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1、黄曲霉毒素B1酶联免疫竞争检测法,酶联免疫竞争法工作原理,样 品,样品,黄曲霉毒素B1分子,微孔板,微 孔 表 面 情 况,AFB1抗体,标准品,标准溶液,酶标抗原,酶标抗原,酶,AFB1,标准品, 样品 和 酶标抗原加进微孔,样品,酶标抗原,样 品 孔,先加,后加,标准品,酶标抗原,标 准 孔,先加,后加,孵育30分钟,抗 原 与 抗 体 结 合,微 孔 清 洗,洗涤5次，间隔2分钟,加入酶催化反应底物,加入反应底物A和B,孵 育 15 分 钟,显 色,反 应 孔,阴 性 对 照 孔,阴性对照孔=没有黄曲霉毒素B1分子与酶标抗原竞争所有抗体都与酶标抗原结合,阳 性 对 照 孔,1 ng/ml
2、 标准孔 = 黄曲霉毒素B1分子结合到抗体上剩余的抗体再与酶标抗原结合,阳 性 样 品,酶标抗原结合得越少，颜色越浅,加入终止液，反应液由蓝色变成黄色，上酶标仪读取数据，画标准曲线,调零孔,阴性孔,0.1 ng/ml,0.5 ng/ml,1 ng/ml,5 ng/ml,10 ng/ml,酶联免疫竞争法标准曲线,0.1,1,10,ng/ml,O.D.,不同温度条件下的标准曲线,0.1,1,10,ng/ml,O.D.,调零孔,阴性孔,0.1 ng/ml,0.5 ng/ml,1 ng/ml,5 ng/ml 10 ng/ml,以相对吸光度值为纵坐标三种不同温度下的标准曲线Y=A/A阴性孔,0.1,1,10,ng/ml,100%,50%,调零孔,阴性孔,0.1 ng/ml,0.5 ng/ml,1 ng/ml,5 ng/ml 10 ng/ml,31,