免疫检验项目标准操作程序概要.docx

《免疫检验项目标准操作程序概要.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《免疫检验项目标准操作程序概要.docx（29页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、检验项目标准操作程序(SOP)责任部门：免疫室文件编号：版本/ XXXX -JYK- MY-XM修订号：B/1，共 25页编写者：XXX XXX XXX审核者：XXX批准者：批准日期：2012年09月27日实施日期：2012 年10月01日科.主任:XXX目录1 .乙肝病毒表面抗原诊断操作规程12 .乙肝病毒表面抗体诊断操作规程23 .乙肝病毒e抗原诊断操作规程34 .乙肝病毒e抗体诊断操作规程45 .乙肝病毒核心抗体诊断操作规程56 .甲型肝炎病毒IGM抗体诊断操作规程67 .戊型肝炎病毒IgG抗体诊断操作规程78 .人类免疫缺陷病毒抗体检测规程99 .抗双链DNA检测程序1110 .抗核抗

2、体检测程序1211 . TORCH-IgM四联检 测规程1312 . EB病毒抗体检测程序1413 .可提取性核抗体原自身抗体操作规程1514 .抗精子抗体检测规程1715 .抗子宫内膜抗体检测规程1816 .HPV抗体检测规程1917 .结核分支杆菌抗诊断试剂2018 .梅毒甲苯胺红不加热血清试验2219 .流行性出血热IGM 2420.丙型肝炎病毒抗体诊断25乙肝病毒表面抗原诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照 （或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。

3、4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A液、B液各1滴,充分混匀,封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，取波长450nm （建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nni ）,先 用空白孔校零，然后读取各孔0D值。二、结果判断：样品0D值/阴性对照平均0D值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。阴性对照0D 值低于0. 05作0. 05计算，高于0. 05按实际0D值计算。三、注意事项：

4、 1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用 小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。乙肝病毒表面抗体诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照 （或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。 5、手工洗板：弃

5、去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A液、B液各1源充分混匀,封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，取波长450nm （建议使用双波长的酶标仪比色，参考波 长630nm ）,先 用空白孔校零，然后读取各孔0D值。二、结果判断：样品0D值/阴性对照平均0D值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。阴性对照0D 值低于0. 05作0. 05计算，高于0. 05按实际0D值计算。三、注意事项： 1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10

6、分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用 小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。乙肝病毒e抗原诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对 照（或阳性对 照）各1滴，并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分 钟o5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、

7、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀,封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，取波长450nm （建议使用双波长 的酶标仪比色，参考波 长630nm ）, 先用空白孔校零，然后读取各孔0D值。二、结果判断：样品0D值/阴性对照平均0D值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。阴性对照 0D值低于0. 05作0. 05计算，高于0.05按实际0D值计算。三、注意事项： 1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清

8、稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。乙肝病毒e抗体诊断操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照各两孔，每孔加 入阴性对 照（或阳性对 照）各1滴，并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分 钟o5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、

9、用酶标仪读数，取波长450nm （建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm ）,先 用空白孔校零，然后读取各孔OD值。二、结果判断：Cutoff Value 计算：C0V二阴性对照平均0D值邛日性对照平均0D值12标本0D值大于等于C0V为阴性，标本0D值小于C0V为阳性。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用N&N3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。乙肝病毒核心抗体诊断操作规程一、操作步骤：1

10、、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每孔加入待测标本50微升（待测标本用生理盐水1： 30稀释，检测结果为临床意义，请 用户自行选择），设阴、阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴， 并设空白对照1孔。4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟。7、每孔加终止液1滴，混匀。8、用酶标仪读数，取波长450nm （建

11、议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm ）,先 用空白孔校零，然后读取各孔0D值。二、结果判断：Cutoff Value计算：原倍血清C0V二阴性对照平均0D值乘以0.3。1： 30稀释血清C0V=阴性对照平均0D值乘以0. 5o标本0D值大于等于C0V为阴性，标本0D值小于C0V为阳性。三、 注意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去12滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。甲型肝炎病毒IGM抗体诊断

12、操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、代待测标本用生理盐水作1 ： 1000稀释，每孔加入稀释标本100微 升，设阴，阳性对照各2孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各2滴，并设空 白对照1孔，封板，置37度孵育20分钟。4、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复3次后拍干。 洗板机洗板：选择洗涤3次程序后拍干。5、每孔加入HAVAgl滴，酶结合物1滴（空白对照孔不加），充分混匀，封板，置37 度孵育20分钟。6、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗

13、涤5次程序后拍干。7、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀,封板，置37度孵育10分钟。8、每孔加终止液1滴，混匀。9、用酶标仪读数，取波长450nm （建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm ）, 先用空白孔校零，然后读取各孔0D值。二、结果判断：C0V=样品0D值/阴性对照平均0D值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。阴性对照0D值低于0. 05作0. 05计高于0. 05按实际0D值计。三、注 意事项：1、使用前试剂应摇匀，并弃去2滴后垂直滴加。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、使用试剂盒应视为有传染性物质，请按传

14、染病实验室检查规程处理。戊型肝炎病毒IGg抗体诊断操作规程一、测定步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、每次实验均需设立空白对照2孔，阳性对照2孔，阴性对照2孔。4、每孔加样品稀释液100微升。（阳性对照孔、阴性对照孔除外）空白对照直 接加入样品稀释液100微升。5、加待测标本，每孔10微升。阳性对照、阴性对照不需稀释，直接加入100微升于各相应孔内。震荡混匀，封板，置37度孵育30分钟。6、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。7、每孔加入酶结合物100微升（或两滴）

15、，封板，置37度孵育30分钟。8、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复5次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。9、每孔加显色剂A液、B液各50微升（或一滴），充分混匀，封板，置37度孵育10分钟。10、每孔加终止液1滴，混匀。11、用酶标仪读数，取波长450nni （建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm ）, 先用空白孔校零，然后读取各孔0D值。二、结果判断：Cutoff Value 的计算：C0V二阴性对照平均0D值+0. 22标本0D值大于等于Cut off Value为阳性标本0D值小于Cut off Value为阴性阴性对照平均0D值小于0.0

16、5 ,按实际计，若阴性对照平均0D大于等于 0.05 , 按 0. 05 计。三、注意事项：1、使用前试剂应摇匀。2、封片不能重复使用。3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。4、若试验结果阴阳性对照有疑问，该试验视为无效，需重做。5、洗涤液用前需25倍稀释，若洗涤液出现结晶，可置37度使之溶解6、不同批号的试剂不可混用。7、使用试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理人类免疫缺陷病毒抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用2、将标本对应微孔按顺序编号。3、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸锵水或去离子水20倍稀释至1000ml备用。4、编号：

17、将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照一型、二型各一孔, 空白对照一孔。5、加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100ul。6、温育：覆盖黏胶纸，置37度孵育30分钟。7、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升 /孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。8、每孔加酶结合物100微升，取新粘胶纸覆盖放映板，置37度孵育30分钟。9、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升 /孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。10、每孔加入底物缓冲液50微升，TMB50微升，混匀，置37度显色

18、10分钟。11、加终止液50微升震荡反应板5秒钟，使之充分混匀。12、在酶标度数仪上，取波长450nm （建议使用双波长酶标仪比色，参考波长630nm ）, 仪空白对照孔校零，读取每孔吸收值（加 终止液后，务必在15分钟内读数完毕）二、结果判断：抗HIV阳性对照0D值大于0.8,抗HIV阴性对照0D值小于0.08。Cutoff Value=阳性对照值乘以10% （若阳性对照0D值大于2. 5按2. 5计算）标本0D值小于等于Cutoff Value为阴性。标本0D值大于Cutoff Value为阳性。三、注意事项：1、在试剂的使用单位必须使当地卫生行政部门标准的HIV初筛试 验室。2、整个检测

19、工作必须符合HIV试验室管理范围和生物安全守则规定，严格防止交叉感染。 操作时必须带手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。3、HIV检测结果的判定不许以酶标仪的读数为准。4、标本和酶结合物均应用加样器加注，并经常校对其准确性。5、所有样品、洗涤液和各种废弃物 都应按传染物处理。6、洗涤液若出现结晶，可置37度溶解。7、粘胶纸不能反复使用。8、微孔条从冷藏环境中取出时，应在室温平衡至无潮气方可使用，未用完的须放入有干燥剂 的密封袋中保存。抗双链DNA检测程序一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴入2滴试剂一（洗涤液）于反应板

20、中央孔中，待完全渗入4、滴入100ul血清于反应板孔中待完全渗入。5、滴加3滴试剂二（金标液）于反应板孔中，待完全渗入。6、滴入三滴试剂一于反应板孔中，待完全渗入。二、结果判断阳性：反应板孔中央出现2个红色圆斑，为阳性。阴性：反应板孔中央出现1个红色 圆斑，为阴性。三、注意事项：1、若遇冬天室内温度较低时（16度左右），可在37度水浴箱内操作2、陈旧血清盒高脂血 症血清一般不宜使用。3、如果质控斑点太浅请多加2滴市集二。若膜的背景较深，可多滴几滴试剂二。若膜的背 景较深，可多滴加几滴试剂一充分洗涤。阳性斑点较弱时，可延长至20 分钟观察结果。4、检测一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束

21、。抗核抗体检测程序一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴入2滴试剂一（洗涤液）于反应板中央孔中，待完全渗入。4、滴入100ul血清于反应板孔中待完全渗入。5、滴加3滴试剂二（金标液）于反应板孔中，待完全渗入。6、滴入三滴试剂一于反应板孔中，待完全渗入。二、结果判断阳性：反应板孔中央出现2个红色圆斑，为阳性。阴性：反应板孔中央出现1 个红色圆斑，为阴性。三、注意事项：1、若遇冬天室内温度较低时（16度左右），可在37度水浴箱内操作。2、陈旧血清盒高脂血症血清一般不宜使用。3、如果质控斑点太浅请多加2滴试剂2o若膜的背景较深，可多滴

22、几滴试剂2。若膜的 背景较深，可多滴加几滴试剂1充分洗涤。阳性斑点较弱时， 可延长至20分钟观察结果。4、检测一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。TORCH-1 gM四联 检 测 规 程一、操作步骤：1、取出试剂盒，室温放置5-10分钟。2、取出检测板，在中央孔加A液200ul （四滴），待渗入。3、加待测血清200ul （四滴），待渗入。4、加A液洗涤液100ul （2滴），待渗入。5、加B液检测液200ul （四滴），待渗入。6、在加A液150ul （3滴）,然后直接观察结果。二、结果判断：阴性：仅质控点出现红色斑点为阴性反应。阳性：除质控点出现红色斑点外，四角的检测点也有红色或

23、浅红色斑点出现。哪一个检测点出现红色斑点即为相应的IgM抗体阳性。如左上 角检测点TOX出现红色斑点即为弓形体IgM抗体阳性；左上角TOX和左 下角CMV出现红色斑点为弓形虫和巨细胞病毒检测双阳性；左上角TOX和左下角CMV , 和 右上角RUV出现红色斑点为弓形虫、巨细胞病毒和风疹病毒三项阳性；左上角TOX ,左 下角CMV、右上角RUV、和右下角HSV二出现红色斑点即为弓形虫、巨细胞病 毒、风疹病毒和单纯疱疹病毒二型检测阳性。EB病毒抗体检测程序一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴入2滴试剂一（洗涤液）于反应板中央孔中，待

24、完全渗入。4、滴入100ul血清于反应板孔中待完全渗入。5、滴加3滴试剂二（金标液）于反应板孔中，待完全渗入。6、滴入三滴试剂一于反应板孔中，待完全渗入。二、结果判断阳性：反应板孔中央出现2个红色圆斑，为阳性。阴性：反应板孔中央出现1 个红色圆斑，为阴性。三、注意事项：1、若遇冬天室内温度较低时（16度左右），可在37度水浴箱内操作。2、陈旧血清盒高脂血症血清一般不宜使用。3、如果质控斑点太浅请多加2滴试剂2o若膜的背景较深，可多滴几滴试剂2。若膜的 背景较深，可多滴加几滴试剂1充分洗涤。阳性斑点较弱时， 可延长至20分钟观察结果。4、检测一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。可提取性

25、核抗体原自身抗体操作规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、按所需量将浓缩洗涤液用蒸锵水1： 10稀释。4、取出反应槽，每槽加入0. 5ml洗涤液然后加入待检血清10ul ,充分混匀，缓慢摇动于 37度孵育30分钟。5、弃 去槽内液体，再 吸水纸上拍干，用 洗涤液洗涤4次，每 次每槽1ml洗 涤一分钟。6、每槽加入洗涤液0.5ml ,酶标抗体20ul ,混匀，缓慢摇动于37度孵育30分钟。7、弃 去槽内液体，再 吸水纸上拍干，用 洗涤液洗涤4次，每 次每槽1ml洗 涤一分钟。8、加入显色液A液B液各0.5ml ,室温反应10分钟

26、。9、每槽加入0. 5ml终止液，终止反应，1分钟后弃去液体，用自来水洗涤数次，取出 膜条，用吸水纸吸干后即可进行结果判断。二、结果判断：1、结果判断请参看标准谱带图，零位线下约2mm出的第一条显色带为试剂质控线，此显色 带若不出现，说明试剂失效。2、判断结果时，要注意将谱带定位与带型结合起来。带型指一种抗体有多条区带时，区带 间相对不变的位置关系构成的图形。如 抗Scl-70常出现2-3条；抗DE （抗Liu ）常 出现5-6条等等。谱带定位时与标准带相差1mm内属允许 范围。3、本试剂盒也可做DM-53、抗RA-54检测，类风关病人除有54KD抗体外。也可出现36KD。 三、注意事项：1、

27、浓缩洗涤液需临用前稀释，整个操作中，洗涤液用量大约为每人份10ml ,可参照此量稀 释。未用完的洗涤液弃之，不可留作下次用。2、全部操作最好再生化平台上摆动进行，改用手 工间隙晃动也可检测，但 敏感性会有所下 降。3、显色液A、B需恢复至室温放可使用。显色液有棕色颗粒时。不影响检 测结果。4、标准带谱为根据相应标准血清定位后，用电脑制作，每个试剂盒对应一张标准带谱，进行 结果判断时，不同试剂盒间的标准带谱不能混用，要注意膜条铝塑带上批号与标准带谱下 方批号一致。5、不同血清标本，不同带型，显色强度会不一致。遇到弱阳性结果时，请 仔细观察。6、诊断不应该只建立在单个检测基础上，所 有检测结果必须

28、考虑病人的临床病史和（或）其他检测结果。抗精子抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴加2滴标本稀释液于各标本得反应孔中（空白及阴、阳对照孔不加）4、取5ul血清加于反应孔内，用移液器反复吹打几次，直至孔内液体由绿色 变为兰色，阴性、阳性对照孔各加一滴阴性阳性对照。5、将反应板震荡使样品充分混允（震荡30秒）后，置37度水浴20分钟。6、先用蒸锵水将40倍得浓缩洗涤液稀释，（1）手洗：甩去孔内液体用洗涤液注满各孔， 放置20秒后用力甩去，重复5次后拍干。（2）机洗：5次，每孔注满洗 涤液，停留20秒后尽力拍干。7、每孔

29、加酶结合物1滴，置37度水浴10分钟。8、每孔加底物A液、B液各一滴，置37度水浴10分钟。9、自水浴箱取出后马上自测或立即加一滴终止液，混匀后用酶标仪读取结果。二、结果判断：1、目测法：无色为阴性，兰色为阳性。2、比色法：在450nm波长下用空白孔调零读取各孔0D值。标本孔0D值大于等于0. 3为阳性。标本孔0D值小于0. 3为阴性。三、注意事项：1、不 同批号的试剂请勿混用，操 作时反应板置把白色背景下加 样变色更明显。2、洗涤时各孔须加满，防止孔中有游历酶不能洗净。3、试剂凭用前应摇匀。标本不可反复冻融，避免用溶血浑浊标本。4、请将拆封后未用完的板条，放入自封口袋内封紧保存。抗子宫内膜抗

30、体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平 衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、滴加2滴标本稀释液于各标本得反应孔中（空白及阴、阳对照孔不加）4、取5ul血清加于反应孔内，用移液器反复吹打几次，直至孔内液体由绿色 变为兰色，阴性、阳性对照孔各加一滴阴性阳性对照。5、将反应板震荡使样品充分混允（震荡30秒）后，置37度水浴20分钟。6、先用蒸锵水将40倍得浓缩洗涤液稀释，（1）手洗：甩去孔内液体用洗涤液注满各孔， 放置20秒后用力甩去，重复5次后拍干。（2）机洗：5次，每孔注满洗 涤液，停留20秒后尽力拍干。7、每孔加酶结合物1滴，置37度水浴10分钟。8、每孔

31、加底物A液、B液各一滴，置37度水浴10分钟。9、自水浴箱取出后马上自测或立即加一滴终止液，混 匀后用酶标仪读取结 果。二、结果判断：1、目测法：无色为阴性，兰色为阳性。2、比色法：在450nm波长下用空白孔调零读取各孔0D值。标本孔0D值大于 等于0. 3为阳性。标本孔0D值小于0. 3为阴性。三、注意事项：1、不同批号的试剂请勿混用，操作时反应板置把白色背景下加样变色更明显。2、洗涤时各孔须加满，防止孔中有游历酶不能洗净。3、试剂凭用前应摇匀。标本不可反复冻融，避免用溶血浑浊标本。4、请将拆封后未用完的板条，放入自封口袋内封紧保存。HPV抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，

32、至室温中平衡30分钟后使用。2、将标本对应微孔按顺序编号。3、将10 X样本稀释液和20 X洗涤液用蒸储水分别稀释成1 X应用液。4、样本血清按1： 100稀释。5、阳性对照、阴性对照、标准血清孔，每孔先加100ul生理盐水，再分别取相应血清10ul 加入孔中。6、将已稀释的样本血清分别加入到酶标板中，每孔100ul。放置37度，20分钟后弃去 孔内液体。7、洗板：酶标板每孔加入洗涤液250ul、30秒后弃去孔中液体，重复洗板3次，拍干。8、加酶结合物：每孔两滴，37度20分钟后弃去孔中液体，洗板4次，拍干。9、显色与终止：分别加底物A、底物B各一滴，室温避光显色，见标准血清出现浅兰色时（约

33、十分钟），目测判定结果；或每孔加终止液1滴，测0D值。二、结果判断：1、目测：颜色深于或等于标准血清者为阳性，否则为阴性。2、以酶标仪450nm波长测定各孔0D值，样品0D值大于或等于标准血清为阳性，否则为 阴性。三、注意事项：1、不同批试剂不得混用。2、再有效期内使用。结核分支杆菌抗诊断试剂本品采用纯化的结核分支杆菌特异性外膜抗原，利用斑点免疫金渗滤 试验原理，检测人血清中结核分支杆菌抗体，用于结核病的辅助诊断。试剂盒组成1.反应板20人份4.金标液1x3. 0ml2 .封闭液1x4. Omi5,阴性对照1x0. 1ml3 .洗涤液2x7.0ml6.阳性对照1x0. 1ml使用方法1 .在检

34、测板的反应孔中间，加入两滴封闭液，等待薄膜吸入；2 .取40微生新鲜的血清标本，加入反应孔中间，等待薄膜吸入；3 .在反应孔中间加入6滴洗涤液，等待薄膜吸入；4 .在反应孔中间加入2滴金标液，等待薄膜吸入；5 .在反应孔中间加入6滴洗涤液，等待薄膜吸入，目测结果。结果判定阳性一质控点显示红色，反应孔中间有色斑点出现。阴性一质控点显示红色，反应孔中间无有 色斑点出现或仅为痕迹。注意事项1.必须使用新鲜血清标本。血浆标本必须用玻璃棒剥离纤维蛋白，保证血清无混 浊沉淀，以免吸取导致反应膜孔阻塞。2,必须以单人份操作，严禁多标本同时检测，每个标本的操 作步骤需要连续 进行，不宜停顿 过长。3,质控点显

35、示红色表明药盒有效；阴阳性对照仅供系统显色反应检定，临床阳性 标本显色深浅可以与阳性对照不同。4 .少数标本（急性感染.高血脂.溶血等）可出现背景偏红，一般不影响结果判断。可通过 将标本用封闭液1： 3稀释，加样80微生背景将获得改善。5 .各滴瓶溶液，使用后应立即旋紧瓶盖，尽 量避免与外界空气接触，以保证 溶液免受污染， 影响检测质量。6 .特殊情况下，因标本无法及时检测，应放置于-20摄适度以下保存，临用前溶解， 离心去除沉淀。保存于2-8干燥处保存梅毒甲苯胺红不加热血清试验本试剂采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成。仅在白色卡片上进行实验，诊断以检测血清或血浆中反应素用可作

36、为梅毒病人的和疗效夕参考C试剂盒的组成2. 5mlxl 瓶 lOmlxl 瓶Imxl 支 lmxl 支Imxl 支 lmxl 支120人份480人份1套1套1 . TRUST抗原悬液2 .阳性对照血清3 .阴性对照血清4 .试验专用卡片5 .专用滴管及针头使用方法一.定性试验1 .分别吸取50微生梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆2 .取待检血清或血浆50微生（不需灭活）置于纸卡的另一圆圈中。3 .用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂一滴于上述血清中。4 .按每分钟100转摇动8分钟，肉眼观察结果。二.定量试验将待检血清用 生理盐水作倍比稀释，然后按 上述定性方法进行试验，以呈

37、现明显凝 集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。结果判断1 .阳性反应（+-+）：可见中等或较大的 红色凝聚物。2 .弱阳性反应（+-+ ）：可见较小的红色凝聚物。3 .阴性反应（-）：可见均匀的抗原颗粒而无凝聚 物。注意事项1 .本实验在23-29摄适度条件下进行。2 . TRUST试剂使用前应充分摇匀。3 .本试验系非特异性反应，需结合临床进行综合分析，必要时需作梅毒螺旋体抗体特异性试验。储存条件应保存于2-8摄适度.流行性出血热IGM本试剂盒采用酶免疫捕获法，检测流行性出血热IGM抗体，可用于EHF的早期诊断。采用可拆式板条，用于单份或多分标本检测，经反复试验证明，无前滞漏检,能方便，

38、快速检测 患者血清内的EHF-IgM抗体。试剂盒组成1 .包被板条2 .底物液A48孔3. 5ml3 .底物液B4 .酶结合物2ml3. 5ml5.阳性对照1瓶0. 25ml操作步骤1 .取酶标条3孔，用生理盐水洗3次，空 干。2 .加样；取 病人血清（用生理盐水作1： 100稀释）阳 性对照（临用前用生理 盐水作1： 10稀释）及阴性对照（可用正常人血清用生理盐水作1： 100稀释）各100微升，分别 加入酶标孔内，37摄适度水浴30分钟，取出后，每孔直接加入酶结合物一滴充 分混匀，37摄适度水浴1小时，取出，用生理盐水洗5次（每次静至0.5-1分钟）空干。3,加底物：每孔加入底物液A、B各

39、1滴，混匀，置室温闭光显色10-30分钟 观察结果。结果判断目测法：无色为阴性，兰色为阳性。注意事项1 .在运输或储存过程中，酶标条孔内的液体如有外溢，不影响使用。2 .对个别怀疑EHF病人，一次阴性，可隔日在查。3 .每次试验均须设阴 性，阳性对照，以免造成错误结果。储存条件底物液A.底物液B,放4摄适度保存，不能冰冻，酶结合物、阳性对照及酶标条-20摄适 度保存。丙型肝炎病毒抗体诊断一、测定原理：所用包被抗原为合成多胎抗原和基因工程抗原（包括HCV病毒结构区核心抗原和非结 构区抗原）。待测样品加入已包被抗原的反应孔内孵育，若标本中含有抗TCV抗体，则该 抗体与微孔内抗原形成抗原抗体复合物，加入酶结合物，经孵育后酶结合物连接至抗原抗体 复合物上，在TMB底物参与反应的情况下，产生显色反应。 试剂盒组成： 二、测定步骤：1,将100微升样品稀释液加入各个反应孔中（预留空白对照孔一孔.阳性 对照孔阴性 对照孔两孔）2.将10微升待测样品加入加有样品稀释液的反应孔中，混匀。