《几种常用的染色方法精编版.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《几种常用的染色方法精编版.docx（8页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、公司标准化编码QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N几种常用的染色方法1. 美蓝染色法在已干燥、固定好的抹片上，滴加适量的美蓝染色液，经1 2min,水洗，沥去多余的水分，吸干或烘干，镜检。2. 革兰氏染色法（1）在己干燥、固定好的抹片上，滴加草酸钱结晶紫染色液，经l-2min,水 洗。（2）加革兰氏碘溶液于抹片上媒染，作用13min,水洗。（3）加95%酒精于抹片上脱色,约30s-lmin,水洗。（4）加碱性复红液（或沙黄或稀释石炭酸复红液）复染1030s,水洗。（5）吸干或烘干，镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。3. 抗酸性染色法（1）在己干燥、固定好的
2、抹片上，滴加较多量的石炭酸复红染色液，在玻片下 以酒精灯火焰缓缓加热，至发生蒸汽即止，维持微微发生蒸汽，经3-5min, 水洗。（2）用3%盐酸酒精脱色，直至标本无色脱出为止，充分水洗。（3）用美蓝染色液复染约lmin,水洗。（4）吸干或烘干，镜检。抗酸性细菌呈红色，非抗酸性细菌呈蓝色。以下方法也可：即在干燥、固定好的抹片上，滴加石炭酸复红染色lmin,水 洗，用1%美蓝染色液复染约20s,水洗。对光观察，标本务必全呈蓝色，在火焰上烘干、镜检。抗酸性细菌呈红色， 非抗酸性细菌和背景呈蓝色。4. 瑞氏染色法（1）抹片自然干燥后，滴加瑞氏染色液于其上，为了避免很快变干，染色液可 稍多加些，或看情况
3、补充滴加，经l-3min,加约与染液等量的中性蒸懈水或 PBS液，轻轻见动玻片，使与染液混匀，约3min左右，直接用水冲洗（不可先 将染液倾去），吸干或烘干、镜检。细菌染成蓝色，组织、细胞等物呈其它颜 色。（2）另一方法抹片自然干燥后，按涂抹点大小，盖上一块略大的清洁滤纸 片，在其上轻轻滴加染色液，至略浸过滤纸，并看情况进行补滴，维持不使变 干；染色3-5min,直接用水冲洗，吸干或烘干、镜检。此法使染色液经滤纸 过滤，可大大避免沉渣粘附于抹片上影响镜检观察。5. 姬姆萨染色法（1）于5ml新煮过的中性蒸馆水中滴加5-10滴姬姆萨氏染色液原液，即稀释 成为常用的姬姆萨氏染色液。（2）抹片经甲醇
4、固定干燥后，在其上滴加足量的染色液或将抹片浸入盛有染色 液的染色缸屮，染色30min,或者染色数小时至24h,取出水洗，吸干或烘干、 镜检。细菌呈蓝青色，组织、细胞等呈其它颜色。视野常呈淡红色。6. 克利特氏荚膜染色法（1）染色液配制 美蓝溶液美蓝1名，95%酒精10ml,蒸馅水100mlo将美蓝溶于酒精内，再 加蒸馆水混合。 碱性复红溶液碱性复红0. 03g, 95%酒精lml,蒸馆水99mlo将碱性复红 溶于酒精内，再加蒸馆水混合。（2）染色法 涂片经火焰固定后，滴加美蓝溶液，将玻片至火焰上面加热至发生蒸汽为 止。 水洗，以碱性复红溶液复染15-30so 水洗后、吸干、镜检。 染色后，菌体
5、呈蓝色，荚膜呈红色。7. 结晶紫福尔马林荚膜染色法（1）染色配制 结晶紫福尔马林染色液结晶紫10名，福尔马林溶液lOOmlo混合使其完全溶 解，隔夜过滤。 碱性复红溶液见前：克利特氏荚膜染色法（2）染色法 涂片用结晶紫福尔马林染色液染色一lmin。 水洗后，以碱性复红染色液复染15-30so 水洗、吸干、镜检。 染色后，菌体呈深蓝色，荚膜呈淡红色。8. 番红染色液荚膜染色法（1）染液配制 番红（或沙黄）0.7g, 95%酒精20ml,蒸馆水15ml。将番红溶解于酒精内，再加蒸憎水混合而成。（2）染色法 涂片滴加番红染色液，将玻片置火焰上加热至发生蒸气约5mino 水洗、吸干、镜检。 染色后，菌
6、体呈暗红色，荚膜呈淡黃色。9. 赫斯氏荚膜染色法（1）染色液配制 龙胆紫酒精溶液龙胆紫酒精饱和液5ml,蒸镭水95ml。 硫酸铜水溶液硫酸铜20g,蒸馆水lOOmlo（2）染色法 涂片加热固定，将龙胆紫酒精溶液滴加于玻片。将玻片置火焰上微加热至 见蒸气并保持蒸气约20mino 用硫酸铜液代替水冲洗染液，用吸水纸吸干、镜检。 染色后，菌体呈深紫色，荚膜呈浅蓝色。10. 安沙尼氏荚膜染色法（1）染色液配制 1%结晶紫水溶液。 20 %硫酸铜水溶液。（2）染色法 将涂片在空气中自然干燥。 以1%结晶紫水溶液染色2min （不必加热），再以20%硫酸铜代水冲洗染 液。 吸干、镜检。 染色后，菌体呈紫色
7、，荚膜呈淡紫色。11. 苗列尔氏芽抱染色法（1）染色液配制 媒染液5%珞酸液（珞酸5ml,加蒸镭水95ml） 染色液石炭酸复红液 脱色液2%硫酸液（纯硫酸2nd,加蒸憾水98ml） 复染液碱性美蓝（2）染色法涂片，干燥，火焰固定，用媒染液染色lOmin,充分水洗，用炭酸酸复红液 加温染色（最好在标本上覆盖一张滤纸）2min,水洗，用脱色剂脱色10s, 水洗，用美蓝液复染lmin,水洗，干燥、镜检。结果：芽泡呈红色，菌体呈蓝色。12. 孔雀绿沙黄芽砲染色法（1）染色液5 %孔雀绿液，沙黄液。（2）染色法涂片火焰固定，加5%孔雀绿液微微加温染色30s-lmin,至发生蒸气为止，待 冷后水洗，再加沙
8、黄液复染30s,水洗，干燥后镜检。结果：芽抱呈绿色，菌体其它部分呈淡红色。13. 李富逊氏鞭毛染色法（1）染色液配制5%钾明矶水溶液10ml, 20%糅酸水溶液10ml, 1 %碱性复红 酒杯精溶液10ml o将上述三种溶液按次混合配成，如发生沉淀，用其上淸液，本染液保存1周，复染液可用下列染液：美蓝，硼砂,蒸馅水100ml o（2）染色法 所用的载玻片必须十分清洁无油脂、无划痕。可将玻片先浸于重珞酸钾清 洁液数天，用银子取出后以清水冲洗干净（冲洗时切勿用手捏玻片），然后 斜插于木架上，置37度温箱中任其干燥后备用。 菌液最好用10-16h的幼年肉汤培养物。若取自琼脂培养基上的菌落，则 用接种
9、环挑取少许，置蒸懈水中制成轻度混浊的细菌悬液，切忌用接种环多 作搅动，以免损伤鞭毛。 挑取肉汤培养物或细菌悬液一环，轻置于玻片一滴，玻片作倾斜放置，使 菌液沿玻片面顺向下流，自成一薄菌膜，置37度恒温箱内干燥。 将上述染液滴加于涂片上，染10-15min,染色时间的长短随室温的高低 而不同，如在冬季，可置于37度温箱内染色。 轻轻地水洗12min。 在室温或37度温箱内任其干燥后作镜检，细菌菌体及鞭毛呈红色。 如需复染色，则用上述美蓝硼砂复染液在水洗后，染色lOmin,用水冲 洗，干燥后作镜检。菌体呈蓝色，鞭毛呈红色。 良好的鞭毛染色涂片，应在显微镜的视野中见到大部分细菌菌体均附有鞭 毛。14
10、. 过碘酸锡夫氏真菌染色法（1）染色液配制甲液：1%过碘酸液乙液：碱性复红，95%乙醇5ml,蒸 懈水95ml丙液：亚硫酸氢锌1呂，酒石酸,蒸馅水100ml丁液：饱和苦味酸液（2）染色法将标本在屮液中染lOmin,水洗后再用乙液染23min,冒丙液中染30 40min,至玻片呈淡红色为合适，水洗lmin,再置于丁液中染3min。充分水 洗至无黃色液体为止。脱水、透明，树胶封固后镜检。结果：真菌组织染色鲜红色。15. 中国蓝真菌染色法（1）染色液纯石炭酸20ml,乳酸20ml,甘油40ml,蒸馆水20ml。将上述成分混合，加温溶解后加入中国蓝，混合振荡即成。（2）染色法先将染色液加在载玻片上，将培养物被检样放在玻片上的染色液中，涂匀后 覆盖盖玻片，微加温后镜检。16. 黑色素螺旋体染色法（1）染色液配制黑色素5g,蒸懈水50mlo混合加热使其溶解，在溶液屮加 1%福尔马林作防腐剂，临用前过滤。（2）染色法取被检物滴，墨汁滴混合后涂片，室温下放干燥后镜检。结果：螺旋体无色发亮，背景呈黑色。17. 墨汁螺旋体染色法（1）染色液印度墨汁5ml,蒸馆水20ml,震荡混合而成。（2）染色法取被检物滴，墨汁一滴混合后涂片，室温下放干燥后镜检。结果：螺旋体无色发亮，背景呈黑色。