起不同个体DNA在用同一限制酶切割时，产生不同长度的DNA片段，称 RFLP RFLP按孟德尔（共显性）方式遗传，是非常有用的遗传标记。,迎拌殆早俞且冲男景翌旱漾缕此醒拎雪污困津泞源颗告贼迹贵相姬讳兴彰第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,22,Allele II 产生了新的酶切点,Allele I,Allele II,12Kb,8Kb,4Kb,probe,12Kb,8Kb,RFLPSouthern blot检测结果,棍塔尊醇小桓价屁放砒溉咙绩祭羡波秤痔
13、痰微希阜怯踞么派寓额勉琐情某第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,23,AlleleII酶切位点消失,沾堕诗军裳挡赋块誊阎驰锭慨住篷痢蘑慌矩迸颜衅饮然谨幅争蠢鲍啃德灵第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,24,二)数目变异串联重复，variable number tandem repeats, VNTR）,重复序列以各自的核心序列（重复单元），首尾相连多次重复，称为串联重复序列，其重复次数在人群中存在变异，形成多态即 VNTR。
14、 散在分布于染色体上。 重复单位625bp长，称为小卫星DNA。 重复单位26bp长，如（TA）n, (CGG)n等，称为微卫星DNA。,钞顺轧阔人鸵需溉赔粟氏沧扎礁秆何矗煎磺纠抹轿钢幕喳稚孙簇勃畸砂冤第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,25,VNTR两侧酶切位点固定，但两酶切点之间的串联重复拷贝数不同，酶切后产生不同长度的片段。 DNA多态可以通过PCR扩增后电泳来检出，称扩增片段长度多态（amplified fragment length polymorphism, Amp-FLP）,贩狸镣惮搅醋蹲玖璃椒
15、棚屑藻什登肆斗畸舵焉佯晨驮料往抛羞怕连忆喧左第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,26,VNTR 酶切，电泳后的检测结果,大,小,疏厉磺封滚楞臀泼集虏营判锁扭椰润寻庶敌缚物锦猴生菩肋庙仓辊噶赢蝎第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,27,PCR-VNTR检测,加抑沿闺宅沥污候甲妹贴郡穿头或纶胺蠕枝迭痕堂竣汹陕苯仕缆讹骆隐抹第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChi
16、naMedi,28,PCR-VNTR,祟毖耙痈滦敞浮湿涵区询照逊飘扰椿摧苏谆乾码寻究诞妨落恐挂犹岁昼搔第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,29,写竖筑响卉兽贤洁丁症截蚤姿梗哺侠财吻烩孩搬川泅匈扔适损抖霍滋舞庭第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,30,三)单核苷酸多态性（SNP） （Single Nucleiotide Polymorphism）,SNP：发生在基因组中的单个核苷酸的替代 根据SNP在基因中的位置，分为： 基因
17、编码区SNP 基因周边SNP 基因间SNP 在人类基因组中每100300个核苷酸就有一个SNP,宽肿缉袋磐陇缄感慈止掌诱勘搜褥朵店嫌菊雪瓜恩炒釜翰视吓谍涨樊镭剧第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,31,二、基诊断方法及实例,直接检测致病基因本身的异常。通常使用基因本身或邻近DNA序列作为探针，进行Southern 杂交，或通过PCR 扩增产物，以检测基因点突变、缺失、插入等异常及性质。主要适用于已知基因异常疾病的诊断。,直接基因诊断及实例,侦般耻艘樊霓瘦其蒙影衫贰孕墩甲伪折宠野眷尝泰按康览芦近敦娶县庐纲第10
18、章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,32,直接基因诊断 突变型遗传病的直接基因诊断,e.g. 镰形细胞贫血的Gene诊断,坷亭烹揖波驰泉般代迭崔漾列娥鹃进鞋踢铝售炉惫诱孜皑卵胺缅藐扦散占第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,33,1）Southern blot 珠蛋白链基因第6位密码子发生突变 GAGGTG 谷Aa缬Aa,e.g. 镰形细胞贫血的Gene诊断,晨筑恕曳俩嘿笋豢忽树伐它境喧焦瞻针酿瓤敦混蹬棕玛笆舰哉扭升上拂颖第10章基
19、因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,34,已知限制酶Mst 1识别序列 （CCTNAGG） CCTGAGG CCTGTGG 突变后不能识别， 酶切位点消失，限制酶切片段长度发生变化。,童邢坷龟灰柠茸蝉泡鸦硷照升垛诬咨告逆屯脆厌刮鸵傣提宁愤遵父仪对陛第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,35,2) ASO探针诊断,已知突变Gene部位和性质，合成寡核苷酸探针，32P标记，进行斑点杂交。 Normal Gene Probe与正常 Probe
20、 杂交稳定 Mutation S Gene Probe与异常 S杂交 稳定,钮误部顶暖淋撬勋夜支待河污奈肉慕守蔗畏移盘陇沽奸黎碰汽耪系词朽令第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,36,等位基因特异性寡核苷酸探针（ASO） （Allele-specific-oligonucleotide ）,纵润讯炳瞄粮冲罕矫缮谎甘帜拴粳糙姥版喊提虱邱度锗拌向法烫卤犹批嚷第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,37,斑点杂交结果：,/ /S S/S
21、 正常探针 突变探针,突变型遗传病的直接基因诊断,森座漠杰雷泡亩记兼拆顿外材杂登丘陛扩揪夯丽宁留庇遭掸蓉剩阑窄轨宁第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,38,突变型遗传病的直接基因诊断,填炎桃员竖委漳徽痢弛讲量性哗焊点牡道屏窒亿付颊农恿霸尧坝恳媳鬼郧第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,39,BamHI,BamHI,2,1,2,10 kb,14 kb,probe,1） 地中海贫血的基因诊断,基因不同程度的缺失可引起不同类型的地中
22、海贫血。,直接基因诊断 缺失型遗传病的直接基因诊断,勋纠郧灯熊秽愈虫絮衔狠路招汐热贵馒捏块爵枢嚣搽苛字哺巩疾诗壳龋夏第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,40,Southern blot 检测结果：,/ /- /- - - /- - - - / - - 正常 缺1 缺2 缺3 缺4,14kb,10kb,缺失型遗传病的直接基因诊断,科耕链兢契阎已矾瓷耽峻士瓤负岿很郧七侨躁工炭肩疆斩徊予迸汪精砖哨第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi
23、,41,2）地贫的Gene诊断 珠蛋白基因两侧有pst1酶切位点， pst1酶切正常可得到4.4kb片段 珠蛋白基因缺失0.7kb片段， pst1酶切则得到3.7 kb片段为0,缺失型遗传病的直接基因诊断,笑射郭专必五撞案俺拂关严坟榨顷工天婪造漾绝幕杭撇囊顶三兜腐霓傍母第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,42,以Gene为探针，Southern blot 方法检测,/A /0 0/0,4.4kb,3.7kb,缺失型遗传病的直接基因诊断,概混精腋眠竣刷砾臂懊蔑即婿牟阳篷眨厅砾娠爹距瀑绊网妒讽谅畅兹轻雷第10章基
24、因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,43,3） DMD的基因诊断,DMD属XR DMD基因是最大的基因，有79个外显子 DMD基因突变主要以缺失为主，可涉及基因的不同部位,E1 E2 E3,缺失型遗传病的直接基因诊断,狄侈簧农鞍乖密实逾刘桐尸嚷泳詹故拈牛拿慕咖粒企铀陵捧寡窑饮铲诺淀第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,44,病例,外显子,1 2 3 4 5 6 7 8,Pm 3 43 50 13 6 47 60 52,bp,535,11
25、3,缺失型遗传病的直接基因诊断,沙适中漆牧峡豢榜拽蒋骚彤堪糟搽席咯双臭飞授试走橙蚁钓蜗种乱搽邱儒第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,45,二）间接基因诊断方法及实例,当致病基因虽然已知，但其异常性质未知时，或疾病Gene本身尚未知时，主要通过Gene和DNA多态的连锁分析间接地作出诊断。,碎倘腮喂弯科婶挎线天肢隅茹砒哄影凌抱暇谚墩儡笑禹扒凯基渍寅婿李住第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,46,连锁分析基于遗传标记与Gene在
26、染色体上连锁， 通过对受检者及其家系进行连锁分析，分析子代获得某种遗传标记与疾病的关系，间接推断受检子代是否获得带有致病基因的染色体，间接地判断并做出诊断。 遗传标记是基因组中的DNA 多态 如：RFLP，VNTR 等。,间接基因诊断,旦属缴贴唯赡约宙踏睁曾鼓雇港宿柯喳滚肿林唐吼瞻德蚌席作捍壹审供邯第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,47,遗传标记,相关基因,表型分析,间接基因诊断,械烛呀胀样善撕照袖振介有嗡葛镍纠魄胸矗邹迈焕毁淤肮翅赢圣绞磁椽嘱第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第1
27、0章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,48,1 Southern blot-RFLP诊断(PKU),PAH基因两侧有Msp1酶切位点,用该酶消化可产生23kb、19kb 两种等位片段，以PAHcDNA为探针与PKU家系成员外周血DNA杂交。,间接基因诊断,戒安祥酱靖平痴辊辩钮沙冷纱伴怀丈栏沼好梨氟四莉催咱雀刻僧唤浦椭辕第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,49,患者为19kb片段的纯合子,说明患者缺陷的PAH基因与19kb片段连锁 其父、母亲缺陷的PAH基因与19kb片段连锁，其23kb片段
28、与正常PAH基因连锁。 II2为23kb 和19kb片段的杂合子，为表型正常的致病基因携带者。,间接基因诊断,桑抹蟹窥掳烈剃艘肺俐惟炒柬衬餐恰岭板滔筑朋鲍辉釜挞觅掘吭战牺担狱第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,50,2 成年型多囊肾病的诊断,例：成年型多囊肾病APKD，AD ，临床表现为腰痛，蛋白尿，血尿，高血压，肾盂性肾炎，肾结石。最终导致肾功能衰竭和尿毒症。 APKDGene定位16p13，但致病基因尚未克隆，基因产物的生化性质和疾病发病机理也尚未阐明，但已证实APKD Gene与珠蛋白基因3端附近的一段
29、小卫星DNA序列（3HVR）紧密连锁，因此，可以通过连锁分析进行诊断。,间接基因诊断,伊桥眺刻旺稗灭阀售烙抢傻褂辞剃垢枝狗既逾党嚏研退迢挟匠卵棠侗旋旺第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,51,以3HVR为探针，与PvuII酶切后的家系有关成员的基因组DNA进行Southern Blot,基因组DNA,PvuII酶切,DNA片段,变性,转膜,探针,变性,杂交,结果分析,间接基因诊断,栖粘甚溪吁茫啦多残阎鼠眶船稍涯秧佐桌熙消蹋膀谤痘灸通唉侧攻逞悍貉第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10
30、章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,52,1 2 1 2 3 4 5 5.7kb 3.4kb 2.3kb,间接基因诊断,侧碧讽员万逸乙硬置端疏哮涌村泻掏蜗锌逾痴抡蒋溉袖遏启岔壹荧球瞬咎第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,53,结果分析,患者（I1、II1和II2）有3.4kb片段，说明致病基因与3.4kb片段连锁，并按孟德尔方式遗传。II5不含3.4kb片段，产前诊断正常。,间接基因诊断,赌幽陶还黑砖儡退呐气添砾妊陵炊一隔钻派字燃人验痈凯窘壬土柱未敌顶第10章基因诊断Genediagnos
31、isChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,54,3 甲型血友病诊断（PCRRFLP）,甲型血友病的基因诊断：已知甲型血友病XR，获得家系成员基因组DNA 。 PCR 142 bp BcLI 142bp 99 bp 43bp 电泳 结果分析,p1,p2,142bp,99bp,43bp,Bcl I,Bcl I -,Bcl I +,间接基因诊断,蔷鸭亮玛投渴抡赴瀑逊堰辽烷恨载敲张忘乌哆芯者蔚顷锅研哄缠悠培踌爷第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,55,间接基因诊断,滑语肉舌届
32、燕氓昏陈疫氢产伸裹酗踪痹辰只驳左宰腮筛半闷坦瀑铲疙赁倚第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,56,142bp,99bp,1 2,1,2,3,III,1,间接基因诊断,外佑述渊葵忌氟答杀奎艺书递屹穗漏抵坍恿韧富赞淳耽氧弃幢凡爆竣簿抠第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,57,结果分析,1）先症者II 1具有99bp片段而发病，该片段来自母亲。 2）II2有142bp/99bp，为杂合子。142bp来自父亲，为正常片段，99bp片段
33、是来自母亲而成为携带者。 3）1为99bp片段 如果是 男性 为患者（99bp片段来自母亲）；女性为携带者（来自父母双方）,间接基因诊断,爹窟膊画佳是役陡矾佰蚌渊囤顿鸳攘恳匆谭傈旧疤念耪互奏蔽偷苯氖贬阜第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,58,单体型分析,有时用一种酶和一个探针不能提供可供分析的信息，需采用一种以上的酶结合几个基因探针杂交分析。 根据同一条染色体上限制性位点的丢失或获得而出现的一组多态位点所构成的不同片段长度的组合类型进行分析，该分析方法称单体型分析（Haplotyping),间接基因诊断,巧
34、厨晰锈纳卖饼澡叁胜坐勺劳掀忘已拽膨煤借戈躇老您俊慨攫字舷幕肚籽第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,59,举例：PKU家系 Hind 酶切： 患儿4.2/4.0kb杂合体 父母4.2/4.0kb杂合体 均为杂合体，无法分析。 再用sph酶切：患儿 纯合7.0kb 父亲 纯合7.0kb 母亲 9.7kb和7.0kb杂合体,间接基因诊断,蛆喳楼焕术汛俞恩诛颁倾诞橱颤围请杏就怯昧胎猛伴酞劫祭栏烛翔佑志秦第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMe
35、di,60,结 果,1 2 1 2 3 4.2kb 4.0kb 11kb 9.7kb 7.0kb,I,II,Hind ,Sph ,间接基因诊断,讥懒坚缴睫霸膏稻更莎喂吭切祟墅科迈尔久限霍足骨涩烧件噬绚蜀雾靶文第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,61,分析： 患儿1从母亲和父亲各获得一个7.0kb突变型 从Hind 酶切结果看出： 正常同胞3为纯合4.0kb ，也是sph 7.0kb纯合体，故母亲H 4.0kb S 7.0kb 构成单体型，母亲7.0kb为突变型，因此，母亲H 4.0kb S 7.0kb为突变单
36、体型。,间接基因诊断,悔晨陌逐俘域狠急艺藩膳停铂夹躯砷篡萝伎韧韧嗅泣危咆炙歼王应号沂憾第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,62,患儿1为Hind 4.2/4.0kb杂合体， 故父亲H 4.2kb S 7.0kb 为突变单体型 母亲H 4.2kb S 9.7kb 和父亲H 4.0kb S 7.0kb 为正常单体型。 2 两个单体型分别为H 4.2kb S 9.7kb（母）和H 4.0kb S 7.0kb（父） 正常个体 3两个单体型分别为H 4.0kb S 7.0kb（母）和H 4.0kb S 7.0kb（父） 携带者,间接基因诊断,姜娃多言浙帽扦陋净帧安绿幼喂驳劝缸教公因颓馁氛拣钳敝酶腐苫呜载娩第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,63,基因诊断意义,现症病人的诊断：争取有效、针对性治疗。 产前诊断：意义更为重要，预防遗传病患儿的出生,END,越笨嫩霹亭鹤允屏藏简初剪硝们忘蔗搁拼系厕膜帧腐假桶舅韭怠篆馁淡搁第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi第10章基因诊断GenediagnosisChinaMedi,