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1、高中生物选修三知识点总结一、 基因工程(DNA重组技术):体外、定向、分子水平 基本工具:限制性核酸内切酶(限制酶)来自原核细胞，识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 DNA连接酶: E?coliDNA连接酶(只黏性末端) T4DNA连接酶(黏、平末端也可但效率低) 载体:质粒、入菌体的衍生物、动植物病毒 条件:?能在宿主细胞内稳定存在复制表达 一种或多种限制酶切点 ?标记基因(抗生素抗性基因、荧光基因) 基本操作程序: 1、目的基因的获取:(人工合成、体内提取) ?从基因文库获取 基因组文库 e.g.cDNA文库(部分基因文库) 大
2、小 大 小 启动子 有 无 内含子 有 无 基因数目 某种生物全部基因 部分基因(基因选择性表达) 物种间基因交流 部分可以 可以(mRNA逆转录) ?PCR技术扩增目的基因:模板、Taq酶(热稳定DNA聚合酶)、原料&能量(dXTP)、引物(过量) 五物混合，加热至90,95?，DNA解旋，冷却到55,60?，引物与互补DNA链结合，加热至70,75?， Taq酶从引物起始互补链的合成 ?人工化学合成:基因比较小，核苷酸序列已知 2、基因表达载体的构建:(基因工程的核心) DNA片段，基因的首端，RNA聚合酶识别和结合的部位 启动子:目的基因 终止子:DNA片段 ，基因的尾端 标记基因:鉴别
3、受体细胞中是否含有外源基因，从而将含有外源基因的细胞筛选出来。 (复制原点:仅自我复制的需要，整合到宿主染色体上再表达的不需要) 3、将目的基因导入受体细胞: 转化:是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 (1)导入植物细胞(体细胞、受精卵) ?农杆菌转化法(双子叶植物、裸子植物) 受损，伤口细胞分泌酚类化合物，吸引农杆菌移向，Ti质粒上T-DNA(上插目的基因)转移至受体细胞整合到受体细胞染色体上 ?基因枪法(单子叶植物) ?花粉管通道法 (2)导入动物细胞(受精卵)显微注射技术 (3)导入微生物细胞 优点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少、对人体无害(大肠杆菌
4、) 2+ 步骤:Ca处理细胞，使其成为感受态细胞，重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子 4、目的基因的检测与鉴定: ?DNA分子杂交技术:转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因(目的基因是否进入原核细胞) 转基因生物的染色体DNA(原核质粒)+有同位素标记的目的基因 ?RNA分子杂交技术:目的基因是否转录出了mRNA 转基因生物的mRNA+有同位素标记的目的基因 ?抗原,抗体杂交:目的基因是否翻译成蛋白质 转基因生物的蛋白质+相应的抗体 ?个体生物学水平的鉴定:抗虫抗病的接种实验 二、蛋白质工程(自然界不存在的蛋白质) 预期蛋白质
5、功能，设计蛋白质结构，推测氨基酸序列，找对应的脱氧核苷酸序列，人工合成基因，基因工程，蛋白质产品 三、细胞工程: (一)植物细胞工程: 1、植物组织培养技术: (1)原理:植物体细胞的全能性 (2)过程:离体的植物器官、组织或细胞，脱分化(避光)，愈伤组织(未分化，薄壁细胞)，再分化，根芽，细胞分裂分化，植株 (3)条件:无菌(防止微生物污染) 营养(无机盐、有机物、水) 激素(生长素、细胞分裂素，=1诱导脱分化，1生根，1生芽，激素杠杆) 离体 2、植物体细胞杂交技术:克服生殖隔离(不同生物远缘杂交不亲和的障碍) (二)动物细胞工程: 1、动物细胞培养: (1)原理:一些动物细胞在体外可生长
6、增殖 (2)过程: 动物组织块，剪碎，胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，制成细胞悬液 原代培养:转入培养瓶，细胞贴壁(培养瓶内壁光滑无毒易于贴附)，细胞有丝分裂，接触抑制 胰蛋白酶处理 分瓶继续传代培养(10代以内以保持正常的二倍体核型，50代以上癌细胞) (3)条件: 无菌无毒的环境:用具无菌处理;培养液中加抗生素;定期更换培养液(清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害) 营养:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清血浆 温度和pH:动物体温(哺乳36+ -0.5?)，pH=7.2-7.4 气体环境:95%空气+5%CO2(维持培养液pH) 2、动物体细胞核移植
7、技术(克隆动物)胚胎细胞核移植(易) 移入去核卵母细胞 3、动物细胞融合(细胞杂交):除物理化学法外，还可用灭活的病毒诱导 4、杂交瘤技术(生产单克隆抗体) (1)传统方法:向动物体内反复注射某种抗原，产生抗体后从血清中分离，抗体产量低纯度低特异性差 (2)单克隆抗体优点:特异性强，灵敏度高，并能大量制备 四、胚胎工程:早期胚胎或配子水平 (一)体内受精和早期胚胎发育: 1、精子的发生:睾丸的曲细精管内，初情期开始 变形:细胞核精子头，高尔基体顶体，中心体尾，线粒体尾的基部的线粒体鞘， 其他物质原生质滴向后脱落 2、卵子的发生:卵巢及输卵管 胎儿性别分化后:卵原细胞有丝分裂，并变成初级卵母细胞
8、，被卵泡细胞包围形成卵泡 卵泡的形成和在卵巢内的储备在出生前(胎儿时期完成) 初情期后:初级卵母细胞次级卵母细胞和第一极体减二中期停卵子、极体 马狗排卵 猪牛羊排卵 受精 卵子是否受精的标志:卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体 3、受精:输卵管内完成 (1)精子获能 (2)卵子的准备:达到减数第二次分裂中期 (3)受精: 顶体反应，释放顶体内酶，溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠、透明带，(精子触及卵黄膜的瞬间)透明带反应，精子外膜和卵黄膜相互融合(标志着精子入卵)，卵黄膜的封闭作用&精子尾部脱离形成雄原核，卵子减二完成，排出第二极体，形成雌原核，比雄原核小，核融合(标志受精卵的产生) 防
9、止多精入卵:透明带反应 卵黄膜的封闭作用 、胚胎发育:卵裂期(透明带内，有丝分裂，胚胎的总体体积并不增加，或略有减小) 4(1)桑椹胚:细胞数目32个，全能细胞 (2)囊 胚:开始出现分化，内细胞团(胎儿);囊胚腔;滋养层细胞(胎膜胎盘) 孵化:透明带破裂，胚胎伸展出来 (3)原肠胚:内细胞团外胚层、内胚层、中胚层，原肠腔 (二)体外: 1、体外受精: (1)卵母细胞的采集:实验动物、猪、羊促性腺激素处理超数排卵，输卵管中冲取 大牛:屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞;活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 人工培养至减二中期 扇形的面积S扇形=LR2(2)精子的采集和获能:假阴道法、手握法、电刺激法 获能处
10、理:培养法(人工配制的获能液);化学诱导法(一定浓度的肝素或钙离子载体溶液) (3)受精:获能溶液或专用的受精溶液 2、胚胎的早期培养: 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清 12.与圆有关的辅助线向受体移植或冷冻保存 3、胚胎移植: 74.94.15有趣的图形3 P36-41(1)意义:充分发挥雌性优良个体的繁殖能力;大大缩短了供体本身的繁殖周期;良种畜群迅速扩大，加速了育种工作和品种改良;不受时间地域限制，节省购买种畜费用;胚胎冷冻保存品种资源和濒危物种 (2)基本程序: ?对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体
11、是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。 ?同种优秀公牛配种或人工授精。 ?把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(冲卵)，胚胎进行质量检查，向受体移植或放入液氮中保存。 ?对受体母牛进行是否妊娠的检查。 2. 图像性质：(3)生理学基础: ?同期发情处理，为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。 5.圆周角和圆心角的关系:?早期胚胎在一定时间内处于游离状态，不与母体子宫建立组织上联系，可以胚胎收集。 ?受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，胚胎可以在受体的存活。 一年级数学下册教材共六个单元和一个总复习，分别从数与代数、空间图形、实践活动等方面对学生进行教
12、育。?供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但遗传特性在孕育过程中不受影响。 4、胚胎分割: 实体显微镜、显微操作仪弦和直径： 弦：连接圆上任意两点的线段叫做弦。 直径：经过圆心的弦叫做直径。发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚(内细胞团均等分割) 1.正切：5、胚胎干细胞(ES或EK细胞): (2)扇形定义:一条弧和经过这条弧的端点的两条半径所组成的图形叫做扇形.来源于早期胚胎或原始性腺 具有胚胎细胞的特性:体积小，细胞核大，核仁明显;具有发育的全能性 体外诱导分化:(1)治疗人类的某些顽症 (2)培育出人造组织器官，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。 (3)饲养层细胞上或添加抑制剂的培养液中不分化，加入分化诱导因子(牛黄酸、丁酰环3、思想教育，转化观念端正学习态度。腺苷酸)，是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。