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1、1真空冷冻干燥机注意事项A: 1在进行干燥前，首先将样品物质进行简单处理，使样品形状，大小一致，松散平铺在金属盘上，或放在玻璃器皿和其他容器里，使厚度一致。2样品容器要放在金属板上，不要使容器互相叠压，要使容器与金属板不要有 间隔。3样品物质干燥完成时，样品室温度要升到（降到）室温，首先关闭真空泵 与样品室，冷凝室之间的阀门，再关掉真空泵，慢慢地打开放气阀，切不可一下 全打开，以免干燥样品被吹走。2液氮罐安全使用的注意事项A：1正常情况下，液氮贮存在密封式罐体时，要注意将液氮罐口保留一定缝隙,否则液氮气化时气体无法及时排出，极易造成爆炸事故。2液氮是低温制品，在使用过程中要防止冻伤。3在液氮中
2、操作及存取冷冻物品时速度要快，注意轻拿轻放，以免物品解冻, 造成不必要的损失。4在使用和贮存液氮的房间内，要保持通风良好，以避免空间缺氧，造成人 员窒息。5山于液氮不具有杀菌性，故接触液氮的用具要注意消毒。6液氮罐在运输过程中一定要固定好，以防震动和倒翻。7液氮罐长期贮存物品时，要注意及时补充液氮。3影响生物大分子样品保存的主要因素A:（l）空气温度水份光线样品的pH时间4细胞非玻璃化冻存的方法A:利用各种温级的冰箱分阶段降温至-70-80度，然后直接投入液氮进行保存; 或者是利用电子降温仪以及利用液氮的气.液，按一定的降温速率从室温降至 J00度以下，再直接投入液氮保存的方法。冷存管置于4C
3、10分钟 20C30分钟 80C1618小时减隔夜） 液氮槽长 期储存。5描述下菌种低温保存的几种方法A:真空冷冻干燥保藏法是目前常用的较理想的一种方法。其基本原理是在较低温度下，（-18C）, 快速地将细胞冻结，并且保持细胞完整，然后在真空中使水分升华。在这样的环 境中，微生物的生长和代谢都暂时停止，不易发生变异。一般可保存510年左 右液氮超低温保藏法液氮超低温保藏技术是将菌种保藏在-196C的液态氮，或在-150C的氮气中 的长期保藏方法，它的原理是利用微生物在-130C以下新陈代谢趋于停止而有效 地保藏微生物。是适用范圉最广的微生物保藏法，其保存期最长。因为液氮的温度可达 -196C,
4、远远低于菌种新陈代谢作用停止的温度（J30C）,故此时代谢活动已 停止。保藏期一般为23年，长的可达9年之久。80C低温冷冻保藏将菌种保藏在-80C冰箱中以减缓细胞的生理活动进行冷冻的一种保藏方法。在最适宜的培养条件下将细胞培养至静止期或成熟期，进行纯度检查后，与保护 剂混合均匀，分装（分装时应注意在无菌条件下操作）。将安甑管或塑料冻存管 置于80C冰箱中保藏。6DNA、RAN、蛋口质保存的异同DNA保存短期保存，加无菌水或TE缓冲液，4。或一20。长期保存，刚提取好的DNA直 接保存到乙醇里，放一20。或者70。o需要用的时候，再离心后，弃去乙醇，加 水或TE溶解即可。DNA本来就是酸性，所
5、以需要弱碱性环境保存，如果用中性 或者酸性环境保存时间长容易降解。RNA保存保存RNA应该尽量低温。若要长期保存需沉淀下来后置于无水乙醇冻在70度, 用的时候再离心下来除去无水乙醇，用DEPC水溶解。为了防止痕量RNase的污染，从富含RNase的样品（如胰脏、肝脏）中分离到 的RNA需要贮存在屮醛中以保存高质量的RNA,为了增加贮存RNA样品的稳定 性，可以将RNA溶解在去离子的屮酰胺中，存于-70Co RNA即使是放在80度 下也会降解，所以最好的保存方法是将RNA逆转成cDNA后保存。提取的RNA 保存在DEPC处理的水中，加入RNAse抑止剂，在80度保存2个月，应该是可 以保证不降解的。最好是反转录后保存。蛋白质保存蛋口溶液应避免极端的pH （强酸“强碱），同时也不能接近其等电点的pH。如 果保存时间在24h以内，大多数蛋白可以放置到4Co如果保存时间在24h以上，应该考虑避免蛋白溶液长菌，可以事先过滤一下或者 加入抑菌的物质（如叠氮化钠）。在4度下顶多保存一周。在20度最长保存一个 月。如果打算保存数月之久，要加入一定量甘油，避免“冻伤最好的保存办 法还是将蛋白样品冻干成粉末，放置80度冰箱。冻干在大多数情况下可以很好 地保存蛋白的活性，但不适于某些蛋口（因有些蛋白对冻干重溶时必然产生的盐 离子浓度的急剧变化反应不佳，其活性会永久丧失o）