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1、玻璃器皿的清洗包扎及高压蒸汽灭菌一、实验目的L掌握玻璃器皿的清洗与包扎技术。2学习并掌握高压蒸汽灭菌、干热灭菌的基 本原理和操作方法。杀菌效力I三&農雷k力二实验原理(1)灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微生 杨，灭菌的方法分汤理和化学灭菌法两关类。本实 验主要介绍物理方法的一禅，即加热灭菌。加热灭菌包括湿热和干热灭菌两种。通过加热使菌 体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。蛋白 质的凝固变性与其自身含水量有关，含水量越高， 其凝固所需要的温度越低。在同二温度下，湿热的 *卄1力比干热大，因达亠、0八(2)高压蒸汽灭菌法：高压蒸汽灭菌用途广,效率高，是微生物学实验中最常用的灭菌方法。
2、这种灭菌方法是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。 当蒸汽压力达到1. 05kg/cm2时，水蒸气的温度升高到121°C,经1530min,可全部 杀死锅内槪晶 子或芽孑包。W(3)干热灭菌法：通过使用干热空气杀灭微 生物的方法叫干热灭菌。一般是把待灭菌 的物品包装就绪后，放入电烘箱中烘烤， 即加热至160170°C维持12h。接在酒精炬氏口(4)火焰灭菌：直接用火焰灼烧灭菌，迅速 '彻底。对于接种环，接种针或其它金属用濟迂或灭菌。厶飆口，也采三、实验器材器皿：平皿（10个/组）,1ml吸管（9支/组）, 试管 18x180 （ 10支/组），试管（1
3、5X150 ） （ 12/ 组）,三角锥瓶500ml （ 3个/组）、三角锥瓶 500ml （内装蒸f留水250ml ） , 10ml吸管其他：牛皮纸或报纸,酒精灯，棉花,高压蒸汽 菌锅,电烘箱”线绳丰刷一_四、操作方法（一）、玻璃器皿的清洗包扎玻璃器皿在灭菌前必 须经正确包裹和加基/ 以保证玻璃器皿于灭 菌后不被外界杂菌所 污染。H； ；C2、吸管应在管口约0.5厘米 以下的地方塞入少许长约 1.5厘米的棉花,以拉直的 曲别针一端放在棉花的中 心，轻轻捅入管口，松紧 必须适中，松紧程度以吹 气时通气顺畅而不致下滑 为准,管口外露的棉花纤 维统一通过火焰烧去。然 三 后,将吸管尖端放在牛5厘尸
4、 二米宽的长条纸的-纸条成45。角” 住吸管尖端,然后将吸 一环纸条内，末端剩余 ”鳩折叠打结,待灭菌。包扎试管包扎完成3、三角瓶在棉塞与瓶口外再包以厚纸,用棉绳以活结扎紧,以 防灭菌后瓶口被外部 杂圉所污染；4、试管塞上棉花塞, 三多支轧成一轴址用牛； 皮纸或两层I 一细线包。（二）、干热灭菌<*«cr ZZ?_ r 手7= -<.*ZZ_=:持将包扎好的试管、平皿、三角锥瓶放入干燥烘箱 内,注意不要摆放太密,以免妨碍空气流通;不 得使器皿与烘箱的内层底板直接接触。将烘箱的 温度升至160170°C并恒温12h ,注意勿使温 度过高，超过170工，器皿外包裹的
5、纸张、棉花 会被烤焦燃烧。如果是为三为120°G 韦方可打开箱门M二冷而爆裂。弗出 鬻 7-<%（三）、高压蒸汽灭菌式存 立积的 线内 位锅 到垢 水水o 加少锅腐 内减干誠旋 锅便中饗 向以程嚼 :过菌卜 盖沓W 锅的灭帝锅将紧 灭胡：拧 开煮，盖匀 打已够-SE* :用加、式 水好要料S- 加眾装对。排畐升阀以般过闭睜珞要停蕭 即时达&艇 尸力间丿措 咻压时linEiric IffI当書番器口气使压升开灭丽出 气空，降上并皿接否冲 排和Tlin8，器至，体 开气5m压苕皿和降气液 Hi保力力排内 :水维、压鼻压嚨 气"压，维培待鋼成書需待oma乞曲n购力灭
6、在外 嗷从冷钢賢制日于之 Tidw I c rt£t 池一锅£菌会容 口气使压務灭霸出 _3、匚，五、思考题(1)吸管在灭菌前应如何处理?答:吸管应在管约0.5厘米以下的地方塞入少许长约 1.5厘米的棉花,以拉直的曲别针一端放在棉花的中心， 轻轻捅入管口，松紧必须适中,松紧程度以吹气时通气顺 畅而不致下滑为准，管口外露的棉花纤维统一通过火焰烧 去。然后,将吸管尖端放在4-5厘米宽的长条纸的一端约 与纸条成45。角,折叠纸条,包住吸管尖端,然后将吸管(2 )高压蒸汽灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽 ?灭菌完毕后,为什么要待压力降到0时才能打开排气阀 ,开盖取物？答:冷空气未排尽，压力虽然升高而温度达不到要求,无 法达到灭菌要求，影响灭菌效果。