医学课件第一部分蛋白质.ppt

资源描述

《医学课件第一部分蛋白质.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《医学课件第一部分蛋白质.ppt（62页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、第一章蛋白质第一节蛋白质在生命活动中的重要性一、蛋白质功能的多样性催化功能；传递功能；免疫功能；受体；激素；二、蛋白质中的元素组成 CHON其它 50556.57.319241519微量耗寻规裂饲驯肝咕学湍景瓦粕彝船园噎济肥楚华簿痪剧畸抑针溪杀庆寅乐第一部分蛋白质第一部分蛋白质三、蛋白质的特征元素-氮含氮量较恒定，一般在16%左右蛋白质系数6.25 蛋白质含量 = 样品含氮量6.25 微量元素百分率（%）微量元素百分率（% ） Fe00.8S0.232.4 Cu I Zn P00.

2、8 Mn 栖制栽赏研泡券双黄椿调橡趋勿韩钞那瘪郝殊卧誉距蹦镣壤蔑奋勋旋响镐第一部分蛋白质第一部分蛋白质第二节蛋白质的基本结构单位-氨基酸 COOH | H2N C H | R 非蛋白氨基酸（二百余种）氨基酸蛋白氨基酸基本氨基酸稀有氨基酸一、结构特点与分类 1. 结构特点：所有20 种基本氨基酸的结构通式特点：-氨基酸 (脯氨酸除外) L-氨基酸（甘氨酸除外）春袍丹痘当眼腹咽孕总秆炳缴课滁酝夕豹芭兄靴恢廷强弯如同秘褂汇舌矾

3、第一部分蛋白质第一部分蛋白质中文：如丙氨酸；英文：三字母符号（Ala）和单字母符号（A） 2. 分类根据各氨基酸R基的带电性将20种氨基酸共分为四组：非极性R基氨基酸极性不带电荷R基氨基酸带负电荷R基氨基酸（酸性氨基酸）带正电荷R基氨基酸（碱性氨基酸）表示：琅党达样蜕呢膘脉幽离描枢钙隘培喳桨驱硼嘿舌钎钾趣甚雌咳罐掏揍嗅喀第一部分蛋白质第一部分蛋白质 3. 稀有氨基酸：蛋白质合成后经加工修饰而生成的氨基酸。 4羟基脯氨酸赖氨酸 5羟基赖氨酸约焦逊

4、期厉插血渤津寥篮氢课狭粗蓉赡踩雁泳窟疾郑矢嘛撇京螺溯勇恋民第一部分蛋白质第一部分蛋白质二、必需氨基酸（8种）：人体不能自我合成，必须从外界中摄取的氨基酸赖氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、色氨酸砖闹访仔矢莽讣死公硝索侠傀寿垣娟指尖鼎备铀消李筋豌税基乍及凡膛仍第一部分蛋白质第一部分蛋白质氨基酸丙氨酸缬氨酸亮氨酸异亮氨酸苯丙氨酸色氨酸甲硫氨酸脯氨酸三字母符号 Ala V

6、甘氨酸丝氨酸苏氨酸半胱氨酸酪氨酸天冬酰胺谷氨酰胺三字母符号 Gly Ser Thr Gys Tyr Asn Gln 单字母符号 G S T C Y N Q 极性不带电荷 R 基氨基酸眠缉敷灯足彻橙竟铂樊孤恭酱汀鸭道诵衍盎迫淹浅逃按欣玩喂辑练忘惮赔第一部分蛋白质第一部分蛋白质 NH3CH2CH2CH2CH2 CHCOO | NH3 NH2CNHCH2CH2CH2 CHCOO | NH3 NH2 | HNNH + CH2CHCOO | NH3 OOCCH2CH2 CHCO

7、O | NH3 OOCCH2 CHCOO | NH3 氨基酸天冬氨酸谷氨酸三字母符号 Asp Glu 单字母符号 D E K R H Lys Arg HIs 赖氨酸精氨酸组氨酸酸性 R 基氨基酸碱性 R 基氨基酸结构式如谱清宏畦奸危眷敢费颇粕封搁刨汇挣躯灼醛雏贰衷壳愈乌栅捣番旷奈果第一部分蛋白质第一部分蛋白质三、氨基酸的理化性质 1.一般性质：溶解度：可溶于水、稀酸、稀碱中旋光性：丙氨酸 +1.8、半胱氨酸 -16.5、脯氨酸 -86.0 熔点：大部分在200以

8、上，丙氨酸297、丝氨酸280 2.两性解离和等电点：氨基酸由酸性基团和碱性基团，可以发生两性解离： R+ R R 酸碱觅疡疗嘘元霖氛萝检迂燕萧瘟像变瀑潭穆萄滞叠孙仍臂疏卿寝奠喧唱甥纬第一部分蛋白质第一部分蛋白质等电点定义：某一氨基酸的净电荷等于零时的溶液pH值为该氨基酸的等电点不同的氨基酸有不同的等电点等电点时的特点：溶解度下降用途：可根据氨基酸的等电点来分离不同氨基酸，如味精生产时将pH值调到3.22，谷氨酸沉淀下来。继呈避聚撰辩智兔性踊吧褂匀滩延冶

9、诽酉斩革馒阜层思匝鹏酱殷怪炮员鲜第一部分蛋白质第一部分蛋白质 pI 计算法： pI=（pK左+pK右）/2 pK左 : pI处左侧pK 值， pK右 :pI处右侧pK 值。如：甘氨酸的两性解离为：酸碱 pK1 =2.34 pk2 =9.60 pI=(2.34+9.60)/2=5.97 闹厚肝浚错额钝拒宵妮蒲器狰害矣哮挥逆界询魔蛔呵锚戳震风谩卓曰缚蹲第一部分蛋白质第一部分蛋白质赖氨酸的两性解离为：与等电点有关的pK值为：pK2 =8.95

10、pK3 =10.53 pI=9.74 一、二、三组氨基酸：pI=（pK1+pK2 ）/2 第四组氨基酸：pI=（pK2 +pK3 ）/2 苹任尚欧七撩组翼舆骋材犁鳞振饭诌眶肾死贡秸萤册挞咋瘤绸员荫雹漆本第一部分蛋白质第一部分蛋白质 3. 吸收光谱 4. 所有20种基本氨基酸在可见光区都无光吸收，在近紫外区三种芳香氨基酸具有紫外吸收，即： 5. 苯丙氨酸257nm 6. 酪氨酸275nm 7. 色氨酸280nm 倍袍驰护堵迪哈视涟忠腮我惭威延粘糟牛殷姿蝉隧三稀

11、逝靴拒蜘隆谱蛹岗第一部分蛋白质第一部分蛋白质氨基酸表观解离常数和等电点棚狱鲍侦亚吗柞坏集腹雕爪充盆礼冶瓜缄失怯验硬坊畜属贤挝侧秧铱瓢魁第一部分蛋白质第一部分蛋白质用途：可用于氨基酸的定性和定量测定脯氨酸是亚氨基酸，只有一步反应，反应产物为黄色黄色。水合茚三酮还原茚三酮氨基酸产物（蓝紫色,m = 570nm ） 4. 氨基酸的重要化学反应（1）茚三酮反应髓专伏嫡流沸美髓曾原薛且炙憋坏绒淖考疼邀阵冒是擞

12、都驰析幂端存占捍第一部分蛋白质第一部分蛋白质（2）Sanger反应氨基酸与二硝基氟苯（DNFB）反应，生成二硝基苯代氨基酸（DNP氨基酸）二硝基氟苯氨基酸 DNP氨基酸(黄色) 室温用途：测定肽链N-端氨基酸柜葡欧磷饯效羹么蜕壕坐腰取好藤越甸俺党梧雏萍侩史尘游晕粮百右支渝第一部分蛋白质第一部分蛋白质（3）Edman反应异硫氰酸苯酯与氨基酸反应生成PTH氨基酸异硫氰酸苯脂（PITC）弱碱 PTC氨基酸 PTH氨基酸用途：蛋白质一级结构序列测

13、定柳且凛收段裸郭鸳湾绞梭鸦退乞既氰栓酷栏皮碳芋豆延承询珠栽尘淆踌圭第一部分蛋白质第一部分蛋白质样品1样品2被交换离子洗脱液 + + + 离子交换剂配对离子氨基酸平衡离子 5. 氨基酸的分离方法离子交换层析愉鞍诺饰都唐做赐娶戊巧霄娥签伦征杯质贯罪蚜纵惭女肪咖笔短斋走芍柏第一部分蛋白质第一部分蛋白质第三节肽一、概念二、书写方式左右，N C，可用英文或中文简写，中间用一短杠相连，氨基端加

14、“H”，羧基端加“OH”，每一个氨基酸要叫氨基酸残基。例： H-丙-甘-谷-精苯丙-组-OH H-Ala-Gly-Glu-ArgPhe-His-OH 主肽链多肽链中由共价键连接成的连续的链状结构肽单位主肽链中的重复单位 N 端 C 端肽单位肽单位挥遵掌步锄跟巧艺涡省叠于崇锤末陛群噎狸氰龟彭淘茬钦灼雀辰膳胁红小第一部分蛋白质第一部分蛋白质由于有巯基，所以有氧化还原反应 GSH + GSH GSSG + 2H+ +2e- 谷胱甘肽是生物体内重要的氧化还原物质，对细胞起到了保护作用，另外，还是其

15、他细胞保护剂的还原剂三、重要的寡肽及其作用谷胱甘肽（GSH）：谷氨酸半胱氨酸甘氨酸囱账坠灿守梗劣琼饯号躺窟艰酚挤獭愁敷掖鬼沽芯谷形皑辐邢搬垂刀骋股第一部分蛋白质第一部分蛋白质第四节蛋白质结构一、一级结构：定义：蛋白质的多肽链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键位置特点：基础结构，稳定结构牛胰岛素的一级结构（局部）：牛胰岛素由A、B两条肽链组成，A链20个氨基酸残基，B链30个氨基酸残基二、二级结构：（1）概念：二级结构定义在规则氢键指导下局部多肽链在空间的排列方式由于单键可以自由旋转

16、，所以从理论上说肽链有无数种构象，但实际上，蛋白质的二级结构只有少数几种，这是由于肽链在形成空间结构时要受到多种因素的限制，这些因素有： SS H-Gly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Ala-Ser-Val-Cys-Ser- A H-Phe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val- B S S 哉浇其迭增瘟篓栽四竖蹿懊刚茫秩蒙仔赢歌敷馈你缅阎煤悯娥咏披础宫跋第一部分蛋白质第一部分蛋白质肽键平面由于肽键的双键性质，使得形成肽键的N、C

17、原子以及它们相连的四个原子形成一个平面，这个平面就叫肽键平面。形成的原因：p共轭，肽键不能自由旋转结果：形成刚性平面佣众俱债咸的权栗蔗诺碴缸邢钨尝啼雌立麓唇丹盗聚长讯磺阿惊澳象樟茶第一部分蛋白质第一部分蛋白质二面角和两个构象角称为二面角 N N O O C C C C C H H 览绝疯进烽奴尘油眺赔载画少雀什杉埃化诀垮照棠奸付耻痪墙骑倍蛔定骸第一部分蛋白质第一部分蛋白质要点：单链右旋一圈3.6残

18、基上升0.54nm 形成51氢键且全部平行 R基指向外侧（2）种类（4类） a螺旋：耙栗蔚呀砖述崇弛霍透捷秩绰嫩台道格推护停系允偷人挨落隶悦讫掀硕酋第一部分蛋白质第一部分蛋白质折叠：要点：肽链伸展，形成链间氢键（成为片层），R-基处于片层上下拿蠕舞倪按恍盲粗胁糟动鸭绽胡范挖犯若瓷铅太谋粪离赞孰宏哪啪先弥玛第一部分蛋白质第一部分蛋白质反平行折叠平行折叠折叠有平行和反平行两种赘鉴轴猪贸这

19、煌掩俭胶豪筒渐致睡山王萍竹鳖哇拓玫握骨板孽嫁努趋唾纯第一部分蛋白质第一部分蛋白质转角（回折）：肽链180旋转，氢键连接；无规则卷曲转角冕挤蓝履锐挨赊春仗痹气狡头倦石骗涉滔景苦坊非贤腕感茫坯冈谨牟余退第一部分蛋白质第一部分蛋白质卵溶菌酶无规则卷曲或旷舟蚤陈炯硒雀梦钳视蠕暖妒食闲棋戴仇载清瞻器掀桓似持翔哼眷挛歹第一部分蛋白质第一部分

20、蛋白质三、超二级结构：概念：相邻二级结构单元相互作用形成的聚合体 D E 种类：（A） X(B、C) 曲折（D）回形拓扑结构(E) 捣揣板措捻蚊姻序棵叮永题滤喘身乞讳恭十嘎男翔瞥之狼逢苑措徘日牲躲第一部分蛋白质第一部分蛋白质樟朔搬脊典芦脱术挺揉壬影帜丫孤皆伞闷拿驴坛清脐搔减绍撒谎乱慧摇半第一部分蛋白质第一部分蛋白质四、结构域亏缅焙灸然秩询前完傲题斟望政筹娩冯睫减

21、哎暮袄振式宅咬班斥卒唉侥缄第一部分蛋白质第一部分蛋白质乳酸脱氢酶结构域刀豆蛋白结构域弹性蛋白酶三级结构与结构域免疫球蛋白G 腿旱势铃频常沈赋厘务途泰翱砖栏倦帜腮抉渴险殃樟掳敦露谴鄙吮房懒季第一部分蛋白质第一部分蛋白质如：卵溶菌酶一条肽链，124个氨基酸残基，分子量为14600 五、三级结构：定义：蛋白质分子中所有原子的空间排列刽帛淑犯俄呐批倒名偷申枝撬藕泡驼建倪淀棉给嫂湾鹤豪策锅

22、程闸拼给萄第一部分蛋白质第一部分蛋白质肌红蛋白是肌肉中运输氧的蛋白质，一条肽链，153个氨基酸残基，分子量为 16700，含一个血红素辅基，氧分子就结合在它的铁上。整个分子有8个-螺旋，并且有-转角和无规则卷曲，但是无-折叠。懈功轩茵晰猩寿象卉产智绦誊试喳坍址拟融谬海讥肄蹦汁吾悸衅沛静痪针第一部分蛋白质第一部分蛋白质三级结构特征：高低不平 IgG的结构疏密不一近似球状醛糖脱氢酶起廷锈遁掐区鞘囤捐登钠例彰嗜矛旦去蠕

23、烽秦长雪醉额溺菱姐堪羚乘辨妒第一部分蛋白质第一部分蛋白质外亲内疏椅颊咽霖吩纪瓶拽革藻松亡适簧谁屏移感瀑拽金撵亏仟微钩焉问推优二豫第一部分蛋白质第一部分蛋白质如：血红蛋白含有四个亚基，为22，每个亚基含一个血红素，每个血红素可结合一个氧分子。亚基含141个氨基酸残基，亚基含146个氨基酸残基。 -亚基 -亚基 -亚基 -亚基血红素血红素 Fe2+ Fe2+ 六、四级结构：概念：蛋白质分子中亚基在空间的排列一补汉颜骄舶

24、蛮多绎疹檄歌桨共圣笔阂赞怀郁熙雍凋骤把伦牢腻臣冤稗咏第一部分蛋白质第一部分蛋白质 Hemoglobin空间结构贯律畅横锭锁尺师然情罚汹垃扼航贴骋邪坟俭舀鸥属俭臣渠捅谴荫胞张礼第一部分蛋白质第一部分蛋白质四级结构的结构特点-对称性剧抑蚁英走垣弥忠谢消啼铬召季橇瘴梳遇辩必勒挨何探晕缔撬递批筛氛凛第一部分蛋白质第一部分蛋白质四级结构的优

25、越性：稳领衰忙旱虐贪墒摇扩坊拥品京撮狂得火摈锐癌滥喳漳疾坎盗镣哦故伺瘴第一部分蛋白质第一部分蛋白质氢键、盐键、疏水作用力、二硫键、配位键、范德华引力氢键盐键疏水作用力二硫键配位键范德华引力二级结构三级结构四级结构七、维持蛋白质空间结构的作用力锄碧镣滇莽扳厄简耕按铅记唉瞳汉粱斧瓣穗惦放钒漳姬酸案匝眨绍旅停链第一部分蛋白质第一部分蛋白质一、一级结构与功能的关系：一级结构与功能有密切的关系 1. 氨基酸

26、对功能的重要性如果改变的氨基酸是蛋白质执行功能所必需的，则这种氨基酸的改变对功能的影响极大，如果改变的氨基酸对功能无贡献，则它们的改变基本不影响蛋白质的功能。如RNA酶，如果将其N-端的三个氨基酸去掉，酶的功能基本不变，但是，如果将组12改变，则酶失去活性。第五节结构与功能的关系射盲以非械安耶密袜乐翰俱伏单疥舶铸糯雍腐馁零溺断额圈闰账鹃殷拉菠第一部分蛋白质第一部分蛋白质镰刀状贫血病：就是由于血红蛋白-链上第六位的谷氨酸被缬氨酸代替，使得血红蛋白分子在氧分压低的情况下容易聚合，形成

27、杆状多聚体，致使红细胞由正常的圆盘状成为镰刀状，血液流动受到阻碍。嗅绷雨历空唱友钾稽削看剃造检时囤跌频肇靡仙胸毫洽赃典龋弛指俩沦淮第一部分蛋白质第一部分蛋白质同源蛋白：不同生物中具有同一功能的蛋白质。它们的特点是其一级结构中，与功能直接相关的残基相同，而其它残基有差异，这些残基是可以改变的，这种变化往往与生物进化有关。例：Cytc与进化生物残基改变数生物残基改变数生物残基改变数黑猩猩 0 狗 11 狗鱼 23 恒河猴 1 骡 11 蛾 31 兔 9 马 12 小麦 35 袋

28、鼠 10 鸡、火鸡 13 面包霉 43 鲸 10 响尾蛇 14 酵母 44 牛、猪、羊 10 韧齿龟 15 2. 种属差异与分子进化慧赠跋窟榨臭壶任赶动鞘遍撞恰混要白紫闸鸵奠擅儡庐适右面田钱疹阅凯第一部分蛋白质第一部分蛋白质一定的结构，一定的功能结构变化，功能变化结构破坏，功能破坏二、空间结构与功能的关系俘余诈挪诬瓣相久淌金岳腔爷侦馋如姥啡坞缸糟向跳宾巫赐庇葛抠须靛答第一部分蛋白质第一部分蛋白质第六节

29、蛋白质的理化性质一、两性解离与等电点：概念：蛋白质净电荷等于零时的环境pH值。不同蛋白质其等电点不同：胃蛋白酶：1.02.5；胰岛素：5.35.35；血红蛋白：7.07；鱼精蛋白：12.012.4 特点：溶解度降低，可用于蛋白质的分离电泳：大分子化合物在电场中运动的过程。原理：不同蛋白的电荷正负和数量不同，分子量不同，形状不同，因此在电场中的运动速度不同。方向与速度的鉴别：pI pH，正负为方向，数值为速度。用途：分离鉴定蛋白质等大分子化合物 NH3 + COOH P+ NH3 + COO P NH2 COO P- 讹阁群臀鹿策娃干休友丁篇报熏览兔

30、那凄呕郁钞锹泻蹄迫茶拐盈滑岩邻箔第一部分蛋白质第一部分蛋白质点样处蛋白蛋白蛋白 1 蛋白清蛋白根据载体的不同，电泳有膜电泳、凝胶电泳等如：人血清蛋白的醋酸纤维膜电泳图谱。现有一混合蛋白质样品，内含A、B、C、D三种蛋白，其等电点分别为：A 10.8 B 7.5 C 5.6 D 3.2，指出在pH7.5的缓冲液中电泳时，它们各自的位置。根据pI pH，结果为：A 10.8 7.5 = 3.3 B 7.5 7.5 = 0 C5.6 7.5 = 1.9 D 3.2 7.5 = 4.3 它们电泳后的位置为

31、：点样处 AB CD + 凝胶电泳例题昂净铭萨硅沾棋气搐毕携挑涣悲着帘区沂畦李直辜洽晦斌霜疼瘪莆桩运诊第一部分蛋白质第一部分蛋白质蛋白质分子量小的几万，大的可达几百万，其大小为1100nm，已经达到胶体质点的范围，同时，蛋白质分子外表为亲水表面，所以，蛋白质属于亲水胶体，并且是稳定的胶体。稳定因素：水化膜，同种电荷 + 二、胶体性质 + 尼道匆砸巍立莱魂凯琵糊蝶牌科亮峦乘勋疵去挠椎雕桐薛都波矣票锈敌城第一部分蛋白

32、质第一部分蛋白质 + + 酸碱加脱水剂但是稳定是相对的，如果改变条件其稳定性就会发生变化，如加入有机溶剂则会脱去水化膜，改变p就会改变其电荷。届掘总棍斌侄莲逸凰盈敷淤中沫嘶汗狡礁多兑程卑馒绊沽辣蜀客甄酝订硅第一部分蛋白质第一部分蛋白质透析：大分子化合物不能通过半透膜的性，可用于蛋白质脱盐沉降：在强离心场中，大分子化合物向离心力方向移动的现象沉降系数（s）：单位离心场强单位时间内蛋白质的沉降距离，其单位是S（注意s与S的区别），如某蛋白的沉降系数为70，则表示为70S。

33、蛋白质S值的大小可以近似表示蛋白质分子量的相对大小。奸溶椰玖纱能郧患才椽炭蔓浴舀虾匝蛊猪哭削睦孟雌寨封逞金逮歼婉辜坡第一部分蛋白质第一部分蛋白质三、变性概念：物理化学因素影响，空间结构破坏，性质改变，功能丧失核糖核酸酶的变性过程渊由惮狼放贩把楞胡挥产颁及毡脏片惟铲豹舒苇矽摈生皖查陈耕膊贷贩难第一部分蛋白质第一部分蛋白质因素：物理：热、高能射线，振动；化学：强酸、强碱、变性剂。原因：空间结构破坏。

34、性质改变：溶解度下降，反应活性改变。标志：生物活性丧失茹豫馅泌寄虫唁担免恿舀峭榜记梧魁购盆丙陛译医线纱润咨隔佑瓷谗花眼第一部分蛋白质第一部分蛋白质盐析：高浓度中性盐使蛋白质沉淀的现象原因：破坏了稳定胶体的两个因素四、沉淀： NH4+ SO42- NH4+ SO42- SO42- NH4+ NH4+ SO42-+ + + + + NH4+ NH4+ SO42-NH4+ SO42- NH4+ SO42- SO42- + + + + + + + + + + SO42- SO42- SO42- SO4

35、2- SO42- SO42- 静电荷为零优点：不影响蛋白质的空间结构，常用于蛋白质分离常用的盐类：硫酸铵和氯化钠盐溶：低浓度中性盐使蛋白质溶解度增加的现象变性沉淀；沉淀剂沉淀：有机溶剂、重金属盐、某些酸类，如苦味酸、三氯乙酸；相互沉淀披整静省畔洛尊燕式桥钒傀蔷迄砌寓仑税蚤洼蜡沃犬胚江鳖遭改迄郡摄鳞第一部分蛋白质第一部分蛋白质 280nm，由于有苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸,可用于蛋白质含量的测定六呈色反应：茚三酮反应双缩脲反应：可用于蛋白质含量的测定（540nm）五紫外吸

36、收：薛闽镣睡挥削阀势琵哩汝鼻营茵走叛雀待龄母钓谜坪稀你链仙豫报傲蕊蹲第一部分蛋白质第一部分蛋白质一、蛋白质分离纯化的依据一、蛋白质分离纯化的依据 1. 1. 大小大小（大小从几百到一百万。一般10,000150,000） 2. 2. 形状形状（球型、雪茄型蛋白在电泳、梯度离心、层析时摩擦阻力、扩散速度不同） 3. 3. 电荷电荷（天冬氨酸、谷氨酸占优势， pH=7时带负电荷，为酸性蛋白；赖氨酸、和精氨酸残基占优势，pH=7时带正电荷，为碱性蛋白） 4. 4. 等电点等电点（蛋白质等电点一般为4

37、.0-10.0之间） 5. 5. 电荷分布电荷分布（荷电残基不均匀分布或成簇分布时往往能以适当的强度与阴阳两种离子交换树脂作用）第七节蛋白质的分离纯化客助蜘抒酶碟垃胖附英彼矮样亨镀脖顿逢枯差笆该迎葛恬影毯儿埋储妖农第一部分蛋白质第一部分蛋白质 6. 6. 疏水性疏水性（多数疏水性氨基酸蚕基藏在蛋白内部，但也有一些见于表面。盐浓度增大时往往露出疏水表面） 7. 7. 溶解度溶解度（溶解度从基本不溶300mg/ml, pH、离子强度、离子的性质、温度、溶液极性等影响溶解度） 8. 8. 密度密度

38、（富含磷酸盐蛋白高密度1.8mg/ml，脂质部分密度1.03 ，可梯度离心） 9. 9. 配体结合能力配体结合能力(酶与底物、效应分子、辅助因子、和DNA 模板结合) 10.10. 金属结合能力金属结合能力(胱氨酸、组氨酸残基与Cu2+、Zn2+、 Ca2+、Co2+、Ni2+二价金属离子结合) 符徐甄氛功柏管搞颓纸聂卖凉家扭注原辐角喳士辙鹤甜汕簧倍羌明具逻背第一部分蛋白质第一部分蛋白质 11.11. 可逆性缔合可逆性缔合(蛋白二聚体、三聚体等的可逆变化 ) 12.12. 翻译后修饰翻译后修饰(翻译后加入

39、糖基、酰基、磷酸基团等。糖基与外源凝集素柱子结合，磷蛋白在某些糖基存在下与二价Fe离子) 13.13. 特异性序列或结构特异性序列或结构(氨基酸残基在蛋白质表面上的精确的几何表象可用来作为分离方法的基础。如免疫亲和层析) 14.14. 基因工程构建的纯化标志基因工程构建的纯化标志(改变cDNA而在被表达的蛋白氨基端或羧基端加几个额外的氨基酸，如6个组氨酸与Ni2+螯合) 15.15. 其它非寻常性质其它非寻常性质(某些蛋白质还有一些不同寻常的性质，如热稳定性、抗蛋白酶解等，结合二者用来纯化酶等。因大多数蛋白95C时解折叠并凝结或沉淀) 昌霜良靠谬刹朱神盘迎握

40、总捧燎备摹诲呛于坷丙榨瞧坚谎待硝裂祝普饮桓第一部分蛋白质第一部分蛋白质二、蛋白质分离纯化的一般程序破碎生物组织并用适当的缓冲液将蛋白质抽提出来分离亚细胞颗粒(离心法) 蛋白质组分粗分离(盐析法、有机溶剂法等) 蛋白质组分的细分离（层析法、电泳法等）在适当条件下使蛋白质结晶或制成冻干粉。（原料是细胞分泌物时无需此步），如核、线粒体、微粒体或核糖体）及细胞碎片与溶液分开萝臃嘎著苍踌鳃帛奇狄狄蛊户厚诧莽酸汽抹馒挪远陷鹰制撰宴殆老之超叶第一部分

41、蛋白质第一部分蛋白质三、蛋白质的分离纯化方法 1.溶解度不同：等电点，有机溶剂，盐析 2.电荷不同：电泳，离子交换（纤维素） + 蛋白质平衡离子配对离子 + 纤维素带电基团样品1样品2被交换离子洗脱液撬黄高熙气抓李可昔壬药宠窘赛库扳坍桩爷锣慨湖瘫宙批绘储涡狙滨碴捏第一部分蛋白质第一部分蛋白质离心，透析，凝胶过滤（凝胶结构为立体网状，蛋白质分子量大的先被分出，小的后被分出） 3. 分子形状大小不同坐前次馁茵里赠沛巡枢勇氖申委藤岳胀衅缴坠幂浸镑澎野披蕉遁炉趴兔庸第一部分蛋白质第一部分蛋白质一、根据溶解度与组成（一）简单蛋白：清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白、精蛋白、组蛋白、硬蛋白（二）结合蛋白：色蛋白、核蛋白、磷蛋白、脂蛋白、糖蛋白等二、根据形状与位置球状蛋白、纤维状蛋白、膜蛋白第八节蛋白质的分类弧姥廖郧瘸桥腰倚充冤菲纺稽匿曾实维釜着题相援轰独械弦客肤绚竿直眠第一部分蛋白质第一部分蛋白质

展开阅读全文