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1、1,临床生物化学检验,北京协和医院检验科生化室程歆琦,2,3,4,生物化学,临床生物化学的主要任务,分子生物学,免疫学,化学,生物学,探讨疾病的发病机制,研究病理过程中出现的特异性化学标志物,研究病理过程中体内特定成分的改变,5,病史,临床查体,诊断学检查,实验室检查,影像学检查,生物化学检验,血液学检验,病理学检验,免疫学检验,微生物检验,6,7,8,糖代谢紊乱的检查,9,10,氧化供能,血糖 (3.96.1mmol/L),转化成其它物质（甘油、脂肪酸、氨基酸等）,合成糖原,超过肾糖阈时经尿排出,胰岛素,糖异生,食物中的糖类,糖原分解,胰高血糖素、肾上腺素、生长激素、皮质醇,11,血糖测定,
2、葡萄糖氧化酶法： 葡萄糖 + O2 + H2O 葡萄糖酸 + H2O2H2O2 + 苯酚 + 4-氨基安替比林 醌亚胺(520nm) + H2O 颜色深浅在一范围内与葡萄糖浓度成正比。空腹血糖（FPG):至少8小时不摄入含热量食物后的血浆葡萄糖含量。参考范围：3.96.1mmol/L,GOD,POD,12,临床意义,升高：出现糖尿病症状加上随机血糖11.1mmol/L或空腹血糖(FPG)7.0mmol/L可诊断糖尿病。,13,14,血糖测定的影响因素,全血标本放置1h,室温血糖降低0.44mmol/L，4降低0.060.17mmol/L，因此全血标本应在2h内（最好30分钟）分离血清或血浆待测
3、。不同抗凝剂对血糖稳定性的影响：NaF抗凝，采全血3h后，血糖仅降低0.56mmol/L，其后一直稳定。全血比血浆约低10%；空腹血糖，末梢血比静脉血低0.22mmol/L。,15,糖耐量试验口服或注射一定量葡萄糖后，每间隔一定时间测定血糖水平，称为糖耐量试验。（GTT）口服葡萄糖耐量试验（OGTT）静脉葡萄糖耐量试验（IGTT）,16,17,OGTT试验的方法,将75g无水葡萄糖溶解在300ml水中，坐位取血后5分钟内口服，服糖后每隔30分钟取血1次，共4次。于采血同时，每隔1小时留取尿液作尿糖试验。,18,葡萄糖耐量曲线,19,胰岛素测定,测定方法：放射免疫法（RIA）、酶联免疫吸附法（E
4、LISA)和化学发光法等。临床意义：用于糖尿病的分型诊断及低血糖的鉴别诊断。胰岛素正常：健康人、某些2型DM等。胰岛素升高：胰岛素瘤、肥胖及2型DM等。胰岛素降低：1型DM。,20,C肽测定,21,优点：不被肝脏破坏，只在肾脏降解和代谢；外源性胰岛素不含C肽，不与胰岛素抗体反应；因此C肽测定能够更好的反映胰岛B细胞的胰岛素合成和释放功能。临床意义：胰岛B细胞瘤：胰岛素和C肽均升高；外源性胰岛素过量引起低血糖：胰岛素升高，C肽降低；评估胰岛素分泌,22,糖化蛋白,糖化蛋白： 糖类物质通过糖基和蛋白质的氨基酸基团结合形成的糖基化产物。影响因素： 糖化蛋白浓度主要受相关蛋白质半寿期及某一时期内平均血
5、糖水平影响，不受饮食、运动及每天的血糖波动的影响。临床意义： 主要用于评估血糖控制效果，不用于诊断。,23,糖化血红蛋白,由葡萄糖和血红蛋白的氨基酸残基缩合而成。糖化Hb有多种结构，主要成份为HbA1c，约占80。HbA1c浓度与红细胞寿命和68周内血糖的平均浓度有关，反应检测前1 2个月内的平均血糖水平。国际公认的监测血糖控制水平的最佳指标。,24,脂类代谢紊乱的检查,25,26,血浆脂蛋白,27,载脂蛋白的功能构成并稳定脂蛋白的结构修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性作为脂蛋白受体的配体，参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢。,28,29,30,31,胆固醇测定-胆固醇氧化酶法 胆
6、固醇酯+H2O CHE 胆固醇游离脂肪酸 胆固醇2 COD 4胆甾烯酮H2O2 2H2O24氨基安替比林酚 POD 醌亚胺 醌亚胺的最大吸收峰在500nm，吸光度与标本中的胆固醇含量成正比参考范围：血脂异常防治建议规定，TC5.20mmol/L为合适范围，5.235.69mmol/L为边缘性增高，5.72mmol/L以上为升高。,32,酶法测定TG,33,血浆脂蛋白测定,超速离心分离纯化法电泳分离法血浆脂蛋白胆固醇测定,34,HDL-C和LDL-C的参考范围,HDL-C:我国血脂异常防治建议中提出，HDL-C的合适范围为1.00mmol/L。LDL-C:合适范围3.64mmol/L。NCEP
7、ATP明确要求，高脂血症患者血LDL-C的治疗目标定为2.6mmol/L以下。,35,载脂蛋白测定,测定方法：免疫透射比浊法。测定项目：apoA、apoA、apoB100、apoC、apoC、apoE等。临床意义： apoA随HDL-C水平变动；apoB随TC和LDL-C水平变动。AS和CHD时apoA下降、apoB升高。CHD时apoB升高比TC、LDL-C升高更有意义；脑血管病时，以apoA和HDL-C下降更为明显。,36,37,水、电解质平衡与酸碱平衡紊乱的检测,38,缓冲体系,肺,肾脏,水、电解质、pH平衡,内环境稳定,39,一、水平衡,60%,70%,40,体液容量及分布,60%,细
8、胞内液40%,细胞外液20%,血浆5%,组织间液15%,41,水平衡紊乱,饮水1200食物 1000 代谢水 300,尿 10002000肺 200400皮肤 300600 肠道 100200,2500,2500,42,二、水钠平衡紊乱,低血钠 正常 多,低体液 多,低容量性低钠血症（低渗性脱水）,高容量性低钠血症 （低渗性水肿）,低容量性高钠血症（高渗性脱水）,高容量性高钠血症 （高渗性水肿）,高容量正常钠血（等渗性水肿）,低容量正常钠血（等渗性脱水）,43,体液的电解质,Cl,Na,Na,Cl,K,HPO4,血浆,细胞间液,细胞内液,K,Ca Mg,K,Ca Mg,HCO3HPO4,HCO
9、3HPO4,HCO3,SO4,SO4,SO4,Pr,Pr,有机酸,有机酸,Na,Ca,Mg,44,钾摄入与排出平衡,尿液80 90%,粪便10%,汗液,摄入 50200 mmol/L/天,少吃少排，3050 mmol/d 不吃也排，5 10 mmol/d,45,细胞内外的转移,跨细胞转移,Na-K-ATPase,胰岛素 Na-K-ATPase 进Ke 高 进 低 出酸碱平衡 酸 出 碱 进,钾细胞内外平衡,46,参与细胞内的正常代谢维持细胞内容量、离子、渗透压及酸碱平衡维持神经肌肉的应激性维持心肌的正常功能,钾的生理功能,47,钾浓度的调节 进入K+过多： 血K +暂时升高 刺激胰岛素分泌 刺
10、激醛固酮分泌 K +转入细胞内 远由小管分泌K 尿K +升高 血K +恢复正常,48,离子选择电极法 检测电极表面电位的改变，依钾电极、钠电极或氯电极与参比电极表面电位变化的大小计算样本中钾离子、钠离子或氯离子的含量。参考范围：血清钾：3.55.5mmol/L 血清钠：135145mmol/L 血清氯：96106mmol/L 脑脊液氯： 120130mmol/L,钾、钠、氯测定,49,低钾血症K+3.5mmol/L,原因和机制,摄入不足血浆稀释,排出增多,跨细胞转移,肾脏丢失,胃肠道丢失,利尿剂,肾上腺皮质激素,碱中毒,碱性药物,50,高钾血症K+5.5mmol/L,原因和机制,输入过多,从细
11、胞内移出,排泄障碍,肾脏,酸中毒,细胞损伤,输液过多、过快,51,血液气体分析,所谓的血气是指血液中所含的氧气和二氧化碳气体。是评价病人呼吸、氧化及酸碱平衡状态的必要指标血气分析主要项目；血液氧分压、二氧化碳分压、和PH值,52,氧的运输,ctO2=O2Hb+cdO2氧在血液中大部分是通过与血液中的Hb结合成氧合血红蛋白而参与运输的。物理溶解的氧(cdO2)量极少，仅占血液总量的23,53,Hb与O2可逆结合的程度，取决于血液的氧分压。当PO2升高时，促进O2与Hb结合，PO2降低时O2与Hb解离。血液HbO2的量与Hb 总量之比称之为血红蛋白氧饱和度。以PO2值为横座标，血氧饱和度为纵座标，
12、求得血液中HbO2的O2解离曲线，称为HbO2解离曲线。,54,55,H-H公式,血液pH主要是由HCO3-/H2CO3缓冲对所决定，据H-H公式运算 pH=6.103+log HCO3-代谢因素 H2CO3= PaCO2呼吸因素（ 为CO2在血液中的溶解系数）,56,血气分析仪测定原理及仪器结构,目前的血气分析仪主要由专门的气敏电极分别测出O2、CO2和pH三个数据，再参考Hb及体温的数据计算出其他诊断参数。其结构组成基本一般包括电极（pH、PO2、PCO2）、进样室、CO2空气混合器、放大器元件、数字运算显示屏和打印机等部件，进行自动化分析，其所需样品少，检测速度快而准确。,57,pH,正
13、常值:动脉血pH 7.357.45,意义: pH:失代偿性酸中毒 pH:失代偿性碱中毒,pH(-),无酸碱平衡紊乱 代偿性酸碱平衡紊乱 酸碱中毒并存相互抵消,58,动脉血二氧化碳分压,意义: 判断肺泡通气状态 判断呼吸性酸碱失衡的性质：原发性呼酸 原发性呼碱 判断呼吸衰竭类型,正常值:男性：3546mmHg,59,标准碳酸氢盐(SB),意义: 排除了呼吸因素的影响 反映代谢性酸碱紊乱,正常值: 2125 mmol/L,60,实际碳酸氢盐(AB),正常值: 2126 mmol/L,受呼吸和代谢两方面的影响当ABSB 2126 mmol/L时，正常AB ，SB 同时升高或降低，反映代谢因素 AB
14、SB，表示CO2有潴留，合并呼吸因素 AB SB，表示CO2排出过多，合并呼吸因素,61,碱剩余(BE),意义: BE正值增大代碱 BE负值增大代酸,正常值: 03 mmol/L,概念: 标准条件下，将1升全血 或血浆滴定到 pH 7.4所 需的酸或碱的量。,62,动脉血氧分压（PaO2）参考值：75-105mmHgPaO2 越高，HbO2%越高反映肺通气或( 和 )换气功能： PaO255mmHg提示有呼吸衰竭；PaO230mmHg既有生命危险。,氧分压,63,阴离子间隙(AG),概念：是指血浆中未测定阴离子量与未测定阳离子量的差值。,AG = UA - UC,Na+K+ +UC = Cl-
15、 + HCO3- + UA,UA-UC=AG = Na+ +K+ - Cl- - HCO3-,血Na+K+浓度减去血Cl和HCO3的浓度，等于血浆中未测定阴离子(UA)与未测定阳离子(UC)的差值。,64,阴离子间隙(AG),意义: AG升高：H+增加引起的代谢性酸中毒； AG正常： HCO3-原发性降低而血氯升高的代谢性酸中毒。,正常范围 Na+ - Cl- - HCO3- : 714mmol/LNa+ +K+ - Cl- - HCO3- : 1018mmol/L,65,酸碱平衡及调节,66,酸碱平衡的调节,缓冲系统 肺 肾,近端肾小管泌H,远端肾小管泌H重吸收HCO3,肾小管泌NH4 （NH 3 ）,67,Henderson-Hasselbalch方程,= 6.1 +1.3 = 7.4,68,酸碱平衡紊乱的类型,pH,HCO3-,H2CO3（PCO2）,酸中毒,碱中毒,代谢性,酸中毒,碱中毒,呼吸性,酸中毒,碱中毒,69,