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1、环境因素对微生物生长的影响班级：食品科学与工程102班指导老师：郭玉宝姓名：何月实验目的：1、了解抗生素对微生物生长的影响，学习抗菌谱实验的基本方法。2、了解常用化学消毒剂对微生物生长的影响。实验原理：微生物的生长繁殖受外界因素的影响。物理，化学，生物及营养等不同环境因素影响微 生物生长繁殖的机制不同，而，不同类型微生物对同一环境因素的适应能力也有差别。1、生物因素在自然界中普遍存在网速间的颉顽现象，许多微生物可以产生抗生素，能选择性的一致 或杀死其他微生物。不同抗生素的抗菌谱是不同的。当滤纸条上的抗生素溶液在琼脂平板 上向四周扩散后可形成抗生素浓度由高到低的梯度，将不同试验菌与滤纸条划线接种
2、。培 养后，根据抑菌带的长短可判断出该抗生素对不同试验菌生长的影响程度，初步确定其抗 菌谱。2、化学消毒剂常用的化学消毒剂包括有机溶剂、重金属盐、卤族元素及其化合物。燃料和表面活性剂。实验器材：1、菌种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽抱杆菌O 成关苴2、A 口 仆/牛肉膏蛋白陈琼脂培养基3、溶液和试剂青霉素溶液、无菌生理盐水、2.5%a酒、5%5碳酸、1豚苏尔、75叱酉1、0.25%新洁尔灭4、仪器和其他用品 酒精灯，接种环，玻璃棒，报纸，牛皮纸，银子，无菌平皿，无菌滤纸片，滴管，无菌滤 纸片，涂布棒，记号笔，高压蒸汽灭菌锅、三角瓶，量筒，棉线实验过程：一、生物因素对微生物生长的影响(1) 倒
3、平板：将牛肉膏蛋白陈琼脂培养基熔化后倒平板，注意平皿中培养基厚度均匀。(2) 贴滤纸条：无菌操作，用银子取无菌滤纸条浸入青霉素溶液中润湿，在容器内壁沥去多余溶液，再将滤纸贴在平板上。(3) 接种：无菌操作，用接种针分别取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽抱杆菌，从滤纸条边缘分别垂直向外划线接种。(4) 培养、观察：对上述平板导致于 37C,保温24h,观察细菌生长状况并记录。建素抗筐造实验示意图二、化学消毒剂对微生物生长的影响(滤纸片法)(1) 菌液制备：无菌操作将金黄色葡萄球菌菌接种至装有5mL牛肉膏蛋白月东液体培养基的试管中，37 c培养18h。(2) 倒平板：将牛肉膏蛋白月东琼脂培养基溶化
4、后倒平板，注意平皿中培养基厚度均匀。(3) 涂平板：无菌操作吸取 0.2mL金黄色葡萄球菌菌液加入上述平板，用无菌三角涂棒涂布均匀。(4) 标记：将上述平板皿底用记号笔分成三等分，分别标明一种消毒 剂名称。(5) 贴滤纸片：无菌操作，用银子取无菌滤纸片分别浸入各种消毒剂(2.5%典酒、5%炭酸、1豚苏尔、75叱酉1、0.25%洁尔灭)在容器内壁沥去多余液体，再将滤纸片 分别贴在平板上相应位置(不要在培养基表面拖动滤纸片)(6) 培养，观察：将上述平板倒置于 37c保温培养1d,观察并记录抑、青霉素对微生物生长的影响(杀)菌圈大小。实验结果:了一产工一，、-青霉 球菌 用， 没有 草芽 有抑 比
5、对 作用由图可知， 素对金黄色葡萄 有明显的抑制作 对大肠杆菌几乎 抑制作用，对枯 抱杆菌也几乎没 制，但抑制作用 大肠杆菌的抑制 大。原因：因为青霉素为窄谱抗生素，只对革兰氏阳性菌有抑制作用。所 以对大肠杆菌几乎没有抑制作用，对金黄色葡萄球菌抑制作用较大。枯草芽抱杆菌也为革兰氏阳性菌，但是它的抗逆性较强，所以抑制作用不大、滤纸片法检测的各种化学消毒剂对细菌的作用效果如下答:原因如下:居来苏尔2. 碘酒7非乙醇0. 25%新洁尔灭5%石炭酸消毒齐抑菌圈直径/mm2.5%碘酒205%&炭酸121麻苏尔775叱醇00.25%新洁尔灭40出现的抑菌带是抑制效应。抑菌带在隔一段时间后有长制，你的 菌带
6、是致 若抑菌带 出少数菌 现象？试验平板上出现的抑 死效应还是抑制效应? 在隔一段时间后又长 落，你如何解释这一75叱 醇可能是 因为挥发 作用太快, 导致没有 产生抑菌 效果。思考题：(1)根据青霉素的抗菌机出少数菌落，可能1,抑菌物质失效;2,该菌产生抗性突变，可以分解抑菌物质；3,落入了杂菌，抑菌物质不能抑制杂菌的生长。(2)利用滤纸片法测定化学消毒剂对微生物的影响时，影响抑菌圈大小的因 素有哪些？抑菌圈大小能否准确反映化学消毒剂抑菌能力的强弱？答：影响抑菌圈大小的因素：1、培养条件：温度、湿度、培养基 PH值 2、菌液浓度，制板时培养基温度。3、滤纸片中消毒剂的浓度，消毒剂效价 等。抑菌圈大小只能在一定程度上反应杀菌能力差异，但不能准确反映。