常用鉴定试剂的配制和应用.docx

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1、常用鉴定试剂的配制和应用检查一般有机化合物。(1)碘蒸气预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内,使容器空间被碘蒸气 饱和,将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。有时,于容器中加放一小杯水,增加容器 内的湿度,可提高显色的灵敏度。(2) 0.5%碘的氮仿溶液喷洒试剂,置空气中待过量的碘挥发后,喷1%淀粉溶液, 斑点由棕色转为蓝色。2、硫酸试剂检查一般有机化合物。5%硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。喷洒后,置空气中干燥15min, 100C烤至斑点 呈色(不同化合物呈不同颜色)。3、重铭酸钾一硫酸试剂检查一般有机化合物。5g重钠酸钾溶尸100ml40%硫酸中。喷该试剂后,150C加热至斑点出现(不

2、同化合物 呈不同颜色)。4、磷钳酸试剂检查还原性成分。5%磷钳酸乙醇溶液。喷洒后,120C加热至呈蓝色斑点。5、磷铝酸试剂检查还原 性成分20%磷铛酸乙醇溶液。喷洒后,120C烘烤,还原性物质呈蓝色斑点。6、硝酸银一 氢氧化钱试剂检查还原性成分。溶液i: 0. lmol / 1硝酸银溶液。溶液。:10%氢氧化钱溶液。临用前溶液i和 。力1OU5混合。喷洒后105加热510min,至深黑色斑点出现。7、中性高钵酸钾试剂 检查易还原性成分。0.05%高钵酸钾溶液。喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。8、碱性高钵酸钾试剂检 查还原性成分。溶液i: 1%高锯酸钾溶液。溶液。:5%碳酸钠溶液。溶液i和。5.攘

3、炕旌鲜褂茫 。喷泗后,粉红背景上显黄色斑点。9、四喋蓝试剂检查还原性成分。溶液i: 0. 5%四哇蓝甲醇溶液。溶液。:25%氢氧化钠溶液。临用前两液等量混 合。喷洒后,微热或室温放置显紫色斑点。10、荧光素一澳试剂检查不饱和化合物。溶液i: 0. 1g荧光素溶于100ml乙醇中。溶液。:5g浪溶于100ml四氯化碳中。先 喷洒溶液i,然后将薄层板放入盛有溶液。5.母啄冢。黄色斑点出现后,丁紫外光灯下检 视,红色底板上显黄色荧光斑点。11.荧光显色试剂检查一般有机化合物。(1)0.2%2, 7-氯荧光素乙醇溶液。(2) 0.01%荧光素乙醇溶液。(3) 0.1% 桑色素乙醇溶液。(4) 0. 0

4、5%罗丹明b乙醇溶液。喷洒任一溶液,不同的化合物在荧光背景上可显黑色或其它荧光斑点。二、甘类鉴定试剂1、糖鉴定试剂(1)一蔡酚一硫酸试剂检查还原糖。溶液i: 10% 一蔡酚乙醇溶液。溶液。:硫酸。取1ml样品的稀乙醇溶液或水溶 液,加入溶液i 23滴,混匀,沿试管壁缓缓加入少量溶液。,二液面交界处产生紫 红色环为阳性反应。15% 蔡酚乙醇溶液21ml、硫酸13ml、乙醇87ml及水8nli混匀后使用。喷洒于 薄层板上,100烤36min,多数糖显蓝色,鼠李糖显橙色,所显颜色于室温可稳定2 天3天。(2)斐林试剂检查还原糖。溶液i: 6. 93g结晶硫酸铜溶于100ml水中。溶液:34. 6g酒

5、石酸钾钠、10g氢氧 化钠溶于100ml水中。取1ml样品热水提取液,加入45滴用时配制的溶液 。5. 攘炕旌弦海。在沸水浴中加热数分钟,产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和贰,取 1ml样品水提液,加入ImllO%盐酸溶液,在沸水浴上加热lOmin,过滤,再用10%氢氧 化钠溶液调至中性,按上述方法检查还原糖。(3)氨性硝酸银试剂检查还原糖。硝酸银1g,加水20ml溶解,小心滴加适量氨水,边加边搅拌,至开始产生的沉淀将 近全部溶解为止,过滤。取1ml样品的水溶液,加入1ml试剂,混匀后,40微热数分钟, 管壁析出银镜或产生黑色沉淀为阳性反应。本试剂也可作为色谱显色剂,喷洒后于T10C 加热

6、数分钟,显棕黑色斑点为阳性反应。还原性物质如醛类、邻二酚类等有干扰。(4)茴香醛一硫酸试剂检查糖类化合物。硫酸1ml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中,需临用前配制。喷洒于薄层板上, 105加热至显示色斑,不同糖显不同颜色。(5)苯胺一邻苯二甲酸试剂检查糖类化合物。苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶FlOOml水饱和的正丁醇中。作色谱显色剂用。喷 后105烤5min,显红棕色斑点。(6) 1,3一二羟基蔡酚一磷酸试剂检查酮糖、醛糖。0. 2%1, 3一二羟基蔡酚乙醵溶液50ml与85%磷酸50ml混合均匀后使用。喷后105 烤5min10min,酮糖呈红色,醛糖显淡蓝色。(7)苯胺

7、一二苯胺一磷酸试剂检查糖类化合物。苯胺4ml、二苯胺4g及85%磷酸20ml溶于丙酮200ml中。喷洒于薄层板上,85加 热lOmin,不同糖显不同颜色。(8) 2, 3, 5一三苯基氯化四氮理(t. t. c)试剂检查还原糖。溶液。04%t. t. c甲醇溶液。溶液。:4%氢氧化钠溶液。临用时将溶液。I廷5.忍寤。混合。喷洒后,100C加热5-10min,显红色斑点为阳性反应(醛类无干扰)。(9)三氯化铁一冰醋酸(k. k)试剂检查一去氧糖,常用于强心式。溶液i: 1%三氯化铁溶液0.5ml,加冰醋酸至100ml。溶液。:硫酸。取样品乙醇 提取液1ml,置试管中,水浴上蒸去乙醇,残渣用0.

8、5ml溶液i溶解,沿试管壁缓缓加入 溶液eoimi,静置分层,上层渐显蓝色,下层显红色或棕色为阳性反应(其颜色随行元羟 基和双键的位置和个数不同而不同)。(10)占吨氢醇试剂检查一去氧糖(常用于强心贰)。10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸中,再加入1ml硫酸混合。取hnl样品,加入试剂 1ml,置水浴上加热30min,显红色为阳性反应。(11)gregg-gisvold 试剂检查 2. 6去氧糖。溶液i: 10%三氯化铁溶液。溶液。:1%盐酸甲醇溶液(97. 2ml甲醇中含2.8ml 盐酸)。0. 5ml溶液i与100ml溶液。11.旌稀=。样品的乙醇溶液点于滤纸片上,晾干后, 喷洒上述混合

9、试剂,110C加热5min,显蓝色为阳性反应。(12) 3, 5一二氨基苯甲酸一磷酸试剂 检查2去氧糖。3, 5一二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于80%磷酸25ml,加水稀释至60ml。喷洒后, 100C加热15min, 2一去氧糖在日光下显棕色,在紫外光下显黄绿色荧光。(13)对硝基苯胺一过碘酸试剂检查去氧糖。溶液i:饱和偏高碘酸溶液1份加水2份混匀。溶液。:1%对硝基苯胺乙醇溶液4 份与盐酸1份混合。先喷溶液i,放置lOmin,再喷溶液去氧糖显黄色,紫外光下 显强荧光,再喷5%氢氧化钠甲醇溶液,颜色转绿,乙二醇同样显色。2、酚类鉴定试剂(1)三氯化铁试剂检查酚类化合物、鞅质。15%三氯化铁水溶

10、液或乙醵溶液,加盐酸酸化。取1ml样品的乙醇溶液,加入试剂 12滴,显绿、蓝绿或暗紫色为阳性反应。作色谱显色剂用,喷洒后,显绿或蓝色斑点为 阳性反应。(2) 4一氨基安替匹林一铁瓶化钾(emerson)试剂检查酚羟基对位无取代基的化合物。溶液i: 2%4一氨基安替匹林乙醇溶液。溶液8%铁辄,化钾溶液。作色谱显色剂 用,先喷洒溶液i,再喷洒溶液。,用氨气熏,显橙红或深红色斑点为阳性反应。(3) gibbs 试剂检查酚羟基对位无取代基的化合物。溶液i: 0.5%2, 6一澳(氯)苯醍氯亚胺的乙醇溶液。溶液:1%氢氧化钾乙醇溶 液。取1ml样品的乙醇溶液,滴加溶液。,使ph910,再加入1滴2滴溶液i,显深 蓝色为阳性反应。感谢您的阅读,祝您生活愉快。

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