染色液的配制.doc

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1、染色液的配制一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液A 液:美蓝(methylene blue) 0. 6g95%酉精 30mlB 液:KOH 0. 01g蒸馏水100ml分别配制A液和B液,配好后混合即可。二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A 液:碱性复红(basic fuchsin) 0. 3g95%酒 精 10mlB液:石炭酸5 . 0g蒸馏水95ml将碱性复红在 研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液。将石炭酸溶解于水中,配成B液。混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5 10倍使用,稀释液易变质失效, 一次不宜多配。三、革兰氏(Gram)染色液1. 草酸铵

2、结晶紫染液A液:结晶紫(crystal violet) 2g95%酒 精 20mlB 液:草酸铵(ammonium oxalate) 0. 8g蒸馏水80ml混合A B二液,静置48小时后使用。2. 卢戈氏(Lugol)碘液碘片1 0g碘化钾2 0g蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加 足水分即成。3. 95%的酒精溶液。4. 番红复染液番红(safranine O) 2. 5g95%酒 精 100ml取上述配好的番红酒精溶液 10ml与80ml蒸馏水混匀即成。四、芽孢染色液1 孔雀绿染液孑L雀绿(malachite green) 5g蒸馏水10

3、0ml2. 番红水溶液番红0 5g蒸馏水100ml3. 苯酚品红溶液碱性品红11g无水酒精100ml制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合,过滤备用。4. 黑色素(nigrosin) 溶液水溶性黑色素10g蒸馏水100ml 称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中,置沸 水浴中30分钟后,滤纸过滤 二次,补加水到100ml,加0. 5ml甲醛,备用。五、荚膜染色液1 .黑色素水溶液黑色素 5g蒸馏水 100ml福尔马林 (40%甲醛 ) 0 . 5ml将黑色素在蒸馏水中煮沸 5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。2.番红染液 与革兰氏染液中番红复染液相同。六、鞭毛染色液A 液:单宁酸

4、5gFeCl 3 1 . 5g蒸馏水 100ml福尔马林 (15%) 2 . 0mlNaOH(1%) 1. 0ml配好后,当日使用,次日效果差,第三日则不宜使用。B 液: AgNO3 2g蒸馏水 100ml待AgNO溶解后,取出10ml备用,向其余的90mlAgNO中滴入浓NH4ON,使之成为 很浓厚的悬浮液,再继续滴加NHOH直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。再将备用的10mlAgNO慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状沉淀又消失,再滴 入AgNO,直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重,此染剂可使用一周,如雾重,则银盐沉淀出,不宜使用。七、富尔根氏核染色液1 .席

5、夫氏 (Schiff) 试剂将1g碱性复红加入200ml煮沸的蒸馏水中,振荡5分钟,冷至50C左右过滤,再 加入1mol/LHC120ml,摇匀。待冷至25C时,加 NSsO5(偏重亚硫酸钠)3g,摇匀后装 在棕色瓶中, 用黑纸包好, 放置暗处过夜, 此时试剂应为淡黄色 (如为粉红色则不能 用) ,再加中性活性炭过滤,滤液振荡1 分钟后,再过滤,将此滤液置冷暗处备用 ( 注意:过滤需在避光条件下进行 ) 。在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥,以消除还原性物质。 2Schandium 固定液A液:饱和升汞水溶液50ml 升汞水溶液加 95%酒精 25ml 混合即得。B 液:冰醋酸取

6、A液9毫升+B液1毫升,混匀后加热至60C。3亚硫酸水溶液10%偏重亚硫酸钠水溶液 5ml, 1mol/LHCl5ml ,加蒸馏水 100ml 混合即得。八、Bouin 氏固定液苦味酸饱和水溶液 75ml福尔马林 (40%甲醛 ) 25ml冰醋酸 5ml1g苦味酸可制成75ml饱和水溶液。先将苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。九、乳酸石炭酸棉蓝染色液石炭酸 10g乳酸(比重121) 10ml甘油 20ml蒸馏水 10ml棉蓝 (cottolue) 0 02g将石炭酸加在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,使其 溶解即成。十、瑞氏 (Wright) 染色液瑞氏染料粉末 0 3g甘油 3ml甲醇 97ml将染料粉末置于干燥的乳

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