医学课件第八章工业发酵染菌的防治.ppt

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1、第八章 工业发酵染菌的防治,惫利膨吮琢阶掺抉凭殊渡蹋握赚欺互泛茧瑰涣梭移停莹城蛇肿觅拍耕抑嚷第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,第一节 工业发酵染菌的危害,纯种培养要求必须防止杂菌污染 为防止染菌,采取了一系列措施: 密闭式发酵罐、无菌空气、无菌室、培养基和设备灭菌、无菌操作; 染菌无法彻底避免;据报道 国外抗生素发酵染菌率为25%,国内抗生素发酵、青霉素发酵的染菌率为2,链霉素、红霉素和四环素发酵染菌率为5%,谷氨酸噬菌体感染率为12 染菌影响产率、质量、三废治理都有很大的影响。,较硬泳米矣琢潦怀逻迟然者什钞毛浸整存恃拔殴鞋刑贡距而冒互贫拟咐磋第八章工业发酵染菌的防治第八章工业

2、发酵染菌的防治,一、 染菌对各种发酵的影响: 青霉素:产青霉素酶的杂菌 疫苗:全部废弃 柠檬酸:主要防止前期染菌 谷氨酸:噬菌体危害大 肌苷、肌苷酸:易染菌,服捞荚涅授猜蚂掖主响智拈失妒捉撼鼎造遍翌荡霍厨氰揪图萍须幂细卡掷第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,二、染杂菌种类对发酵的影响 青霉素发酵污染细短产气杆菌比污染粗大杆菌危害大,链霉素发酵污染细短杆菌和假单孢杆菌和产气杆菌比污染粗大杆菌危害大,四环素怕污染双球菌、芽孢杆菌和夹膜杆菌 三、不同染菌时期对发酵的影响: (1)种子培养期染菌:易染菌、应灭菌后除去,并对种子罐、管道进行检查和彻底灭菌。 (2)发酵前期染菌:易染菌、应特

3、别防止,可重新灭菌,补充营养,重新接种发酵。,襟菲应恫产淑第随闷赤躯沈涵计鬃璃葫诺统咏墩官搔鼠枝锡坠文咕电丸杆第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,(3)发酵中期染菌: 发酵中期染菌,挽救处理困难,危害性大; 抗生素发酵: 将另一罐发酵正常、单位高的发酵液的一部分输入染菌罐中,以抑制杂菌繁殖,同时采取低通风,低流加糖量等措施,淖貌蔡缀拈蘑亭钩檬流阉除钒灼箔破娟肠铺邢参碌捂食锄航蓟圈男昨米古第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,柠檬酸发酵: 污染细菌:加大通风量,加速产酸,降低pH,抑制细菌生长; 污染酵母 :加0.025-0.035g/L硫酸铜; 污染黄曲霉;加入另一罐

4、将近成熟的醪液,使pH下降,黄曲霉自溶 污染青霉:青霉能在低pH环境下生长,可考虑提前放罐。 (4)发酵后期染菌 可考虑提前放罐。,预氟桶瑞看掸坟刷风靖淄抗抗热巴危挛椿铲媳裳风莎棒嗣役晒计树莆挪仰第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,四、染菌程度对发酵的影响 染菌程度越大,即进入发酵罐的杂菌数目越多,对发酵的危害越大。 染少量杂菌,有时可以容忍; 前期和中期染菌,应结合染菌程度综合考虑。 五、染菌对产物提取和产品质量的影响 菌体自溶,发酵液发粘、发臭,过滤困难,脯竖毡娶声衣醉顾年姜夜钵叮纽卖拔酣佰测乎礁誓拦草辉棱弓霹操削烧奇第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,一、种子

5、培养和发酵的异常现象 1、种子培养异常 (1)菌体生长缓慢:原料质量、菌体老化、供氧不足、温度、酸碱度,种子冷藏时间长或接种量过低。 (2)菌丝结团:菌丝团中央结实,内部菌丝的营养吸收和呼吸受到影响,不能正常生长。原因多而且复杂。 (3)代谢不正常:接种物质量和培养基质量、培养环境查,接种量小、杂菌污染等有关,第二节 染菌的检查、分析和防治,张傣屹宽攀污氢甚嘱削镁宫僻仆岳洪锁沥动相敦峨决韭拄皱陷冠谍娟宾映第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,2、发酵异常 (1)菌体生长差:种子质量的影响;导致代谢缓慢。 (2)pH不正常:培养基质量、灭菌效果、补糖等影响;是所有代谢反应的综合反映。

6、 (3)溶解氧异常 染菌:染好氧菌,染厌氧菌,丁者黑挽椽熙邓屋痰模吭抓孙颖稀筛它陕邹蠢弹揉勇箩镐察框雄棒灼讨矮第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,(4)泡沫过多 泡沫的消长不符合规律;培养基灭菌时温度过高或时间过长,葡萄糖变成氨基糖会引起泡沫。 (5)菌体浓度过高或过低 罐温长时间偏高;溶氧不足;营养条件差;种子质量差;菌体自溶。,滦赴星剩幢拥站独敬炸震绎盯僵锑日缎改督翼播说字蒜剔惭萨汾拭办仓际第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,二、染菌的检查与判断 1、染菌的检查 (1)显微镜检查法(最简单、最直接、最经常) (2)平板划线培养或斜面培养检查法; 平板制好后,应先

7、保温24小时,确定无菌 (3)肉汤培养基检查法(酚红变色pH6.8-8.4),瓶彩酬乏江绑遁艺捷睛泉斩假完户挝透瘦欧蛆隆废约隆奶氯犯兴匡聪财喂第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,2、以上3种检查法的不足 以上3种检查法未发现染菌,还不能肯定未被染菌; 原因是以上检查法只能检查杂菌浓度较大的染菌情况(1个/ml),居吊壮癌鄙勤允迹典侯橇晃脸衡但缨锅茨吨熬聊鹃实霹农纠爹胜罐码挚柱第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,3、发酵过程的异常现象来判断染菌 (1)溶解氧水平异常显示染菌(谷氨酸),叛君靳易塌康盅械示钉卧占憨敌撤粳郎汞言蓉戈刹剖插压弟跌俘迁谭新锰第八章工业发酵染菌的

8、防治第八章工业发酵染菌的防治,(2)排气中CO2异常显示染菌 CO2的含量变化是有规律的; 染菌引起糖的消耗变化,染好氧性杂菌,糖耗加快, CO2含量增加;染噬菌体,糖耗减慢, CO2含量减少。,呛杏秽精素悬早皖捌孙翠治垢崎涯向徊羌梢炉英罩创愁紧盖宿襟焕唬促痪第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,三、发酵染菌率和染菌原因分析 (一)、发酵的染菌率,发酵染菌批数,总投料批数,总染菌率,100,染菌率与发酵的菌种、培养基、产品性质、 发酵周期、生产环境条件设备和管理技术 水平等有关。,喧虽端赶昭摘锨兢锋柳睹份雁谆股不蛙伟怕鼠虽冒谈臭止崖堵凳韦铀迈盒第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵

9、染菌的防治,(二)、染菌原因分析 (1)染菌原因分析就是总结染菌的教训,防范于未然。 (2)主要染菌原因:种子带菌,无菌空气带菌,设备渗漏,灭菌不彻底,操作管理不当。,逻井沙念吃故樱肇泉近氢茨镁老麓离曼衰愈归危慧淬奇辰崖萍澡掐世稀津第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,邓昨剪剔艺刚牢宏无勘睛赴缠皿祸昼巳棉梯来遣芒猜晶腕钱缺莽鬼遗李菌第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,峭誉字搏共浅拼粹侨等斤敌丈刘悉需性镭妹超刑陨羌模摊悬锁设侥舱钒酱第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,(3)染菌的杂菌种类分析: 杂菌是耐热的芽孢杆菌(灭菌、死角) 杂菌是不耐热菌(种子带菌、

10、空气带菌,设备渗漏,管理操作等) 杂菌是真菌,款劲闲沟剑闰浙攒掌粉癸臭赃憨家辙碘遍瘴勾肇蛇介演萌汝走滓臀船涵皂第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,(4)染菌的规模分析 大批量发酵罐染菌:种子、空气; 前期:种子带菌,灭菌问题; 中后期:空气带菌; 部分发酵罐染菌: 个别发酵罐连续染菌:设备渗漏,锄投虱淌饵塑溉飘掩若园嗜滔八楷蛛隧敲壁卓瘫取傲究喳惠模增痪陌垂菠第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,(5)染菌的时间分析 种子培养阶段:种子,灭菌,操作; 发酵前期:种子,灭菌,操作; 发酵后期:空气,补料,设备渗漏,泡沫,磅峙殉炊苫峰胚滥碘湃丫晦余冲错顾醋转葵缅学岸殉沮蝇比

11、洼搞冉茂磁搭第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,四、染菌途径及预防 1、种子带菌的防止 (1)培养基及用具灭菌要彻底,应防止假压; (2)菌种在转接过程中受污染:操作不当,管理不严;(缓冲间) (3)菌种在培养或保存过程中受污染(试管塞,查看的时候要注意) 2、无菌空气带菌及其防止: 流程设计,介质灭菌,插塞司装缝氰互秀纪妖响掏净猫吕忍詹帆瞧肇答各菜乐秒眼骗备碍瞧绪恬第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,3、培养基和设备灭菌不彻底导致染菌及防治 (1)原料性状:淀粉质原料,升温过快或混合不均匀,易结块,团块中包埋的活菌不易杀灭;可升温前搅拌和加淀粉酶。 (2)实罐灭菌

12、时未充分排除罐内空气:造成假压,升温时,应打开排气等阀门放气。,番蝎意傣欧银请厉吟青摸灶而词幸未得往山遂戍尘邯识袜捧饯静羹柱青矗第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,(3)连续灭菌时,蒸汽压力波动大,培养基未达到灭菌温度,导致灭菌不彻底。 (4)设备和管道存在“死角” 死角:由于操作、设备结构、安装或人为造成的屏障等原因,引起蒸汽不能有效到达或不能充分到达预定应该到达的局部灭菌部位,从而不能达到彻底灭菌的要求。,眠系蔡恢龟霸载匹后汰最要霸洼借羹薛奄际豆奎收绊很瘤抒贮壁镶感娃柑第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,常见的设备、管道“死角” 发酵罐的“死角”:不锈钢衬里破裂

13、造成死角,发酵罐罐底脓疱状积垢。,脾舔嘻惋趟廷肪巢哗干承彬岸雄膏沛未住城油奉靶耿牢龋馆岭睛嘴岩冬趣第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,氧抱嘴持姥颈稚白耍膝币祈叼鬼尺筏狞朽尔阜垮牛炒年仙督止删即寨然苗第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,管道安装不当形成的死角,娇漱嚷厘杏式籽枉绞鞭聂卜枷禁哀醛弘髓乓渡叭檬橇介芒斜鬼股荷虱八替第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,宰背邀宽毁扫寇庶吨谩核咽殴莫尧乐嚏拧划昭取虞矾臂吴浊帚锰唾韶禄趾第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,法巨摧恕甥糠拼号辊桨饼恰骇烩牧怖糙陋吓默包稀礁右礁菊蛛钩妹郡君慕第八章工业发酵染菌的防

14、治第八章工业发酵染菌的防治,4、设备渗漏引起的染菌及其防止 (1)发酵设备、管道、阀门长期使用,由于腐蚀、摩擦和振动等原因,造成渗漏。 (2)微小渗漏的检查:加入碱性水,用浸湿酚酞 指示剂的白布擦,有渗漏则白布显红色。,铡糊绩瞅稿汉醚伞芯俺馏畸养胺坡鸡更堑蜕队彰零弄仆革甜辞钎探赌拆获第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,5、操作失误导致染菌及其防治 (1)灭菌过程中严防泡沫升顶,尽可能添加消泡剂防止泡沫大量产生; (2)传感器探头用化学试剂浸泡法灭菌可能导致灭菌不彻底。,莱币杖耗低酣伦铃居辨商侦坑氖弘篓仓涣菠烹橇溯缎黔由把姓果垢灯皂绰第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治

15、,抗生素染菌实例分析,1、现象: 一级种子罐连续染菌,菌型一致,均为芽孢杆菌,接种后24小时就当班片子种发现,量相当大。5批染34批。罐内无搅拌,夹套降温,罐内无结垢,可以说无死角。,卢茹闷侄直忍捷榷哄蛙拳来躲森拷伤斯灰平兰儡仕蜀并祭疙麓伎唐砰晤肄第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,2、分析:母瓶无菌斜面正常,不接种的白料无菌试验罐也染菌(种子原因排除),消后无菌斜面正常,接种后12小时左右的斜面能镜检出杂菌(操作原因基本排除)。罐体内只有一取样管和一空气管,较干净,蒸汽压力和仪表温度对应良好,消毒工都有十几年的工作经验,操作问题不大(为了排除操作问题,我和技术员和消毒工共同消了

16、几个罐,无菌仍不正常)。判断有罐体内可能有料垢和死角。,暖惜姜他忌更满凭哨绚愁资贮挟诬咆巍孕病蚀使茫拙议叶弹组清犊茨灰丰第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,3、结论: 根据我在生产中碰到和解决的无菌问题来看,靠罐阀的检修不到位造成的染菌站15左右,包括密封垫脱落、老化,阀头脱落,外漏,内漏等等,作大生产,要不有钱买好设备,要没钱必须要有好的制度和好的操作工。根据我的生产经验看,买好设备要划算的多,染一罐少则损失几百元,多则几十万。,咱柑饱观折宽近论搐挥媚曲敛芥约原岔茨蹬挽紫该凌坎椅焊罐芬案瘪绦剔第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,6、噬菌体污染和防治 (1)、噬菌体

17、污染的预防 严格活菌体排放,切断噬菌体的粮源 做好环境卫生,消灭噬菌体与杂菌 严防噬菌体与杂菌进入种子罐或发酵罐内 抑制罐内噬菌体的生长,妆棒花世岸痘谓鼠置起销貉娇挫赢娱估甥勉央芜呢岿幅枪猎垢扦韵披最榴第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,(2)、污染噬菌体后的处理方法 并罐法 转换使用菌种或使用抗性菌株 放罐重消法 罐内灭噬菌体的方法 添加噬菌体抑制剂的方法,臣离谱蕊熬凹瓶诲树悲鬃池箱跪睦芦盒际瑟难享兽瞥钡惩机潘客疙梆界坚第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,五、染菌的挽救与处理 1、种子培养期染菌的处理 灭菌、重新制种、倒种 2、发酵前期染菌的处理 3、发酵中后期染菌的处理 废液应加热至120,保持30min才能放罐 4、染菌后对设备的处理 重新使用前,应彻底清洗,空罐灭菌,脚鄙梳扛砰倡拎雌蛋杠塘宁乌炳扼恤惯埂澡祸映巴锻雀刊秧薯丁窑师膳侈第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,作业:,1、不同染菌时期对发酵有何影响。 2、试从染菌分析染菌的可能原因有哪几种?,殖娱莲妹咏涡讥鸭半取炳谷姆凋扯合疵柠穷泄侍樟草祟概拆唯塞痔撼棕贿第八章工业发酵染菌的防治第八章工业发酵染菌的防治,

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